Ang paghihiwalay ng film-forming gene ng Staphylococcus aureus sa pamamagitan ng PCR. Methicillin-resistant Staphylococcus aureus - mga pathogen ng nosocomial infection: pagkilala at genotyping

Nabibilang sila sa pamilyang Micrococcoceae. Kasama sa genus Staphylococcus ang 19 na species, kung saan iilan lamang ang pathogenic para sa mga tao: S.aureus, S.epidermidis at S.saprophyticus. Ang mga sakit ay sanhi ng aureus, mas madalas sa pamamagitan ng epidermal at kahit na mas madalas sa pamamagitan ng saprophytic staphylococci.

Morpolohiya, pisyolohiya. Ang mga indibidwal na selula ay may hugis ng isang regular na bola; kapag sila ay dumami, sila ay bumubuo ng mga kumpol sa anyo ng mga bungkos ng mga ubas (slaphyle - bungkos ng mga ubas). Sukat mula 0.5 hanggang 1.5 microns. Sa mga paghahanda mula sa pathological na materyal (mula sa nana) sila ay matatagpuan nang isa-isa, sa mga pares o sa maliliit na kumpol. Ang Staphylococcus aureus ay may kakayahang bumuo ng isang maselan na kapsula.

Ang staphylococci ay facultative anaerobes, ngunit mas lumalago sa ilalim ng aerobic na kondisyon, Gr+. Sa ibabaw ng siksik na nutrient media ay bumubuo sila ng bilog, matambok, pigmented (ginintuang, fawn, lemon dilaw, puti) na mga kolonya na may makinis na mga gilid; sa mga likido - pare-parehong labo. Sa mga laboratoryo, ginagamit nila ang kakayahan ng staphylococci na dumami sa mga kapaligiran na may malaking halaga (6-10%) ng NaCl ( JSA). Hindi kayang tiisin ng ibang bakterya ang ganoong konsentrasyon ng asin; ang mga kapaligiran ng asin ay pumipili para sa staphylococci. Ang mga strain ng Staphylococcus aureus na gumagawa ng mga hemolysin ay nagbibigay ng mga kolonya sa blood agar, na napapalibutan ng isang zone ng hemolysis.

Ang staphylococci ay may ilang mga enzyme na sumisira ng maraming carbohydrates at protina. Ang pagsubok para sa glucose fermentation sa anaerobic na kondisyon. Sa mga enzyme na kasangkot sa pathogenesis ng mga impeksyon sa staphylococcal, tanging ang plasmacoagulase at bahagyang DNase ang katangian ng S. aureus. Iba pang mga enzymes (hyaluronidase, proteinase, phosphatase, muromidase) ay variable (ngunit mas madalas na ginawa ng S.aureus). Ang staphylococci ay synthesize ang mga bacteriocin. Lumalaban sa penicillin (penicillinase).

Mga antigen. Mga sangkap pader ng cell: peptidoglycan, teichoic acid, protina A, mga agglutinogen na partikular sa uri, pati na rin ang isang kapsula ng isang likas na polysaccharide. Ang Peptidoglycan ay nagbabahagi ng mga karaniwang antigen sa mga peptidoglycan mula sa micrococci at streptococci. Ang antigenicity ng teichoic acid ay nauugnay sa mga amino sugars. Protina A Staphylococcus aureus may kakayahang nonspecific na pagbubuklod sa Fc fragment ng IgG, at samakatuwid ito ay pinagsama-sama ng normal na serum ng tao. Ang staphylococci ay may 30 antigens na partikular sa uri ng protina. Ngunit ang intraspecific na pagkita ng kaibhan sa pamamagitan ng istraktura ng Ar ay hindi ginagamit sa pagsasanay.

Pathogenicity. Ang mga lason at enzyme ay may nakakapinsalang epekto sa mga selula at tisyu ng katawan ng tao. Kasama rin sa mga kadahilanan ng pathogenicity ang kapsula, na pumipigil sa phagocytosis at nag-aayos ng complement, pati na rin ang protina A, na nag-inactivate ng complement at nagpipigil sa opsonization kapag nakikipag-ugnayan sa Fc fragment ng IgG.

Ang S.aureus ay may kakayahang mag-secret ng isang bilang ng mga lason, sa partikular na leukocidin, na may masamang epekto sa mga phagocytic cells, pangunahin ang mga macrophage. Ang mga hemolysin (α, β, delta, γ) ay may lysing effect sa mga erythrocyte ng tao at hayop (kuneho, kabayo, tupa). Ang pangunahing isa ay α-toxin na ginawa ng S. aureus. Bilang karagdagan sa hemolytic, ang lason na ito ay may cardiotoxic effect at nagiging sanhi ng spasms coronary vessels at pag-aresto sa puso sa systole, nakakaapekto ito sa mga selula ng nerbiyos at neuron, lyses ng mga lamad ng cell at lysosome, na humahantong sa pagpapalabas ng mga lysosomal enzymes.

Ang paglitaw ng staphylococcal food poisoning ay nauugnay sa pagkilos ng mga enterotoxin na ginawa ng Staphylococcus aureus. Mayroong 6 na kilalang antigens ng iba't ibang enterotoxins (ABCDEF).

Ang mga exfoliative toxins ay nagdudulot ng pemphigus, lokal na bullous impetigo, at isang pangkalahatang iskarlata na pantal sa mga bagong silang. Ang mga sakit ay sinamahan ng intraepidermal detachment ng epithelium ng balat, ang pagbuo ng mga confluent blisters, ang likido kung saan ay sterile. Ang pokus ng impeksyon ng staphylococcal ay kadalasang nasa pusod.

Exoverments: plasmacoagulase nagsasagawa ng plasma coagulation (ang mga protina ay tila nakasuot ng fibrous na takip na nagpoprotekta sa kanila mula sa phagocytosis). Ang malalaking konsentrasyon ng coagulase sa katawan ng pasyente ay humahantong sa pagbaba sa peripheral blood clotting, hemodynamic disturbances, at progresibong pagkagutom sa oxygen ng mga tisyu.

Hyaluronidase nagtataguyod ng pagkalat ng staphylococci sa mga tisyu. Lecithinase sinisira ang lecithin, na bahagi ng mga lamad ng cell, na nagiging sanhi ng leukopenia. Fibrinolysin dissolves fibrin, delimiting ang lokal na nagpapasiklab focus, na nag-aambag sa generalization ng pathological proseso. Ang mga pathogenetic na katangian ng iba pang mga staphylococcal exoenzymes (DNase, muramidase, proteinase, phosphatase), na kadalasang kasama ng aktibidad ng coagulase, ay hindi pa natutukoy.

Ekolohiya at pamamahagi. Sa mga unang araw ng buhay ng isang tao, ang staphylococci ay tumira sa mauhog lamad ng bibig, ilong, bituka, gayundin sa balat, at bahagi ng umuusbong na normal na microflora ng katawan ng tao.

Ang staphylococci ay patuloy na pumapasok sa kapaligiran mula sa mga tao. Ang mga ito ay naroroon sa mga gamit sa bahay, sa hangin, sa tubig, sa lupa, at sa mga halaman. Ngunit ang kanilang pathogenic na aktibidad ay naiiba, Espesyal na atensyon ay ibinibigay sa Staphylococcus aureus bilang potensyal na pathogenic para sa mga tao. Sa pakikipag-ugnay sa isang mapagkukunan ng impeksyon, hindi lahat ng tao ay nagiging carrier ng S. aureus. Ang pagbuo ng bacterial carriage ay pinadali ng mababang nilalaman ng SIgA sa mga pagtatago ng ilong at iba pang mga pagpapakita ng functional failure immune system. Sa gayong mga tao, nabuo ang karwahe ng residente, i.e. Ang mucosa ng ilong ay nagiging permanenteng tirahan ng staphylococci, kung saan ang mga microorganism ay dumarami nang husto at inilabas sa kapaligiran sa napakalaking dosis. SA mga institusyong medikal ang kanilang pinagmulan ay mga pasyente na may bukas na purulent-inflammatory na proseso (ang impeksiyon ay ipinapadala sa pamamagitan ng pakikipag-ugnay). Ito ay pinadali ng mahabang kaligtasan ng staphylococci sa mga nakapaligid na bagay.

Pinahihintulutan nilang mabuti ang pagpapatayo, pinoprotektahan sila ng pigment mula sa mga nakakapinsalang epekto ng sikat ng araw (direkta sinag ng araw sila ay pinapatay lamang pagkatapos ng ilang oras). Sa temperatura ng silid, nananatili silang mabubuhay sa mga item sa pangangalaga ng pasyente sa loob ng 35-50 araw, at sa mga hard equipment sa loob ng sampu-sampung araw. Kapag pinakuluan, agad silang namamatay, sensitibo sa mga disinfectant, sa makikinang na berde, na nagpapahintulot na malawak itong magamit para sa paggamot ng mababaw na nagpapaalab na sakit sa balat.

Pathogenesis ng mga sakit ng tao. May kakayahang makahawa sa anumang tissue ng katawan ng tao. Ito ang mga lokal na purulent-inflammatory na proseso (furuncles, carbuncles, sugat suppuration, bronchitis, pneumonia, otitis media, namamagang lalamunan, conjunctivitis, meningitis, endocarditis, enterocolitis, food poisoning, osteomyelitis). Ang pagbuo ng anumang anyo ng lokal na proseso ay nagtatapos sa sepsis o septicopyemia. Ang mga taong may mga kondisyon ng immunodeficiency ay nagkakaroon ng mga impeksyon ng staphylococcal nang mas madalas.

Ang kaligtasan sa sakit. Ang mga matatanda ay nababanat dahil... may mga natural na mekanismo ng proteksyon at mga tiyak na antibodies na nakukuha sa buong buhay sa pamamagitan ng pakikipag-ugnayan sa mga pasyente at carrier. Sa proseso ng impeksyon ng staphylococcal, nangyayari ang sensitization ng katawan.

Parehong antimicrobial, antitoxic at antienzyme antibodies ay mahalaga sa pagbuo ng kaligtasan sa sakit. Ang antas ng proteksyon ay tinutukoy ng kanilang titer at lugar ng pagkilos. Ang Secretory IgA ay gumaganap ng isang mahalagang papel, na nagbibigay ng lokal na kaligtasan sa sakit ng mga mucous membrane. Ang mga antibodies sa teichoic acid ay napansin sa serum ng dugo ng mga matatanda at bata na may malubhang impeksyon sa staphylococcal: endocarditis, osteomyelitis, sepsis.

Mga diagnostic sa laboratoryo. Ang materyal (nana) ay sumasailalim sa bacterioscopy at inoculated sa nutrient media. Ang dugo, plema, at dumi ay sinusuri gamit ang bacteriological method. Matapos ihiwalay ang isang purong kultura, ang mga species ay tinutukoy batay sa isang bilang ng mga katangian. Sa kaso ng paghihiwalay ng S.aureus, tinutukoy ang plasmacoagulase, hemolysin, at A-protein.

Serodiagnosis: RP (alpha toxin), RNGA, ELISA.

Upang maitatag ang pinagmulan at mga ruta ng pagkalat ng impeksyon, ang mga nakahiwalay na kultura ay phagotyped. Ang pagsusuri sa laboratoryo ay tiyak na kinabibilangan ng pagtukoy sa pagiging sensitibo ng nakahiwalay na kultura o kultura sa mga antibiotic.

Pag-iwas at paggamot. Ang pag-iwas ay naglalayong makilala ang mga carrier ng S.aureus, pangunahin sa mga tauhan mga institusyong medikal, para sa layunin ng kanilang rehabilitasyon. Ang partikular na atensyon ay binabayaran sa pag-iwas sa mga impeksyon ng staphylococcal sa mga bagong silang.

Para sa paggamot ng mga talamak na sakit na staphylococcal, ang mga antibiotics ay inireseta, ang pagpili kung saan ay tinutukoy ng sensitivity ng nakahiwalay na kultura sa isang hanay ng mga gamot. Para sa mga septic na proseso, ang anti-staphylococcal immunoglobulin o anti-staphylococcal plasma ay ibinibigay. Para sa paggamot ng mga talamak na impeksyon sa staphylococcal (chroniosepsis, furunculosis, atbp.), Ang staphylococcal toxoid at autovaccine ay ginagamit, na nagpapasigla sa synthesis ng antitoxic at antimicrobial antibodies.

marami impeksyon sa bacterial tumagas na nakatago at nabura klinikal na larawan , samakatuwid ang mga pagsusuri ay isang kinakailangang bahagi ng pagtukoy ng mga naturang sakit. Mula sa isang epidemiological point of view, ang karwahe ay mahalaga sa pagkalat ng impeksiyon; ito ay mahalaga upang masuri ito sa isang napapanahong paraan at maiwasan ang impeksiyon. Ang mga manggagawa sa mga institusyong medikal at pangangalaga sa bata, maternity hospital, catering unit, at neonatal unit ay lalong mapanganib. Ang isa sa mga naturang bakterya ay staphylococcus. Sa artikulong ito titingnan natin kung paano at saan masusuri para sa staphylococcus at kung ano ang kailangan para dito.

Ang pangunahing paraan para sa pag-diagnose ng staphylococcus ay kulturang bacteriological pinaghiwalay sa media ng kultura, na may pagpapasiya ng sensitivity ng microorganism sa antibiotics.

Ang isang pagsusuri sa dugo para sa staphylococcus ay isinasagawa sa pamamagitan ng isang paraan na nakakakita ng mga antibodies sa bacterial antigen sa suwero. Ilapat ang reaksyon passive hematglutination At naka-link na immunosorbent assay. Isang beses serological na pag-aaral Ang mga pagsusuri sa dugo para sa staphylococcus ay walang diagnostic value. Mahalagang taasan ang titer ng antibody kapag sinusuri ang nakapares na sera pagkatapos ng 7-10 araw. Ang pagtuklas ng mga antibodies ay ginagamit sa purulent-septic na mga proseso na pinukaw ng Staphylococcus aureus (sepsis, cellulitis, abscesses, pigsa, pagkalason, peritonitis, tonsilitis).

Mayroon ding PCR para sa staphylococcus sa dugo, na tumutukoy sa DNA ng pathogen.

Ang mga serological test at PCR ay pantulong sa bacteriological research.

Impormasyon sa pathogen

Ang Staphylococcus ay spherical gram-positive bacterium, immobile, facultative anaerobic, na matatagpuan sa smear sa anyo ng "mga bungkos ng ubas" at pagkakaroon ng enzyme catalase. Mayroong hanggang 30 species ng bacterium na ito. Maaari itong tumira sa mga mucous membrane at balat nang hindi nagdudulot ng pinsala, ngunit may mga species na lubhang mapanganib sa kalusugan at maaaring magdulot ng nagpapaalab na sakit. Mayroong tatlong pangunahing uri ng mga pathogenic microorganism:

  • saprophytic staphylococcus (S.saprophyticus). Mas madalas na sinusunod sa mga babae kaysa sa mga lalaki. Nakatira sa urinary at reproductive system. Maaaring magdulot ng urethritis at cystitis.
  • Staphylococcus epidermidis (S. epidermidis). Matatagpuan sa balat, ito ay karaniwang naroroon sa maliit na dami. Sa kaso ng paglabag balat at nabawasan ang kaligtasan sa sakit ay tumagos sa daluyan ng dugo, na nagiging sanhi mga proseso ng pathological tulad ng: endocarditis, sepsis, conjunctivitis, impeksyon sa sugat at daluyan ng ihi. Ang unang dalawang species ay itinuturing na non-pathogenic sa loob ng mahabang panahon, dahil sila ay coagulase-negative, ngunit ang puntong ito ng view ay pinabulaanan.
  • Staphylococcus aureus (S. aureus). Ito ang pinaka pathogenic sa tatlong species. Maaaring magdulot iba't ibang sakit, na nagaganap sa mga lokal at pangkalahatan na anyo na may pinsala sa iba't ibang organo at balat. Gumagawa ng carotenoid pigment at naglalabas ng enterotoxins type A at B.
Ang Staphylococcus aureus ay lubos na matatag sa kapaligiran, maaaring makatiis ng direktang sikat ng araw hanggang sa 12 oras, isang temperatura na 150 degrees sa loob ng sampung minuto, ay hindi natatakot sa hydrogen peroxide, ethyl alcohol at sodium chloride.

Pagpapadala ng bakterya nangyayari sa iba't ibang paraan:

  1. airborne (kapag nagsasalita, bumahin, ubo);
  2. pakikipag-ugnayan at sambahayan (mga kamay, damit na panloob, mga gamit sa pangangalaga, damit);
  3. pagkain (pagkain, gatas);
  4. endogenous (na may immunodeficiency);
  5. parenteral (para sa mga medikal na pamamaraan).
Ang pinagmulan ng impeksiyon ay may sakit at "malusog" na mga carrier ng bakterya.

Manood ng isang video sa paksang ito

Mga indikasyon

  1. hinala ng impeksyon o bacterial carriage.
  2. regular na naka-iskedyul medikal na pagsusuri mga tauhang medikal at mga manggagawa sa pagtutustos ng pagkain (ang mga manggagawa sa maternity hospital ay sinusuri isang beses bawat anim na buwan, mga departamento ng kirurhiko 1 beses bawat quarter).
  3. pagsusuri bago ma-ospital (upang maiwasan ang mga impeksyon sa nosocomial).
  4. pagbubuntis.
  5. pang-iwas na pagsusuri.
  6. nonspecific nagpapaalab sakit ng isang nakakahawang kalikasan.
Ang mga bagong silang, matatanda at mga sanggol ay higit na nasa panganib ng impeksyon.

Nasa panganib din ang mga mga taong may immunodeficiency(HIV infection), mga adik sa droga, mga taong dumaranas ng talamak mga sakit na viral(trangkaso, hepatitis), Diabetes mellitus, mga sakit sa oncological mga may paso at pinsala, sumasailalim sa paggamot na may corticosteroids at cytostatics, mga pasyente sa hemodialysis.

Paano magpasuri

Para sa serological testing na kinukuha nila venous blood mula sa lugar ng siko, papunta sa isang test tube na may gel na naglalaman ng coagulation activator. Susunod, sa laboratoryo ito ay centrifuged upang paghiwalayin ang suwero, na kung saan ay kasunod na nasubok para sa pagkakaroon ng mga antibodies. Mag-donate lamang ng dugo sa umaga, kapag walang laman ang tiyan.

Para sa polymerase chain reaction Ang venous blood ay dinadala sa isang test tube na may anticoagulant at sinusuri sa pamamagitan ng pagtaas ng konsentrasyon nucleic acid paulit-ulit na pagkopya ng isang seksyon ng DNA.

Para sa pagsusuri ng bacteriological Kadalasan ay kinukuha ang pamunas mula sa lalamunan at ilong.

Maaari ding gamitin ang iba biyolohikal na materyales: plema, gatas ng ina, ihi, dumi, materyal na may ibabaw ng sugat, urogenital smear.

Ang isang pamunas mula sa lalamunan at ilong ay kinukuha sa umaga, ang isang sterile na cotton swab ay kinuha muna mula sa ilong, ang isa ay mula sa lalamunan, pagkatapos ay inilalagay sila sa mga test tube na naglalaman ng isang solusyon sa transportasyon.

2.6 . Mga Alituntunin sa epidemiological surveillance ng nosocomial infection na may petsang 02.09.87. No. 28-6/34.

. Pangkalahatang Impormasyon

Sa huling dekada, ang problema ng mga impeksyon na nakuha sa ospital (hospital-acquired infections, HAI) ay naging lubhang mahalaga para sa lahat ng mga bansa sa mundo. Ito ay dahil, una sa lahat, sa isang makabuluhang pagtaas sa bilang mga strain sa ospital mga mikroorganismo na lumalaban sa malawak na hanay ng mga antimicrobial na gamot. Sa kabila ng makabuluhang pagmamaliit, sa Pederasyon ng Russia Humigit-kumulang 30 libong kaso ng mga impeksyon sa nosocomial ang nairehistro taun-taon, na may pinakamababang pagkawala ng ekonomiya na higit sa 5 bilyong rubles taun-taon. Kabilang sa mga causative agent ng nosocomial infection, ang isa sa mga unang lugar ay nabibilang pa rin sa mga microorganism ng genus.Staphylococcus,ang pinaka pathogenic na kinatawan ng kung saan ayS. aureus. Ang sitwasyon ng epidemiological ay kumplikado dahil sa malawakang pagkalat sa mga ospital, pati na rin ang hitsura ng mga klinikal na paghihiwalay sa kapaligiran ng komunidad.S. aureus,lumalaban sa oxacillin (ORSA o MRSA). MRSA na may kakayahang magdulot ng iba't ibang mga klinikal na anyo ng mga impeksyon sa nosocomial, kabilang ang pinakamalubha, tulad ng: bacteremia, pneumonia, sindrom septic shock, septic arthritis, osteomyelitis at iba pa na nangangailangan ng pangmatagalan at mahal na paggamot. Ang paglitaw ng mga komplikasyon na dulot ng MRSA , ay humahantong sa pagtaas ng oras ng pag-ospital, dami ng namamatay, at malaking pagkalugi sa ekonomiya. Ipinakita na ang pagtaas ng dalas ng mga impeksyon sa nosocomial na naobserbahan sa mga ospital sa buong mundo ay dahil sa pagkalat ng mga strain ng epidemya. MRSA , marami sa mga ito ay may kakayahang gumawa ng pyrogenic toxins - mga superantigens na pumipigil sa immune response saS. aureus.

Mula noong huling bahagi ng 90s ng huling siglo, sa mga ospital ng Russia ay nagkaroon ng pagtaas sa dalas ng paghihiwalay MRSA , na sa isang bilang ng mga ospital ay umabot sa 30 - 70%. Ginagawa nitong hindi epektibo ang paggamit ng maraming antimicrobial na gamot at makabuluhang nagpapalala sa kalidad ng pangangalaga. Medikal na pangangalaga sa populasyon. Sa mga kundisyong ito, ang pagpapabuti ng mga pamamaraan ng epidemiological at microbiological monitoring na naglalayong tukuyin ang mga epidemically makabuluhang strain ay nagiging lalong mahalaga.

. Mga katangian ng MRSA bilang mga pathogen ng mga impeksyon sa nosocomial

4.1. Taxonomy at biological na mga tampok

Pangunahing mga strain at clone ng epidemya MRSA

Ang mga resulta ng paghihigpit ay ipinakita sa (34).

Primer set para sa uri ng pagkakakilanlan SCC mec

Uri ng elementong kinikilala

Pangalan ng panimulang aklat

Pagkakasunod-sunod ng nucleotide

Laki ng amplicon n.p.

CCr uri I

5¢ -ATT GCC TTG ATA ATA GCC I

TCT-3¢

5¢ -AAC STA TAT CAT CAA TCA GTA CGT-3¢

CCr uri II

1000

5¢ -TAA AGG CAT CAATGC ASA AAC ACT-3

CCr uri III

1600

5¢ -AGC TCA AAA GCA AGC AAT AGA AT-3¢

Klase A tes

Gene complex tes ako

5¢ - CAA GTG AAT TGA AAC CGC CT-3¢

5¢ - CAA AAG GAC TGG ACT GGA GTC

CAAA-3¢

Klase B tes(IS272 - mec A)

5¢ -AAC GCC ACT CAT AAC ATA AGG AA-3¢

2000

5¢ -TAT ACC AA CCC GAC AAC-3¢

Subtype IVa

5¢ - TTT GAA TGC CCT CCA TGA ATA AAA T-3¢

5¢ -AGA AAA GAT AGA AGT TCG AAA GA-3¢

Subtype IVb

5 ¢ - AGT ACA TTT TAT CTT TGC GTA-3 ¢

1000

5¢ - AGT CAC TTC AAT ACG AGA AAG

TA-3¢

5.2.5.3. Pagkilala sa mga gene na tumutukoy sa synthesis ng enterotoxins A(dagat), B(seb), C(sec) at toxic shock syndrome toxin (tst-H)

Upang makilala ang mga genedagat, seb, secmultiplex PCR ang ginagamit.

Ang komposisyon ng pinaghalong reaksyon ay pamantayan. Ang panimulang konsentrasyon para sa pagtuklas ng genedagat- 15 pkm/µl, seb, sec- 30 pkm/µl.

Upang matukoy ang gene tst - H konsentrasyon ng MgCl 2 sa pinaghalong reaksyon - 2.0 mM, panimulang konsentrasyon - 12 pkm / μl.

Mode ng amplification No. 1

Mga panimulang aklat para sa pagkilala sa genedagat, seb, sec

Oligonucleotide sequence (5¢ - 3¢)

Lokalisasyon sa loob ng isang gene

Sukat pinalakas produkto

GGTTATCAATGTTGCGGGGTGG

349 - 368

CGGCACTTTTTTCCTTCGG

431 - 450

GTATGGTGGTGTAACTGAGC

666 - 685

CCAAATAGTGACAGTTAGG

810 - 829

AGATGAAGTAGTTGATGTGTAT

432 - 455

CACACTTTTAGAATCACCG

863 - 882

ACCCCTGTTCCCTTATCAATC

88 - 107

TTTTCAGTATTTGTAACGCC

394 - 413

. Organisasyon ng epidemiological surveillance ng nosocomial infections na dulot ng MRSA

Pagsubaybay ng MRSAay isang mahalagang bahagi ng epidemiological surveillance ng nosocomial infections at kasama ang mga sumusunod na bahagi:

Identification, recording at registration ng lahat ng kaso ng nosocomial infections na dulot ng MRSAat kinumpirma ng mga resulta ng microbiological studies;

Pagkilala sa mga kolonisadong pasyente MRSA (ayon sa mga indikasyon ng epidemya);

Pagpapasiya ng spectrum ng paglaban ng mga isolates MRSA sa antibiotics, antiseptics, disinfectants at sensitivity sa bacteriophage;

Pagsubaybay sa katayuan ng kalusugan ng mga medikal na tauhan (karwahe ng mga epidemically makabuluhang strains, morbidity);

Sanitary at bacteriological na pagsusuri ng mga bagay kapaligiran para sa availability MRSA;

Ang pagsasagawa ng molecular genetic monitoring, ang layunin kung saan ay upang makakuha ng data sa istraktura ng mga isolates ng ospital, kilalanin ang mga epidemically makabuluhang sa kanila, pati na rin tukuyin ang mga mekanismo ng kanilang sirkulasyon at kumalat sa ospital;

Pagsubaybay sa pagsunod sa mga sanitary, hygienic at anti-epidemic na rehimen;

Epidemiological analysis ng morbidity at mortality mula sa nosocomial infections, na nagpapahintulot sa amin na gumawa ng mga konklusyon tungkol sa mga pinagmumulan, ruta at mga kadahilanan ng paghahatid, pati na rin ang mga kondisyon na nakakatulong sa impeksyon.

Ang gitnang link ng epidemiological analysis ay dapat na molecular genetic monitoring. Ang pagsusuri ng epidemiological batay sa data nito ay hindi lamang gagawing posible na tama ang pagtatasa ngunit hulaan din ang mga sitwasyon ng epidemya at, sa pamamagitan ng maagang mga hakbang laban sa epidemya, maiwasan ang mga paglaganap ng mga impeksyon sa nosocomial na dulot ng MRSA.

Pang-organisasyon at metodolohikal na pamamahala ng gawain sa pag-iwas at pagkontrol sa mga impeksyong nosocomial na dulot ng MRSA , isagawa mga yunit ng istruktura mga katawan at institusyon na nagsasagawa ng estado sanitary at epidemiological na pangangasiwa sa mga republika, teritoryo, rehiyon, distrito at lungsod. Moscow at St. Petersburg.

Ang mga pederal na ehekutibong awtoridad, kabilang ang mga awtoridad sa pangangalagang pangkalusugan, ay kasangkot sa pagpapatupad ng isang hanay ng mga hakbang upang maiwasan ang mga impeksyon sa nosocomial, kasama. sanhi ng MRSA.

. Mga Alituntunin MUK 4.2.1890-04 "Pagtukoy sa pagiging sensitibo ng mga microorganism sa mga antibacterial na gamot."

Pangunahing mga strain at clone ng epidemya MRSA

Ang mga resulta ng paghihigpit ay ipinakita sa (34).

Primer set para sa uri ng pagkakakilanlan SCC mec

Uri ng elementong kinikilala

Pangalan ng panimulang aklat

Pagkakasunod-sunod ng nucleotide

Laki ng amplicon n.p.

CCr uri I

5¢ -ATT GCC TTG ATA ATA GCC I

TCT-3¢

5¢ -AAC STA TAT CAT CAA TCA GTA CGT-3¢

CCr uri II

1000

5¢ -TAA AGG CAT CAATGC ASA AAC ACT-3

CCr uri III

1600

5¢ -AGC TCA AAA GCA AGC AAT AGA AT-3¢

Klase A tes

Gene complex tes ako

5¢ - CAA GTG AAT TGA AAC CGC CT-3¢

5¢ - CAA AAG GAC TGG ACT GGA GTC

CAAA-3¢

Klase B tes(IS272 - mec A)

5¢ -AAC GCC ACT CAT AAC ATA AGG AA-3¢

2000

5¢ -TAT ACC AA CCC GAC AAC-3¢

Subtype IVa

5¢ - TTT GAA TGC CCT CCA TGA ATA AAA T-3¢

5¢ -AGA AAA GAT AGA AGT TCG AAA GA-3¢

Subtype IVb

5 ¢ - AGT ACA TTT TAT CTT TGC GTA-3 ¢

1000

5¢ - AGT CAC TTC AAT ACG AGA AAG

TA-3¢

5.2.5.3. Pagkilala sa mga gene na tumutukoy sa synthesis ng enterotoxins A(dagat), B(seb), C(sec) at toxic shock syndrome toxin (tst-H)

Upang makilala ang mga genedagat, seb, secmultiplex PCR ang ginagamit.

Ang komposisyon ng pinaghalong reaksyon ay pamantayan. Ang panimulang konsentrasyon para sa pagtuklas ng genedagat- 15 pkm/µl, seb, sec- 30 pkm/µl.

Upang matukoy ang gene tst - H konsentrasyon ng MgCl 2 sa pinaghalong reaksyon - 2.0 mM, panimulang konsentrasyon - 12 pkm / μl.

Mode ng amplification No. 1

Mga panimulang aklat para sa pagkilala sa genedagat, seb, sec

Oligonucleotide sequence (5¢ - 3¢)

Lokalisasyon sa loob ng isang gene

Sukat pinalakas produkto

GGTTATCAATGTTGCGGGGTGG

349 - 368

CGGCACTTTTTTCCTTCGG

431 - 450

GTATGGTGGTGTAACTGAGC

666 - 685

CCAAATAGTGACAGTTAGG

810 - 829

AGATGAAGTAGTTGATGTGTAT

432 - 455

CACACTTTTAGAATCACCG

863 - 882

ACCCCTGTTCCCTTATCAATC

88 - 107

TTTTCAGTATTTGTAACGCC

394 - 413

. Organisasyon ng epidemiological surveillance ng nosocomial infections na dulot ng MRSA

Pagsubaybay ng MRSAay isang mahalagang bahagi ng epidemiological surveillance ng nosocomial infections at kasama ang mga sumusunod na bahagi:

Identification, recording at registration ng lahat ng kaso ng nosocomial infections na dulot ng MRSAat kinumpirma ng mga resulta ng microbiological studies;

Pagkilala sa mga kolonisadong pasyente MRSA (ayon sa mga indikasyon ng epidemya);

Pagpapasiya ng spectrum ng paglaban ng mga isolates MRSA sa antibiotics, antiseptics, disinfectants at sensitivity sa bacteriophage;

Pagsubaybay sa katayuan ng kalusugan ng mga medikal na tauhan (karwahe ng mga epidemically makabuluhang strains, morbidity);

Sanitary at bacteriological na pag-aaral ng mga bagay sa kapaligiran para sa presensya MRSA;

Ang pagsasagawa ng molecular genetic monitoring, ang layunin kung saan ay upang makakuha ng data sa istraktura ng mga isolates ng ospital, kilalanin ang mga epidemically makabuluhang sa kanila, pati na rin tukuyin ang mga mekanismo ng kanilang sirkulasyon at kumalat sa ospital;

Pagsubaybay sa pagsunod sa mga sanitary, hygienic at anti-epidemic na rehimen;

Epidemiological analysis ng morbidity at mortality mula sa nosocomial infections, na nagpapahintulot sa amin na gumawa ng mga konklusyon tungkol sa mga pinagmumulan, ruta at mga kadahilanan ng paghahatid, pati na rin ang mga kondisyon na nakakatulong sa impeksyon.

Ang gitnang link ng epidemiological analysis ay dapat na molecular genetic monitoring. Ang pagsusuri ng epidemiological batay sa data nito ay hindi lamang gagawing posible na tama ang pagtatasa ngunit hulaan din ang mga sitwasyon ng epidemya at, sa pamamagitan ng maagang mga hakbang laban sa epidemya, maiwasan ang mga paglaganap ng mga impeksyon sa nosocomial na dulot ng MRSA.

Pang-organisasyon at metodolohikal na pamamahala ng gawain sa pag-iwas at pagkontrol sa mga impeksyong nosocomial na dulot ng MRSA , ay isinasagawa ng mga istrukturang dibisyon ng mga katawan at institusyon na nagsasagawa ng estado sanitary at epidemiological na pangangasiwa sa mga republika, teritoryo, rehiyon, distrito at lungsod. Moscow at St. Petersburg.

Ang mga pederal na ehekutibong awtoridad, kabilang ang mga awtoridad sa pangangalagang pangkalusugan, ay kasangkot sa pagpapatupad ng isang hanay ng mga hakbang upang maiwasan ang mga impeksyon sa nosocomial, kasama. sanhi ng MRSA.

Ibahagi