/

Vector pinakamahusay na set para sa ifa. Helminths igg ifa pinakamahusay

Bilang ng mga kahulugan 96 (48 sa mga duplicate)
Format ng gumaganang tablet: may guhit na 12x8, nasira sa 1 butas.
Sensitivity: 1.5 U/ml.
Saklaw ng pagsukat: 0-400 U/ml.
Ang dami ng sample ng pagsubok ay hindi hihigit sa 25 µl.
Standardisasyon ng mga kondisyon para sa pagsasagawa ng isang enzymatic na reaksyon na may chromogen sa isang thermostatic shaker sa 37ºC.
Itakda ang mga nilalaman:
1. Striped plate 12 x 8 wells, handa nang gamitin - 1 pc.
2. Mga sample ng pagkakalibrate na handa nang gamitin (0-400 U/ml) na may kulay na may iba't ibang antas ng intensity depende sa konsentrasyon - 6 na bote.
3. Kontrolin ang sample - 1 bote.
4. One-component conjugate, handa nang gamitin, hindi nangangailangan ng pagbabanto - 1 bote.
5. Solusyon para sa diluting serums - 1 bote.
6. Chromogenic substrate, isang bahagi - tetramethylbesidine plus (TMB+) na solusyon, handa nang gamitin, hindi nangangailangan ng pagbabanto - 1 bote.
7. Phosphate-buffered saline solution na may Tween - 2 bote.
8. Itigil ang reagent, handa nang gamitin - 1 bote.
9. Pelikula para sa pag-sealing ng tablet - 1 pc.
10. Stencil para sa pagbuo ng isang calibration graph - 1 pc.
11. Reagent bath - 2 mga PC.
12. Mga tip sa pipette para sa 5-200 µl - 16 na mga PC.
Ang tablet ay nakabalot sa isang teak na ziplock bag.
Ang katatagan ng FST-T working solution ay hindi bababa sa 5 araw sa temperatura na +2...8°C.
Itabi ang kit sa temperatura na +2...8°C. Buhay ng istante - 1 taon mula sa petsa ng paggawa.
Nakarehistro sa Roszdravnadzor.

Ang paggamot ng helminthiases sa mga bata ay napakahalaga, dahil ang mga kahihinatnan nito ay maaaring maging isang lag sa pisikal at mental na pag-unlad, mga proseso ng pathological lamang loob at mga sistema, kahit na kamatayan. Bilang karagdagan, ang mga helminth infestations ay lubhang nakakahawa, kaya naman madali silang kumalat sa preschool at mga institusyon ng paaralan. Batay dito, malinaw kung gaano kahalaga napapanahong paggamot helminthiasis sa mga bata.

Ang mga unang palatandaan ng helminths sa mga bata

Ang mga bulate ay mga oportunistikong ahente katawan ng tao, mga uod kung saan ang mga tao ang tiyak na host. Bukod dito, sa ang isyung ito Ang edad ng may-ari ay hindi gumaganap ng anumang papel, iba't ibang uri Ang helminthiasis ay maaaring maobserbahan sa parehong mga bata at may sapat na gulang na mga pasyente.

Gaano kapanganib ang helminthiasis para sa isang bata?

Tulad ng nabanggit kanina, ang mga helminth sa mga bata ay maaaring maging sanhi malubhang sakit at mga patolohiya, na nagreresulta sa mabagal na pag-iisip at pisikal na kaunlaran. Mga posibleng komplikasyon Ang bawat uri ng helminthiasis ay maaaring ganap na naiiba, halimbawa:

Samakatuwid, ang mga helminthiases ng pagkabata ay nangangailangan ng higit na pansin, napapanahong tulong mula sa isang doktor, pangmatagalang pagmamasid ng isang espesyalista, at pag-iwas.

Mga pangunahing sintomas sa mga bata

Ang mga sintomas ng helminthiasis sa isang bata ay maaaring magkakaiba, depende sa uri ng mga bulate:

1. Ang mga roundworm ay agad na nagpapakita ng kanilang sarili na may isang reaksiyong alerdyi, lagnat at pagduduwal sa bata. Ang mga unang pagpapakita ay karaniwang maliwanag, ngunit mabilis na nawawala. Pagkatapos nito, ang mga sumusunod na sintomas ay maaaring sundin:

  • colic at dysbacteriosis at mga bagong silang;
  • sa mga sanggol na wala pang 1 taong gulang, sakit sa lugar ng pusod, mga problema sa dumi, allergy at diathesis;
  • Ang mga matatandang bata ay may mga problema sa pagtulog, hindi mapakali na pag-uugali, bangungot;
  • para sa mga bata 3-7 taong gulang, ang pagduduwal ay tipikal, febrile state, ubo at pananakit ng tiyan, pantal.

2. Ang Enterobiasis, sanhi ng mga pinworm, ay nagpapakita ng sarili sa isang malabong klinikal na larawan. At pagkatapos lamang ng 1 buwan mapapansin mo ang mga sumusunod na sintomas:

  • sa mga bagong silang, pamamaga, pamamaga at pamumula ng anus, pagtanggi na kumain, pag-iyak sa gabi, kawalan ng gana;
  • Ang mga batang wala pang isang taong gulang ay may parehong mga sintomas, gayundin matinding pangangati anus sa gabi (mula 23.00 hanggang 1.00), ang mga batang babae ay nagdurusa sa pamamaga ng mga genital organ;
  • sa mas matatandang mga bata, sakit sa tiyan malapit sa pusod, pagkagambala sa pagtulog, pangangati sa puwit.

3. Ang mga sintomas ng toxocariasis ay mahirap kilalanin maliban sa mababang temperatura katawan at mga reaksiyong alerdyi(pantal, pantal, pangangati at pamamaga). Pagkatapos ng impeksyon, maaaring mangyari ang isang ubo, na kasunod na nagiging sanhi ng pulmonya o brongkitis, lalo na sa mga pinakabatang pasyente.

Ang trichinosis ay nagpapalagay ng banayad na sintomas sa mga bagong silang, kung hindi man ang mga sumusunod na palatandaan ay sinusunod:

  • lagnat na kondisyon;
  • pamamaga ng mukha;
  • pananakit ng kalamnan;
  • mga reaksiyong alerdyi;
  • Ang mga batang 5 taong gulang at mas matanda ay maaaring makaranas ng pinalaki na tonsil, pali, pantal, at namamagang lalamunan.

Pinakamahirap na masuri ang mga sintomas ng helminthiasis sa mga batang 2 taong gulang at mas bata, dahil hindi maipaliwanag ng bata ang kanyang pag-uugali at kondisyon. Samakatuwid, para sa anumang mga hindi tipikal na pagpapakita at pag-uugali ng bata, mas mahusay na magpakita ng isang doktor.

Ano ang dapat mong gawin muna?

Mga uod na natagpuan sa dumi ng tao bata ang pinaka pangunahing tampok sakit, pagkatapos ay dapat kang humingi agad ng tulong sa isang doktor. Walang paggamot para sa helminth ang maaaring maging matagumpay nang walang wastong pagsusuri. Mga paraan ng pagsusulit sa sa kasong ito dapat na komprehensibo, kabilang ang mga sumusunod na pamamaraan:

  • pagkuha ng mga scrapings mula sa anus;
  • pagsusuri ng dumi ng bata;
  • pagsusuri ng dugo;
  • biopsy ng kalamnan sa sa mga bihirang kaso kung pinaghihinalaang trichinosis;
  • serological na pagsusuri ng dugo;
  • X-ray, ultrasound, tomography;
  • ELISA upang makita ang mga antibodies sa dugo.

Mga paraan ng paggamot

Ang paggamot ng helminthiasis sa mga bata ay dapat na komprehensibo, pinag-isipang mabuti, inireseta na may tumpak na mga dosis at dalas ng pag-inom ng mga gamot. Ito ay dahil sa ang katunayan na para sa anthelmintic effect, ang mga gamot na may mga nakakalason na bahagi ay ginagamit, na nangangahulugan na ang hindi makatwiran na paggamit ay maaaring humantong sa side effects. Bilang karagdagan, ito ay angkop sa bahay tradisyunal na paggamot halamang gamot.

Mga katutubong remedyo

Ang modernong paggamot na may mga katutubong remedyo para sa mga naturang sakit para sa mga bata ay nagsasangkot ng 4 na epektibong pamamaraan:

Kahit anong paraan paggamot sa bahay Dapat mong talakayin ito sa iyong doktor nang maaga. Dapat tandaan na ang mga halamang gamot at katutubong remedyong Ang mga kontraindikasyon ay ibinibigay sa anyo ng indibidwal na hindi pagpaparaan.

Paggamot sa droga

  • Para sa enterobiasis at ascariasis, kadalasang ginagamit ang mga gamot tulad ng Pyrantel at Mebendazole. Ang pag-inom ng Pyrantel ay angkop sa isang dosis na 10 mg ng sangkap bawat kilo ng timbang para sa mga pinworm, at 5 mg/kg para sa mga roundworm. Ang Mebendazole ay kinuha dalawang beses sa isang araw, 50 mg, para sa mga batang 2-3 taong gulang sa loob ng tatlong araw na sunud-sunod, dalawang beses sa isang araw, 100 mg para sa tatlong araw nang sunud-sunod para sa mga bata na higit sa 3 taong gulang, pagkatapos ng 3 linggo, ang therapy ay paulit-ulit.
  • Para sa toxocariasis, ang Mebendazole ay inireseta sa ibang dosis - para sa mga batang 2 taong gulang at mas matanda, 100 mg dalawang beses sa isang araw para sa 14-10 araw.
  • Ang trichinosis ay ginagamot sa Mebendazole 5 mg bawat kilo ng timbang, pagkatapos nito ang dosis ay nahahati sa tatlong dosis bawat araw. Ang kurso ng paggamot ay 1 linggo sa ilalim ng mahigpit na pangangasiwa ng medikal.

Pag-iwas sa helminthiases

  • paghuhugas ng kamay kaagad pagkatapos makipag-ugnay sa mga hayop, pagkatapos lumabas at sa mga sandbox, pagpunta sa banyo at bago kumain;
  • kumakain lamang ng malinis na pagkain;
  • wastong isinasagawa ang paggamot sa init ng mga produkto ng karne at isda;
  • pag-inom ng pinakuluang tubig;
  • pagpapanatili ng personal na kalinisan at kalinisan;
  • regular na deworming ng mga alagang hayop;
  • pagsasagawa ng preventive deworming sa mga batang may edad na 2 taon at mas matanda.

Pagsusuri ng dugo para sa toxocara

Mga tampok ng impeksyon sa tao na may toxocariasis

Ang mga carrier ng impeksyon ay mga aso, mas madalas na pusa. Ang mga itlog ng toxocara ay kumakalat sa mga dumi mga asong gala. Kapag nasa lupa, nasa tubig, o nagtatagal sa balahibo ng hayop, sila iba't ibang paraan ay ipinakilala sa isang malusog na katawan.

Reaksyon sa panghihimasok ng isang estranghero

Mula sa medikal na istatistika Nabatid na ang mga nasa hustong gulang ay mas malamang na mahawahan ng toxocariasis, maliban kung ang kanilang trabaho ay nasa panganib. Ang mga bata ay mas malamang na makakuha ng impeksyon.

Ang pinakakaraniwang sintomas ng toxocariasis:

  • Lagnat na walang palatandaan ng anumang sakit.
  • Pagtaas ng temperatura.
  • Ang pagtaas at pagkupas ng sakit sa ulo o tiyan.
  • Hitsura pantal sa balat, na hindi maaaring alisin.
  • Puffiness ng mukha.
  • Isang pagtaas sa antas ng mga eosinophil sa dugo, na nakita sa panahon ng pangkalahatang pagsusuri.

Upang ilagay tumpak na diagnosis, ay hinirang pagsusuri ng immunological para sa mga nakakalason na sasakyan. Ang pagkakaroon ng mga compound ng protina sa dugo na nagdadala ng genetic na impormasyon ng helminth (antigens) ay naghihikayat sa immune system upang makabuo ng mga antibodies ng klase ng igg. Ito ang unang senyales ng impeksyon sa toxocariasis.

Paunang pagsusuri

Ang unang yugto ng kasaysayan ng medikal ng pasyente ay kolektibo. Bago magpadala ng isang pasyente upang kumuha ng pagsusuri sa dugo para sa toxocariasis, kinakailangan na pag-aralan ang background ng sakit at gumawa ng isang paunang pagsusuri.

Pangunahing diagnosis:

  • Pag-aaral ng mga nagpapalubha na pangyayari na maaaring magdulot ng impeksyon - partikular na trabaho sa mga hayop o sa presensya alagang hayop, trabaho sa paghuhukay sa mga potensyal na mapanganib na lugar, mga batang naglalaro sa mga lugar ng paglalakad ng aso.
  • Pisikal na pagsusuri ng pasyente. Survey balat para sa subcutaneous invasion ng Toxocara, eyelids at mga eyeballs, palpation.
  • Pagrereseta ng kumpletong pagsusuri sa dugo. Sa panahon ng impeksyon sa toxocariasis, ang isang makabuluhang pagtaas sa ilang mga tagapagpahiwatig ay katangian - eosinophils (70-80%), lymphocytes, ESR. Habang ang antas ng hemoglobin ay kapansin-pansing bumababa.
  • Pagkuha ng mga sample ng atay. Sa matinding pagsalakay, ang pag-load sa atay ay apektado, na ipinakita sa pamamagitan ng isang malakas na pagtalon sa bilirubin.

Imposibleng makakuha ng direktang kumpirmasyon ng infestation ng Toxocara gamit ang mga conventional tests (dugo, coprogram, smear). Ang pagsusuri sa duodenal ay hindi rin nakakaalam, dahil mahirap ito dahil sa migratory na kalikasan ng larvae.

Matapos matanggap ang mga resulta ng isang paunang pagsusuri na nagpapahiwatig posibleng impeksyon toxocariasis, at pag-iiba ng dapat na diagnosis mula sa mga sakit na may katulad na sintomas, ang pasyente ay inireseta ng ELISA test para sa toxocariasis.

Naka-link na immunosorbent assay

Ang pangunahing layunin ng pag-aaral na ito ay upang kumpirmahin ang pagkakaroon ng Toxocara sa katawan ng tao. Ang mga antibodies sa mga helminth na ito ay matatagpuan sa plasma ng dugo, kaya ito ay kinuha mula sa isang ugat.

Ang pagsubok para sa Toxocara ay nangangailangan ng ilang paghahanda:

  • Huwag kumain ng mataba o mabibigat na pagkain sa araw bago ang pamamaraan.
  • Huwag uminom ng matamis, carbonated at mga inuming may alkohol sa loob ng 24 na oras bago bumisita sa laboratoryo.
  • Kumuha ng mga sample sa walang laman na tiyan.
  • Huwag gumamit mga gamot sa nakaraang araw at sa araw kung saan naka-iskedyul ang pagsusuri.

Kinakailangang isaalang-alang na ang napakakatuturang paraan ng pagtukoy ng pagsalakay ay maaaring maapektuhan ng ilang mga pangyayari. Ang isang maling positibong resulta ay maaaring mangyari kung ang pasyente ay may:

  • Mga sakit sa oncological.
  • Tuberculosis sa baga.
  • Malubhang mga pathology sa atay.
  • Autoimmune syndrome.
  • Antiphospholipid syndrome.
  • Pagbubuntis.

Sa kasong ito, hindi posible na makakuha ng 100% confirmatory analysis, dahil sa ilalim ng mga pangyayari sa itaas sistema ng proteksyon gumagawa din ng mga immunoglobulin (antibodies). Ito ay kinakailangan upang isakatuparan karagdagang mga diagnostic at pag-iba-iba ang toxocariasis sa mga nakalistang salik.

Konsentrasyon ng immunoglobulin (titer) klase ng IgG umabot sa maximum posibleng kahulugan 2-3 buwan pagkatapos ng pagsisimula ng pagsalakay. Kung mas malala ang impeksiyon, mas mataas ang tagapagpahiwatig na ito.

Mga resulta ng ELISA

Upang makagawa ng diagnosis, ang isang enzyme immunoassay ay maingat na pinag-aralan, at ang mga resulta na nakuha ay inihambing sa mga halaga ng sanggunian. Ang titer ng antibody na 1:100 na may positivity index na mas mababa sa 0.9 ay itinuturing na normal.

Mga numerical na halaga ng titers

Ang mga resultang nakuha ay maaaring negatibo, positibo, mahinang positibo, o kaduda-dudang. Ang bilang ng mga titer ng AT ay depende sa kalubhaan ng pagsalakay at kung gaano katagal ito nangyari.

Transcript ng pagsusuri:

  • AT titer hanggang 1:100 – negatibo ang resulta. Walang Toxocara larvae ang nakita sa katawan ng pasyente.
  • Ang AT titer hanggang 1:400 ay isang mahinang positibong resulta. Ang pasyente ay may mahinang invasion o nagkakaroon ng ocular form ng toxocariasis. Sa ilang mga kaso, ang tagapagpahiwatig ay nagpapahiwatig ng isang kamakailang impeksiyon.
  • AT titer hanggang 1:600 ​​- positibo ang resulta. Naghihirap ang tao klinikal na anyo helminthiasis, na kung matukoy, ay nangangailangan ng agarang paggamot.
  • AT titer hanggang 1:800 – positibo ang resulta. Nagsasalita ng malubhang infestation ng isang progresibong kalikasan at isang mataas na posibilidad ng pag-unlad proseso ng pathological lamang loob.

Sa mga pambihirang eksepsiyon, ang mga pag-aaral ng ELISA ay nagpapakita ng isang advanced na anyo ng pagsalakay na may pinaghalong helminthiasis ng ibang pinagmulan. Sa kasong ito, ang kabuuang antibodies ay maaaring mas mataas sa 1:800.

Positibong rate

Sa enzyme immunoassay para sa toxocariasis na may titer na 1:400 – 1:600 ​​​​upang makilala ang pagsalakay mula sa mga side factor, ang nakuha na mga indicator ay inihambing sa reference value. Ang pagkakaiba sa pagitan ng mga numerong ito ay karaniwang tinatawag na index o positivity coefficient.

Karaniwan, sa ELISA form, ang isang indicator ay kabaligtaran ng isa. Ang una ay ang pamantayan, ang pangalawa ay maaaring mangahulugan:

  • Hanggang sa 0.9 - negatibo ang resulta. Walang nakitang Toxocara larvae.
  • 0.9-1.1 - ang resulta ay nagdududa. Sa kasong ito, ang mga paulit-ulit na diagnostic ay inireseta.
  • 1.1-2.2 – medyo positibo ang resulta. Ang isang tao ay isang carrier na may mahinang pagsalakay.
  • 2.2-4.2 – positibo ang resulta. Toxocariasis katamtamang kalubhaan medyo matagal nang umuunlad.
  • Higit sa 4.4 - ang resulta ay nagpapahiwatig ng peak ng helminthic infestation o kamakailang helminthiasis.

Ang CP na may resultang 4.4 at isang nakitang pagtaas ng eosinophilia ng 10% ay maaaring magpahiwatig ng pag-unlad hugis mata toxocariasis at ang pagkakaroon ng mga antibodies sa cross-infestations, kabuuan sa toxocariasis.

Ang immune reaction at optical density ng antibodies (positivity rate) ay depende sa antas ng impeksyon sa Toxocara at sa kanilang lokasyon. Ang pinakamababang titer at mga tagapagpahiwatig ng CP ay nagpapahintulot lamang sa amin na ipalagay ang kawalan ng mga helminth, ngunit hindi upang kumpirmahin ito.

Ang impormasyong ipinakita ay hindi maaaring magsilbi bilang isang mapagkukunan para sa self-diagnosis o self-treatment. Ang mga resulta ng ELISA sa kumbinasyon ng isang paunang pagsusuri ay maaari lamang sabihin sa isang espesyalista tungkol sa pagkakaroon ng isang problema. Sa laboratoryo ng Invitro, ang mga diagnostic ng dugo ay isinasagawa nang may mataas na katumpakan; ang resulta ng pagsusuri ay sinamahan ng mga komento mula sa mga espesyalista tungkol sa positivity rate. Ito ay makabuluhang nakakatulong sa doktor na gumawa ng mas tumpak na diagnosis.


Mga nangungunang tagagawa ng Russia sa segment ng mga reagent kit para sa pag-diagnose ng mga impeksyon: - Vector-Best CJSC, Novosibirsk; - NPO LLC Mga sistema ng diagnostic", Nizhny Novgorod; - JSC "Ekolab", Elektrogorsk MO. Sa larangan ng diagnostic reagent kit ay wala Nakakahawang sakit at mga kondisyong pisyolohikal: - Alkor-Bio LLC, St. Petersburg; - CJSC "Vector-Best", Novosibirsk; - Hema-Medica LLC, Moscow. Sa segment ng reagents para sa mga diagnostic sa laboratoryo allergy: - Alkor-Bio LLC, St. Petersburg; - CJSC "Vector-Best", Novosibirsk; - NPO Immunotex LLC, Stavropol. Produksyon ng mga kagamitan sa laboratoryo: - Picon LLC, Moscow


Pagtatasa ng antas ng posibleng pagpapalit ng pag-import batay sa nomenclature ng mga pagsubok Nomenclature ng mga analytes, mga yunit. Naaprubahan para sa paggamit sa Russian Federation Nagawa sa Russian Federation Degree ng posibleng pagpapalit ng import Mga marker ng mga nakakahawang sakit % Mga marker mga sakit na hindi nakakahawa at mga tagapagpahiwatig ng mga kondisyong pisyolohikal % Mga marker ng allergy % Kabuuan: %


Pagtatasa ng antas ng pagpapalit ng pag-import batay sa dami ng merkado ng mga produkto para sa tablet ELISA Mga segment ng merkado Dami ng merkado sa Russian Federation, milyong rubles. Dami ng benta ng mga domestic tagagawa, milyong rubles. Bahagi ng import substitution Mga marker ng mga nakakahawang sakit % Mga marker ng hindi nakakahawang sakit at mga indicator ng physiological na kondisyon % Mga marker ng allergy % Kagamitan50051% Kabuuan: %


Pagtatasa ng antas ng pagpapalit ng pag-import batay sa dami ng merkado para sa mga produkto para sa mga pamamaraan ng immunochemical sa pangkalahatan Mga segment ng merkado Dami ng merkado sa Russian Federation, milyong rubles. Dami ng benta ng mga domestic tagagawa, milyong rubles. Bahagi ng import substitution Mga marker ng mga nakakahawang sakit % Mga marker ng hindi nakakahawang sakit at mga indicator ng physiological na kondisyon % Mga marker ng allergy % Kagamitan % Kabuuan: %


Mga problema ng mga domestic na tagagawa sa industriya: Ang pamamaraan ng ELISA ay nagiging luma na. Mayroong unti-unting pagpapalit ng domestic IF reagents para sa mga na-import na chemiluminescent; Ang umiiral na sistema ng pampublikong pagkuha ay nagpapasigla sa alinman sa pagbili ng mga pinakamurang kalakal o mga produktong inangkat na may natatanging katangian; Ang isa sa mga pangunahing dahilan para sa hindi sapat na pag-unlad ng mga domestic tagagawa ng mga awtomatikong kagamitan at lokalisasyon ng produksyon ng mga imported na produkto ay ang customs administrative barrier; Ang pangunahing problema ng mga kamakailang panahon ay ang pagbagsak ng sistema ng pagpaparehistro ng estado ng mga bagong produkto sa Republika ng Belarus. Ang pagpasok ng mga bagong produkto sa merkado ay halos tumigil at ang mga dayuhang tagagawa na dati nang nagrehistro ng mahabang listahan ay patuloy na may kalamangan sa mga domestic; Ang pangunahing dahilan para sa teknolohikal na lag ay ang kawalan ng kakayahan na makakuha ng karapatang gumawa ng mga produkto na katugma sa modernong kagamitan; Ang mababang antas ng pagsasama-sama ng mga domestic na tagagawa at patuloy na mga digmaan sa presyo sa kanilang sarili ay hindi nagbibigay ng pagkakataon na bumuo ng mga advanced na produkto at makipagkumpitensya sa mga nangungunang manlalaro sa pantay na termino, kabilang ang sa mga dayuhang merkado.


Mga Panukala: Sa loob ng FCC, ipakilala ang isang hindi mapagkumpitensyang pamamaraan para sa pampublikong pagkuha ng mga produktong medikal na may kasunod na posisyon-by-item na publikasyon. Ang pagtukoy ng mga limitasyon sa financing batay sa average na presyo sa merkado ay magbibigay ng ilang mga pakinabang sa mga domestic na tagagawa, ay maglilimita sa pagkonsumo ng mga mamahaling imported na reagents at kontrolin ang pag-unlad nang mas epektibo mga pondo sa badyet; Isulong ang pagsasama-sama at pagsasama-sama ng mga domestic na tagagawa upang ituon ang mga mapagkukunan sa pag-unlad modernong mga produkto at pagpasok sa internasyonal na merkado. Ang hindi mapagkumpitensyang pamamaraan para sa pagkuha ng gobyerno ay mabilis na mag-iiwan lamang ng mga tunay na mapagkumpitensyang negosyo sa merkado; Maglaan ng pondo ng gobyerno para sa pagpapasigla, batay sa mga prinsipyo pribado-pampubliko pakikipagsosyo, pagbuo ng isang hanay ng mga pagsubok na sapat upang matiyak ang biological na kaligtasan ng bansa; Ang mga benepisyo sa customs ay dapat para sa mga bahagi, hindi para sa mga natapos na produkto; Itugma ang sistema ng pagpaparehistro sa European, kung saan mga produktong medikal Sa mababang antas potensyal na panganib ay nakarehistro batay sa isang deklarasyon ng pagsunod.



MGA DROGA

EBALWASYON NG BAGONG ELISA TEST SYSTEM

"Rotavirus-antigen-ELISA-BEST"

12Zhirakovskaya E.V., 3Ignatiev G.M., 3Indikova I.N., 12Tikunova N.V.

1 Federal State Budgetary Institution State Scientific Center VB "Vector" ng Rospotrebnadzor, nayon ng Koltsovo, rehiyon ng Novosibirsk;

2 Institusyon kemikal na biology at pangunahing gamot, Novosibirsk;

3 Institusyon ng Estado standardisasyon at kontrol ng mga produktong medikal na biyolohikal na pinangalanan. L.A. Tarasevichag Moscow

Ang mga resulta ng mga pagsubok ng sensitivity, specificity at reproducibility ng isang bagong hanay ng mga reagents na "Rotavirus-antigen-ELISA-BEST" na binuo sa JSC "Vector-Best" (Novosibirsk) ay ipinakita. Ang data na nakuha ay nagbibigay-daan sa amin na mahulaan ang diagnostic na katumpakan ng mga resulta kapag ginagamit ang sistema ng pagsubok na ito upang makita ang pangkat A rotavirus antigen sa klinikal na materyal.

Mga keyword: ELISA test system, kahusayan, rotavirus A

Ang mga rotavirus ng Group A (pamilya Reoviridae, genus Rotavirus) ay ang pinakakaraniwang sanhi ng malubhang gastroenteritis sa mga bata mas batang edad sa buong mundo. Ang mga nasa hustong gulang na may mahinang immune system ay madalas ding nagkakasakit. Impeksyon sa rotavirus(RVI) ay isang lubhang nakakahawang sakit na may sa maraming paraan pamamahagi. Ang pinagmulan ng impeksiyon ay isang taong may manifest o asymptomatic form mga sakit, pati na rin ang mga carrier ng virus. Sa mga bata at matatanda, ang RVI ay maaaring magpakita mismo sa anyo ng mga kalat-kalat na kaso, mga sakit sa lokal na grupo, paglaganap at laganap. Ang fecal-oral na mekanismo ng paghahatid ng impeksyong ito ay natanto sa pamamagitan ng pagkain (gatas at mga produkto ng pagawaan ng gatas, pagkain ng sanggol), tubig at contact-domestic na ruta.

Diagnosis ng rotavirus gastroenteritis sa pamamagitan ng klinikal na larawan, lalo na sa kalat-kalat na morbidity, ay nagpapakita ng isang tiyak na kahirapan, dahil ang mga sintomas na katangian ng impeksyong ito ay bahagyang naiiba sa mga sintomas ng iba pang mga acute intestinal infections (AEI) ng iba't ibang etiologies. Differential diagnosis sa mga pasyente na may rotavirus gastroenteritis, ito ay isinasagawa kapwa sa foodborne toxic infections at sa iba pang viral (noroviruses, astroviruses, adenoviruses, coronaviruses, coxsackie at ECHO enteroviruses) at bacterial (salmonellosis, dysentery, cholera, yersiniosis, mga oportunistikong mikroorganismo) etiology. Sa kasamaang palad, hindi lahat ay nagdadalubhasa mga institusyong medikal Ang Russian Federation ay nag-diagnose ng impeksyon sa rotavirus.

Mga pamamaraan ng diagnostic sa kaso ng RVI, ang mga ito ay naglalayong makita ang buong virion, viral antigen o virus-specific RNA sa mga dumi. Isang promising approach sa direktang pagtuklas mga virus kapwa sa klinikal na materyal at sa mga bagay kapaligiran, ay isang paraan ng reverse transcription - polymerase chain reaction(RT-PCR) . SA mga nakaraang taon Ang mga sistema ng pagsubok ay nilikha batay sa mga modernong siyentipikong pag-unlad na may kumbinasyon iba't ibang pamamaraan pagtuklas ng mga rotavirus: multiplex PCR na may hybridization-fluorescent detection ng mga produkto ng amplification "sa pamamagitan ng end point"; endpoint immuno-PCR (IPCR) na may real-time detection; quantitative RT-PCR na may real-time detection. Sa mga laboratoryo ng pananaliksik para sa mabilis na pagtuklas Ang mga rotavirus ay gumagamit ng electron microscopy. Gayunpaman, ang lahat ng mga pamamaraan sa itaas ay medyo labor-intensive at nangangailangan ng mamahaling kagamitan at mataas na kwalipikadong tauhan. Samakatuwid, kapag nagsasagawa ng mga diagnostic sa laboratoryo sa mga ospital at sa setting ng outpatient Ang kagustuhan ay ibinibigay sa mga pamamaraan batay sa pagtuklas ng viral antigen sa mga dumi gamit ang enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) na may mono- at polyponal antibodies sa mga rotavirus. Ang pamamaraang ito ay magagamit para sa mga praktikal na laboratoryo, ay madaling i-set up at nagbibigay-daan sa iyo upang mabilis na makakuha ng mga resulta.

Ang layunin ng gawaing ito ay pag-aralan ang pagiging epektibo ng diagnostic ng bagong hanay ng mga reagents na "Rotavirus-antigen-ELISA-BEST" na binuo sa JSC "Vector-Best", Novosibirsk.

^Setyembre-Disyembre

Mga materyales at pamamaraan

Ang materyal ng pananaliksik ay mga sample ng dumi mula sa mga bata. maagang edad may at walang diagnosis ng ACI mga klinikal na pagpapakita impeksyon sa bituka na naospital sa mga departamento ng mga impeksyon sa bituka at mga impeksyon sa paghinga MUZ "Children's City klinikal na Ospital No. 3" Novosibirsk. Ang mga fecal sample ay nakolekta sa disposable sterile Lalagyang plastik sa dami ng 2-3 ml sa pagpasok ng mga pasyente sa departamento ng ospital at nakaimbak sa - 20 ° C sa loob ng 15 araw. Ang mas mahabang imbakan ng materyal ay isinagawa sa -70 °C.

Ang isang panel ng 104 na mga sample ng fecal, na dati nang nasubok para sa pagkakaroon ng ACI pathogens, ay ginamit sa gawaing ito. sa kanila:

30 mga sample kung saan ang mga rotavirus ng pangkat A lamang ang nakita ng ELISA at RT-PCR; Ang genotyping gamit ang RT-PCR na pamamaraan ay nagpakita na ang mga fecal sample ay naglalaman ng mga rotavirus ng genotype PG1 (18 sample), PG2 (4 sample), PG3 (3 sample), PG4 (2 sample), PG4 (1 sample), PG9 (1 sample) , PG3 (1 sample);

14 na mga sample kung saan ang mga norovirus lamang ng pangalawang genotype ang nakita ng RT-PCR, na nakumpirma sa pamamagitan ng pagtukoy sa pagkakasunud-sunod ng nucleotide ng 5" na rehiyon ng capsid gene na matatagpuan sa norovirus genome sa rehiyon 5085-5485 h.;

15 mga sample kung saan ang mga astrovirus lamang ang nakilala ng RT-PCR, na nakumpirma sa pamamagitan ng pagtukoy sa pagkakasunud-sunod ng nucleotide ng 5" na rehiyon ng capsid gene na matatagpuan sa astrovirus genome sa rehiyon 4526 - 4955 nt; 15 mga sample kung saan Paraan ng PCR ang mga adenovirus lamang ang nakilala;

30 fecal sample (kontrol) mula sa mga bata na walang clinical manifestations ng impeksyon sa bituka na naospital sa respiratory department ng ospital; Panimulang pagsusuri ay hindi nakita ang mga nabanggit na viral pathogen sa mga sample na ito.

Ang pagsubok ng mga sample para sa pagkakaroon o kawalan ng rota-, noro-, astro- at adenovirus ay isinagawa gamit ang pamamaraang RT-PCR gamit ang mga komersyal na kit na nakarehistro sa Russian Federation "AmpliSens No. virus 1, 2 genotypes - 306/322" , "AmpliSens Astrovirus -165", "AmpliSens Adenovirus - 462", "AmpliSens Rotavirus - 290" (ginawa ng Central Research Institute of Epidemiology, Russian Federation). Ang mga sample ay sinuri alinsunod sa mga tagubilin para sa paggamit ng kaukulang reagent kit sa panahon ng expiration date. Ang mga sample na positibo sa Rotavirus ay na-genotype gamit ang RT-PCR. Ang pagtukoy sa presensya o kawalan ng rotavirus antigen ay isinagawa din ng ELISA gamit ang komersyal na IDEIA™ Rotavirus test system (DakoCytomation, UK) alinsunod sa mga tagubilin para sa kit.

Kapag sinubukan ang "Rota-virus-antigen-ELISA-BEST" reagent kit, lahat ng nasa itaas na sample (104) ay na-encrypt at nasubok nang tatlong beses gamit ang test kit. Matapos makumpleto ang pagsubok, ang mga sample ay na-decrypted at ang mga resulta ay nasuri.

resulta at diskusyon

Ang sensitivity ng Rotavirus-antigen-ELISA-BEST reagent kit ay nasuri sa pamamagitan ng bilang ng mga tugma positibong resulta(sa%) na pagsusuri ng mga sample gamit ang nasubok na sistema ng pagsubok at mga sangguniang gamot. Kasabay nito, ipinahayag na kapag gumagamit ng Rotavirus-antigen-ELISA-BEST reagent kit, lahat ng 30 sample na may kumpirmadong presensya ng rotavirus A ay positibo (Talahanayan 1). Dahil dito, ang sensitivity ng test set ng mga reagents sa pag-detect ng mga rotavirus A ay 100%. Dapat tandaan na ang panel ay may kasamang mga sample na may pitong magkakaibang genotypes ng mga rotavirus, at lahat ng mga ito ay matagumpay na natukoy ng "Rota virus rus - antigen - AND FA-B EST" reagent kit.

Ang pagtitiyak ng sistema ng pagsubok ay nasuri sa pamamagitan ng bilang ng mga tugma negatibong resulta(sa%) pagsubok ng mga sample gamit ang nasubok na sistema ng pagsubok na may mga resulta ng mga paunang pag-aaral. Upang masuri ang pagtitiyak, ang panel na ginamit ay may kasamang 30 mga sample kung saan ang mga viral pathogen ay hindi nakilala, pati na rin ang 14 na mga sample kung saan ang mga norovirus lamang ng pangalawang genotype ang nakita gamit ang RT-PCR na pamamaraan, 15 na mga sample kung saan ang pamamaraan ng RT-PCR. nakita lamang ang mga astrovirus; 15 mga sample kung saan ang mga adenovirus lamang ang nakita ng PCR. Natukoy na sa 69 sa 74 na negatibong mga sample, ang mga halaga ng optical density kapag nakita ng Rotavirus-Antigen-ELISA-BEST reagent kit para sa pagkakaroon ng rotavirus A ay hindi lumampas sa mga halaga ng background, iyon ay, ang mga halaga ​nakuha bilang resulta ng pagsukat ng optical density sa mga negatibong sample ng kontrol. Dalawang sample na naglalaman ng mga astrovirus, isang sample na naglalaman ng norovirus ng pangalawang genotype, isang sample na naglalaman ng adenovirus, at dalawang sample kung saan wala sa mga viral pathogen sa itaas ang natukoy na nagpakita ng positibong optical density reading. Dapat pansinin na sa mga sample kung saan wala sa mga viral pathogen ang naunang nakita, ang mga positibong signal ay naitala sa isa lamang sa mga paulit-ulit na pag-aaral(Talahanayan 2). Kaya, ang pagtitiyak ng Rotavirus-antigen-ELISA-BEST reagent kit ay 93.2%.

Sa panahon ng mga pagsubok, ang muling paggawa ng mga resulta na nakuha kapag ginagamit ang set ng pagsubok ng mga reagents na "Rotavirus-antigen-ELISA-BEST" sa klinikal na materyal ay nasuri - lahat ng mga sample ay sinubukan ng tatlong beses sa iba't ibang mga eksperimento upang matukoy ang pagkakaiba-iba ng mga resulta. Sa halos lahat ng mga kaso, ang mga katulad na resulta ay nakuha: ang sistema ng pagsubok ay nakilala ang lahat ng negatibo at mga positibong sample pareho. Ang mga pagbubukod ay dalawang sample kung saan wala sa mga viral pathogen ang dati nang natukoy: sa isa sa mga replika para sa parehong mga sample, ang mga halaga ng optical density ay lumampas sa OPcrit. Dapat pansinin na ang labis ay hindi gaanong mahalaga (Talahanayan 2). Kaya, ang reproducibility ng mga resulta ay 98.8%.

Ang mga resulta ng mga pagsusuri ay nagpakita na ang nasubok na hanay ng mga reagents na "Rotavirus-antigen-ELISA-BEST" sa pagiging epektibo ng diagnostic nito - pagiging tiyak, sensitivity at reproducibility - ay maihahambing sa mga magagamit sa Russian Federation para sa mga diagnostic.

mga sistema ng pagsubok ng kemikal, na ginagawang posible na mahulaan ang pagiging maaasahan ng diagnostic ng mga resulta kapag ginagamit ang pinag-aralan na hanay ng mga reagents na "Ro-tavirus-antigen-ELISA-BEST" upang makita ang pangkat A rotavirus antigen sa klinikal na materyal.

Panitikan

1. Bogomolov B.P. // "Nakakahawang sakit: pang-emergency na diagnostic, paggamot, pag-iwas." - M., Bagong Diamed. - 2007.

2. Vasiliev B.Ya., Vasilyeva R.I., Lobzin Yu.V.// “Acute mga sakit sa bituka. Rotavirus at impeksyon ng rotavirus." - St. Petersburg, Lan. - 2000.

3. Zhirakovskaya E.V., Tikunov A.Yu., Bodnev O.A., et al.// "BIOpreparations". - 2008 - Hindi. 2. - p. 15 - 18.

4. Zhirakovskaya E.V., Maleev V.V., Bodnev A.S. at iba pa // JMEI - 2008 - No. 4. - Kasama. 12 - 16.

5. Ignatyuk T.E., Golutvin I.A., Nasikan N.S., et al. // “Mga Tanong ng Virology”. - 2003. - t. 48. - Bilang 6. - p. 1721.

6. Novikova N.A., Fedorova O.F., Epifanova N.V., Chup-rova A.B. // "Mga Tanong ng Virology". - 2007. - t.52. -No. 3 - s. 19-23.

7. Podkolzin A.T., Mukhina A.A., Shipulin G.A., et al.//

"Nakakahawang sakit". - 2004. - tomo 2. - Bilang 4. - p. 85 -91.

8. Podkolzin A.T., Fenske E.B., Abramycheva N.Yu., et al.// "Therapeutic Archive". - 2007. - t. 79. - Hindi. 11. - p. 10-16.

9. Sergevnin V.I., Voldshmidt N.B., Sarmometov E.V., et al. // "Epidemiology at Nakakahawang sakit" -2004.-Blg. 6.-p. 17-20.

10. Sergevnin V.I., Voldshmidt N.B., Sarmometov E.V., et al. // Kalinisan at Kalinisan. - 2007. - Hindi. 1. - p. 56 -58.

11. Arcangeletti M. S., De Conto E., Pinardi F., at al. // Acta Biomed. Ateneo. Parmense. - 2005. -V. 76(3). - P. 165 -170.

12.Gladstone B.P., Iturriza-Gomara M., Ramani S., at al. // Epidemiol. Makahawa. - 2008. V. 136(3). - P. 399-405.

13. Min B.S., NohYJ., Shin J.H., atal. //J. Virol. Paraan. -2006. - V. 137 (2). - P. 280 - 286.

14. Santos N., Honma S., Timenetsky Mdo C., at al. //J. Clin. Microbiol. - 2008. V. 46 (2). - P. 462 - 469.

15. Schets F. M., van Wijnen J. H., Schijven J. F., at al. //Appl. Kapaligiran. Microbiol. - 2008. - V. 74 (7). - P. 2069 - 2078.

16. Stockman L.J., Staat M.A., Holloway M., at al. // J. Clin. Microbiol. - 2008. - V. 46 (5). - P. 1842 - 1843.

Pagtatasa ng sensitivity at specificity ng "Rotavirus-antigen-ELISA-BEST" reagent kit

Talahanayan 1

Bilang ng mga sample Resulta ng pagtuklas gamit ang mga sangguniang gamot IDEIA Rotavirus Astro-PCR Hopo 2-PCR Adeno-PCR Detection resulta gamit ang "Rotavirus-antigen-ELISA-BEST" kit

1. 30 30 0 0 0 30

2. 15 0 15 0 0 2

3. 14 0 0 14 0 1

4. 15 0 0 0 15 1

Pagtatasa ng pagiging tiyak ng reagent kit "Rotavirus-antigen-ELISA-BEST>-

talahanayan 2

PCR AmpliSense

rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus

0,443 1,306 0,676 0,418

Rotavirus-antigen-ELISA-BEST JSC "Vector-Best"

OPCrit OPCrit OPCrit

0,250 0,263 0,251

> 4,000 > 4,000 > 4,000 3,926 > 4,000 3,939

> 4,000 > 4,000 > 4,000

> 4,000 > 4,000 > 4,000

£Setyembre

Disyembre 2009

AmpliSense

rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus astrovirus astrovirus astrovirus astrovirus astrovirus astrovirus astrovirus

IDEIA Rotavirus DakoCytomation OPCrit = 0.150

0,401 0,322 1,659 0,566 0,518 1,278 1,285 0,809 1,160 0,407 0,218 0,703 1,889 1,069 1,302 0,879 1,842 0,747 0,793 1,013 1,124 0,670 0,726 0,683 0,814 0,997 0,206 0,052 0,050 0,034 0,040 0,048 0,040

Rotavirus-

OPCrit 0.250

> 4,000 3,933 3,987 3,918 3,853 3,972

> 4,000 3,864 3,879 3,897 3,800

> 4,000 3,981

> 4,000 3,713

> 4,000 4.000

> 4,000 3,989

> 4,000 3,872 0,088 0,103 0,230 0,240 0,268 1,819 0,062

antigen-ELISA-BEST "Vector-Best"

OPCrit OPCrit 0.263 0.251

> 4,000 > 4,000

> 4,000 > 4,000

> 4,000 > 4,000 3,821 3,899

> 4,000 3,964 3,845 3,923 3,962 3,871

> 4,000 3,929

> 4,000 3,881 3,884 > 4,000

> 4,000 > 4,000 3,800 3,851 3,818 >4,000

> 4,000 > 4,000

> 4,000 3,995

> 4,000 > 4,000

> 4,000 > 4,000

> 4,000 > 4,000 3,837 3,839

> 4,000 > 4,000

> 4,000 > 4,000

> 4,000 3,986

> 4,000 > 4,000

> 4,000 3,998

> 4,000 > 4,000

> 4,000 3,823 0,063 0,073 0,054 0,061 0,255 0,250 0,256 0,244 0,278 0,560 1,117 1,235 0,052 0,052

astrovirus astrovirus astrovirus astrovirus astrovirus astrovirus astrovirus astrovirus norovirus norovirus norovirus norovirus norovirus norovirus norovirus norovirus norovirus norovirus norovirus norovirus norovirus norovirus adenovirus adenovirus adenovirus adenovirus adenovirus adenovirus adenovirus adenovirus adenovirus adenovirus adenovirus

IDEIA Rotavirus DakoCytomation OIIKpHT = 0.150

0,043 0,043 0,041 0,052 0,040 0,046 0,041 0,040 0,037 0,039 0,030 0,045 0,032 0,030 0,037 0,042 0,034 0,039 0,043 0,043 0,045 0,039 0,050 0,034 0,050 0,043 0,050 0,042 0,041 0,042 0,038 0,047 0,039

PoTaBHpyc-aHTHreH-HOA-EECT 3AO “BeKTop-EecT”

OnKpHT OnKpHT OIIKpHT

0,250 0,263 0,251

0,115 0,075 0,082

0,053 0,046 0,058

0,233 0,198 0,189

0,144 0,105 0,128

0,243 0,062 0,073

0,043 0,040 0,046

0,069 0,043 0,041

0,143 0,044 0,058

0,220 0,206 0,230

3,475 2,577 2,405

0,223 0,247 0,240

0,232 0,236 0,231

0,048 0,042 0,041

0,121 0,085 0,093

0,132 0,111 0,174

0,122 0,052 0,063

0,061 0,044 0,054

0,073 0,035 0,048

0,089 0,046 0,046

0,047 0,043 0,044

0,041 0,039 0,044

0,083 0,046 0,038

0,168 0,074 0,097

0,247 0,118 0,099

0,248 0,251 0,242

0,243 0,259 0,250

0,054 0,048 0,055

0,048 0,040 0,037

0,058 0,045 0,046

0,053 0,045 0,049

0,069 0,058 0,065

0,912 0,344 0,379

0,089 0,037 0,042

Disyembre 2009

PCR AmpliSense

adenovirus adenovirus adenovirus adenovirus negatibo negatibo negatibo negatibo negatibo negatibo negatibo negatibo negatibo negatibo negatibo negatibo negatibo negatibo negatibo negatibo negatibo negatibo negatibo negatibo negatibo negatibo negatibo negatibo negatibo negatibo negatibo negatibo negatibo

IDEIA Rotavirus DakoCytomation OPCrit = 0.150

0,040 0,044 0,039 0,041 0,260 0,044 0,046 0,042 0,047 0,041 0,039 0,048 0,055 0,035 0,039 0,040 0,041 0,033 0,046 0,049 0,048 0,038 0,039 0,029 0,037 0,036 0,043 0,043 0,039 0,042 0,034 0,037 0,041 0,036

Rotavirus - antigen - ELISA-BEST JSC "Vector-Best"

OPCrit O P Crit OPCrit

0,250 0,263 0,251

0,105 0,042 0,043

0,046 0,143 0,133

0,227 0,045 0,042

0,065 0,068 0,054

0,125 0,039 0,042

0,196 0,191 0,182

0,209 0,170 0,154

0,316 0,071 0,073

0,058 0,043 0,049

0,171 0,056 0,061

0,049 0,060 0,064

0,047 0,062 0,065

0,058 0,047 0,066

0,073 0,072 0,066

0,188 0,120 0,109

0,180 0,074 0,072

0,057 0,063 0,058

0,047 0,060 0,047

0,162 0,146 0,143

0,248 0,248 0,260

0,063 0,066 0,104

0,247 0,223 0,251

0,054 0,053 0,070

0,242 0,240 0,248

0,073 0,061 0,103

0,066 0,065 0,064

0,108 0,123 0,192

0,072 0,067 0,071

0,079 0,079 0,087

0,104 0,079 0,164

0,169 0,150 0,162

0,140 0,166 0,146

0,114 0,133 0,131

Ibahagi