Embryology

Embryology- ang agham ng buhay bago ipanganak.

Unang impormasyon tungkol sa pag-unlad ng embryo ng tao sa Sinaunang India, Sinaunang Greece

sa VIII – VI na siglo. BC.

Hippocrates"Sa pitong buwang fetus", "Sa superfertilization",

"Sa Kalikasan ng Bata"

Leonardo da Vinci– isa sa mga nagtatag ng embryology bilang isang eksaktong agham.

"Ang mga ugat ng isang bata ay hindi nabubuo sa sangkap ng matris ng kanyang ina, ngunit sa inunan, na nagsisilbing isang uri ng kamiseta na sumasakop sa matris mula sa loob at konektado dito sa tulong ng villi."

Peter I naglabas ng mga kautusan na nangangailangan ng mga di-mabubuhay na deformidad ng mga ibon, hayop at tao na ibigay sa mga parmasya o komandante ng lungsod.

Noong 1718, lumitaw ang koleksyon ng Kunstkamera.

Karl Reichert noong 1873 una niyang inilarawan ang embryo ng tao sa napakaagang edad na 12–13 araw at gumawa ng mga sketch.

Proogenesis.

Ovum, istraktura, pag-uuri. Babae na itlog, tubal na panahon ng pag-unlad.

· Nucleus, nucleolus. Haploid na hanay ng mga chromosome.

· Cytoplasm, organelles, maraming RNA, walang cell center.

· Yolk inclusions ay phospho- at lipoproteins.

· Ang mga cortical granules ay isang derivative ng Golgi complex.

· Ang mga multivesicular body ay mga derivatives ng lysosomes.

Mga uri ng itlog

· Alecithal – hindi naglalaman ng yolk, napapalibutan ng yolk cells (invertebrates, halimbawa, flatworms).

· Isolecithal (gr. iso - pantay-pantay, pare-pareho), oligolecithal - mayroong maliit na pula ng itlog, pantay-pantay sa cytoplasm.

§ a) pangunahing isolecithal (chordates, halimbawa lancelet).

§ b) pangalawang isolecithal (mga mammal).

· Telolecithal (telos - dulo), polylecithal - maraming yolk, sa isang dulo (vegetative pole), sa kabilang poste ng hayop ay may nucleus at organelles.

§ Moderately telolecithal (amphibians).

§ Malakas na telolecithal (payat na isda, reptilya, ibon).

· Centrolecithal – yolk sa gitna ng cell sa paligid ng nucleus (mga insekto).

Itlog ng babae- pangalawang isolecithal.

Diameter 120-130 microns.

Dalawang karagdagang shell:

§ zona pellucida – zona pellucida (glycoprotein Zp3 – receptor para sa tamud);

§ corona radiata – nagliliwanag na korona.

Panahon ng pag-unlad ng tubo.(mga 5 araw)

Pagkatapos ng obulasyon, ang pangalawang-order na oocyte ay nakuha ng fibria ng fallopian tube. Ano ang nangyayari sa pipe:

Ang pangalawang dibisyon ng meiosis at ang pagbuo ng isang itlog mula sa isang oocyte ng pangalawang order;

Pagpapabunga;

Naghihiwalay.

Ang pinakamahalagang papel ay ginagampanan ng mucous secretion fallopian tubes.

Ang itlog ay may kakayahang magpabunga sa loob ng 1 araw, mabubuhay - 2 araw.

Ang istraktura ng tamud, konsentrasyon, motility, mga pagbabago sa babaeng genital tract.

Inilarawan ni A. Leeuwenhoek noong 1677.

Ang haba sa mga tao ay halos 70 microns.

Dalawang bahagi:

· Ulo;

Ulo.

· Isang nucleus na may haploid set ng mga chromosome, napakasiksik.

· Ang mga protina ng nuklear ay hindi mga histone, ngunit mayaman sa arginine at cysteine ​​​​- dahil sa kanila ay mahigpit silang nakaimpake.

· Sa condensed state, ang genetic material ay protektado mula sa pinsala.

· Acrosome - isang flattened vesicle sa harap ng nucleus, isang derivative ng Golgi complex. Naglalaman ng mga enzyme na kinakailangan para sa tamud na tumagos sa itlog.

Ang buntot ay may 4 na bahagi.

· Ako - leeg

· II – intermediate

III - pangunahing

· IV – bahagi ng terminal.

Ang leeg ay naglalaman ng 2 centrioles.

Ang isang axoneme, na may istraktura ng isang cilium, ay umaabot mula sa proximal centriole

Distal centriole hugis-singsing

Intermediate na bahagi.

Ang Mitochondria ay nakaayos sa isang spiral

Sa paligid ng axoneme

Pangunahing bahagi.

· Axoneme.

· May fibrous membrane sa paligid nito (fine-fibril vagina).

Pangwakas na bahagi.

· Axoneme.

· Direktang sakop ng plasmalemma.

ü Ang normal na konsentrasyon ng tamud ay 20-200 milyon kada ml ng tamud

ü Mas kaunti – oligospermia, pagkabaog ng lalaki.

ü 15% ng mga mag-asawa ang dumaranas ng pagkabaog

ü 50% - kawalan ng katabaan ng lalaki!

Mobility tamud sa average na 83%.

Magkaroon ng mobility sa vas deferens

Testicular network – 0.3 – 0.6%

Ulo ng epididymis - 7%

Buntot – 40%

ü Ang pagtatago ng prostate ay gumaganap ng pinakamahalagang papel - "ang pangalawang puso ng isang tao"

· Bilis ng paggalaw ng tamud – 2-3 mm/min

· Ang distansya sa obaryo ay 30 cm sa loob ng 1.5 – 2 oras.

· Pinapanatili ang motility hanggang 5 araw, na may kakayahang fertilization sa loob ng 2 araw.

Sa acidic na kapaligiran ng puki, ang tamud ay namamatay pagkatapos ng 2.5 oras.

Ang pinakamainam na kapaligiran sa fallopian tubes ay:

· Capacitation (activation) – nadagdagan ang mobility, pagkonsumo ng oxygen, mga pagbabago sa cytolemma.

· Phagocytosis ng may sira na spermatozoa, karaniwang hanggang 10-50%.

Embryogenesis ng tao tumatagal ng 10 lunar (28 araw) o 9 na buwan sa kalendaryo.

Mga panahon ng embryogenesis.

· Paunang – unang linggo; pagpapabunga, pagkapira-piraso.

· Germinal – 2-8 na linggo; gastrulation at pagtula ng axial rudiments ng mga organo - 2-3 linggo;

histo-organogenesis - 4-8 na linggo.

· Pangsanggol – mula sa ika-3 buwan bago ipanganak.

Pagpapabunga.

Ang pagsasanib ng male at female reproductive cells upang mabuo solong selulang organismo- mga zygotes.

3 yugto:

· Proximity at malayong pakikipag-ugnayan.

o Passive na paggalaw ng itlog na may daloy ng likido sa pamamagitan ng oviduct.

o Aktibong paggalaw ng tamud.

§ Negatibong rheotaxis - laban sa daloy ng likido.

§ Chemotaxis - ayon sa gradient ng konsentrasyon ng mga gynogamon na itinago ng itlog.

§ Electrotaxis – electrical interaction sa pagitan ng gametes.

· Pakikipag-ugnayan sa pakikipag-ugnayan ng gametes.

o Gamete binding – maraming sperm ang nakagapos sa granular membrane ng itlog.

o Acrosomal reaction – activation ng acrosome enzymes, pagtanggal ng follicular cells (denuation).

o Pagkakabit sa plasmalemma - ang isang tamud ay dumaig sa mga lamad at nakakabit sa plasmalemma. Protrusion ng cytoplasm - fertilization tubercle.

Pagpasok ng tamud sa itlog

o Ang ulo at leeg (nucleus at centrioles) ng isang tamud ay tumagos sa itlog (monospermia).

o Cortical reaction - ang mga cortical granules ay ibinubuhos sa espasyo sa pagitan ng plasmalemma at ng zona pellucida.

o Ang zona pellucida ay lumalapot at bumubuo ng isang fertilization membrane na hindi nagpapahintulot sa ibang tamud na dumaan.

o Convergence ng nuclei – yugto ng dalawang pronucleoses (12 oras).

o Fusion ng nuclei – pagbuo ng isang synkaryo.

o Magsisimula kaagad ang unang dibisyon (ang "mother star" sa metaphase).

Naghihiwalay.

· Isang serye ng mga mitotic division na walang kasunod na pagpapalaki ng mga daughter cell (blastomeres) sa masa ng mga mother cell. Walang G1 period sa interphase.

· Bilang resulta ng pagkapira-piraso, nabuo ang isang blastula.

· Ang uri ng pagdurog ay depende sa dami at pamamahagi ng pula ng itlog.

Lancelet(pangunahing isolecithal na itlog).

· Ang pagdurog ay kumpleto, pare-pareho, kasabay.

· Nabuo ang Coeloblastula.

Mga amphibian(Ang ovum ay katamtamang telolecithal).

· Kumpleto ang pagdurog, hindi pantay, asynchronous.

· Amphiblastula.

Mga ibon(ang itlog ay matalas na telolecithal).

· Hindi kumpleto ang pagdurog.

· Discoblastula.

Tao(ang itlog ay pangalawang isolecithal).

· Kumpleto na ang pagdurog, asynchronous.

· Mga yugto 2,3,4,5,6,8,9,12,16 hanggang 107 blastomeres.

· Hindi pantay, hindi pantay.

Dalawang uri ng blastomeres.

· Sa gitna - ang malalaking dark blastomeres ay bumubuo ng isang embryoblast (germ).

· Sa labas – ang maliliit na magaan ay bumubuo ng trophoblast (Gr. trophe – pagkain).

ü Sa una, ang embryo ay may hitsura ng isang mulberry - morula

ü Pagkatapos ay lumilitaw ang isang lukab na may likido - isang blastocyst

ü Sa 5th day HATCHING - pagkatapos mapisa, aalis ang blastocyst sa zona pellucida at papasok sa uterus.

Kambal.

ü Ang mga unang blastomeres ay maaaring magbunga ng mga independiyenteng organismo (8 blastomeres) - magkaparehong kambal.

ü Pagpapabunga ng ilang itlog - kambal na magkakapatid.

"Ipatay mo ang kandila, papasok sila sa liwanag"!!!

ü Noong 1755 Si Yakov Kirillov, isang magsasaka mula sa nayon ng Vvedensky, ay iniharap sa korte sa edad na 60. Ang unang asawa ay nagsilang ng 57 anak (4x4 + 7x3 + 10x2), ang pangalawa - 15 anak (1x3 + 6x2). Mayroong 72 mga bata sa kabuuan.

ü 1782 Noong Pebrero 27, isang pahayag ang ipinadala sa Moscow mula sa St. Nicholas Monastery sa distrito ng Shuisky. Si Fyodor Vasiliev, 75 taong gulang, dalawang beses na ikinasal at nagkaroon ng 87 anak.

Pattern.

ü Para sa 87 normal na panganganak – isang kambal.

ü Para sa 87 kambal mayroong isang triplet.

Pagtatanim (Nidation).

Pagpapasok ng embryo sa endometrium

· Magsisimula sa ika-7 araw, tumatagal ng 40 oras

· Yugto 1. Adhesion (sticking) - sa tulong ng trophoblast, ang embryo ay nakakabit sa endometrium.

· Stage 2. Pagsalakay (penetration).

o Naiiba ang trophoblast sa 2 layer.

§ Cytotrophoblast.

§ Symlastotrophoblast.

Ang Symplastotrophoblast ay nagtatago ng mga enzyme na sumisira sa endometrium.

Ang embryo ay lumulubog sa kapal ng endometrium, at ang depekto ay muling nabuo.

Nutrisyon ng embryo.

o Sa simula, ang histeotrophic type - dahil sa nawasak na endometrial tissue;

o Pagkatapos hematotrophic type - dahil sa maternal blood.

Embryological na aspeto ng in vitro fertilization at embryo transfer (IVF at ET).

Mga 15% ng mga mag-asawa ay baog.

Ang kawalan ng katabaan ng lalaki at babae ay 50:50%.

· Ang pamamaraan ay binuo ng isang Englishman: embryologist Robert Edwards at gynecologist Patrick Steptoe.

· Ang unang "test tube" na sanggol ay ipinanganak sa England noong 1978 (sa Russia noong 1986).

· Noong 1907, ang Russian researcher na si Gruzdev V.S. Nagsagawa ng mga eksperimento sa mga kuneho. Kumuha siya ng mga itlog mula sa mga obaryo, pinaghalo ang mga ito sa tamud, at ipinasok ang mga ito sa mga oviduct.

Mga indikasyon para sa IVF.

· Ganap na kawalan ng katabaan ng babae: kumpletong bara o kawalan ng mga fallopian tubes.

Mga yugto ng IVF.

· Pag-alis ng male factor infertility.

· Pagsusuri ng isang babae.

o Hormonal status (FSH, LH, prolactin, testosterone, estrodiol, atbp.).

o Mga impeksiyon na nakukuha sa pakikipagtalik.

o Pagsusuri sa ultratunog.

o Tomography ng utak (pituitary gland).

o Laparoscopy at hysteroscopy (ang pinaka-kaalaman na mga pamamaraan).

· Pagpapasigla ng superovulation.

o Pagpapasigla ng folliculogenesis na may mga paghahanda ng FSH.

o Pangangasiwa sa gitna ng ovulatory cycle ng isang dosis ng human chorionic gonadotropin (CG), isang analogue ng luteotropic hormone (LH).

· Transvaginal puncture at aspiration ng mga oocytes (8-10 oocytes) 36 na oras pagkatapos ng pangangasiwa ng hCG oocytes.

· Paglipat ng mga oocytes sa medium ng kultura. Pagtatasa ng kalidad ng mga oocytes sa ilalim ng mikroskopyo (pamantayan para sa antas ng kapanahunan: ang pagkakaroon ng isang polar body, ang estado ng cumulus, corona radiata, atbp.).

· Pagpili ng mga mature na oocytes.

· Pagproseso ng tamud, gradient centrifugation upang piliin ang bahagi ng pinaka-mayabong (aktibong) tamud.

· Pagpapabunga.

o Pagdaragdag ng tamud sa medium ng kultura, hindi bababa sa 50 libong motile sperm bawat 1 oocyte.

o Pinakamahusay na 4 na oras pagkatapos ng paglitaw ng isang polar body.

· Paglilinang sa daluyan ng 2 araw (karaniwang tinatanggap)

o Cleavage: mula 2-4 hanggang 6-8 blastomeres.

· Pagtatasa ng kalidad ng mga embryo sa ilalim ng mikroskopyo

· Transvaginal na paglipat ng 2-3 embryo sa matris.

o Ang natitirang mga embryo ay pinapanatili sa likidong nitrogen.

Ang posibilidad ng pagbubuntis ay hindi hihigit sa 30% bawat pagtatangka

Intracytoplasmic sperm injection.(paraan ng ICSI)

Indikasyon: kawalan ng katabaan ng lalaki (oligospermia, azoospermia - kumpletong kawalan bulalas, atbp.).

· Ang unang pagbubuntis pagkatapos ng ICSI ay nakuha noong 1992 sa Belgium.

· Dati, donor sperm ang ginamit.

· Kung walang ejaculate, isang pagbutas ay isinasagawa:

o Appendage

· Ang biopsy specimen ay inilalagay sa isang medium ng kultura.

· Pumili ng 1 normal, motile sperm.

Kagamitan.

· Inverted microscope sa anti-vibration table

· Dalawang micromanipulators

Glass micro instruments:

o Ovum suction cup

o Microneedle para sa tamud.

Mga yugto.

· Sperm immobilization - pagkuskos sa buntot gamit ang microneedle sa ilalim ng tasa.

· Pagsipsip ng tamud, ang buntot ay unang pumasok sa pipette.

· Oryentasyon at pagkakadikit ng oocyte sa suction cup - polar body sa 12 o 6 o'clock (sa ilalim ay ang metaphyseal plate).

· Pagbutas ng oocyte sa loob ng 3 oras – pinakamababang pinsala genetic na materyal(metaphyseal plate)

Donasyon ng Oocyte.

Mga pahiwatig: Kawalan ng mga ovary o hindi gumaganang mga ovary.

· Ay fertilized donor na itlog sa isang IVF program, ang embryo ay inililipat sa matris

· Ang mga bata ay genetically foreign sa mga inang nagsilang sa kanila.

· Ang hormone replacement therapy ay isinasagawa bago ang paglipat ng embryo, dahil sa isang babae na walang mga ovary, ang laki ng matris ay bumababa at ang endometrium atrophies.

· Para sa 2-4 na buwan, ang mga paghahanda ng estrogen at progesterone ay inireseta ayon sa mga yugto ng menstrual cycle.

Gastrulation (Latin gaster – tiyan).

Ang mga proseso ng pagpaparami, paggalaw at pagkita ng kaibhan ng mga selula, bilang isang resulta kung saan nabuo ang mga layer ng mikrobyo (ectoderm, mesoderm, endoderm). Ang embryo ay nagiging multilayered.

Mga paraan ng gastrulation:

· Intussusception (lancelet).

· Epiboly (amphibians).

· Imigrasyon (mga ibon, mammal).

· Delamination (mas mataas na vertebrates).

Kaugnay na impormasyon.

Ang imbensyon ay nauugnay sa larangan ng medisina, lalo na sa larangan ng gynecology at reproductology, at may kinalaman sa isang paraan para sa pagpili ng mga pasyente na may empty follicle syndrome (EFS) para sa isang IVF program at ET na may donor oocytes. Ang pamamaraan ay isinasagawa sa pamamagitan ng pagtukoy sa nilalaman ng follicle-stimulating hormone (FSH), insulin-like growth factor (IGF-1) at human chorionic gonadotropin (hCG) sa follicular fluid ng mga pasyenteng may SPF at pagkalkula ng differential DP indicator gamit ang ang formula:

DP=exp(PP)/1+expPP), kung saan

PP=1.821+1×FSH-0.18×IGF-1+0.136×hCG

Exp - exponential function,

at kapag ang DP indicator ay mas mababa sa 0.5, ang pagbuo ng SPF ay ganap at ang pasyente ay inirerekomenda na mag-donate ng mga ophite; kapag ang DP ay higit sa 0.5, ang pagbuo ng SPF ay kalat-kalat at ang pasyente ay inirerekomenda na sumailalim sa paulit-ulit na IVF na paggamot mga cycle. Ang bentahe ng imbensyon ay upang bumuo ng isang paraan para sa paghula ng IVF at PE. 3 mesa

Ang pag-imbento ay nauugnay sa medisina, lalo na sa ginekolohiya at reproductive medicine, at makakahanap ng aplikasyon sa mga programa ng IVF at PE upang mapataas ang rate ng pagbubuntis.

Ang karanasang naipon sa nakalipas na 25 taon sa paggamot ng kawalan ng katabaan gamit ang mga pamamaraan ng IVF at ET ay napatunayan na mataas na kahusayan. Kung noong 70s - unang bahagi ng 80s ay inilarawan lamang ang mga nakahiwalay na kaso ng matagumpay na paggamot ng mga pasyente na may IVF, ngayon ay kinakailangan na kilalanin na salamat sa pagpapakilala nito sa pagsasanay, tunay na pagkakataon epektibong napagtagumpayan ang halos lahat ng kilalang anyo ng kawalan ng katabaan ng babae at lalaki (Ovsyannikova T.V. et al., 1998; Orlov V.I. et al., 2000). Sa medikal na agham, mayroon lamang ilang mga pamamaraan ng paggamot na napakabilis na sumailalim sa mga pagbabago sa ebolusyon na naglalayong pagtagumpayan ang mga pandaigdigang problema na lumitaw sa yugto ng kanilang pagbuo. Sa kabila ng lahat ng hindi maikakaila na katibayan ng tagumpay at pagkakapare-pareho ng in vitro fertilization at paglipat ng mga embryo sa uterine cavity pagkatapos ng matagumpay na kapanganakan ng unang anak, ang mga reproductive specialist ay nakatagpo ng malubhang kahirapan na nililimitahan ang malawakang paggamit ng pamamaraan (Anshina M.B., 1995; Kulakov V.I. et al., 2000; Ailamazyan E.K. et al., 2000).

Halos dalawang dekada na ang lumipas mula noong unang inilarawan ni Coulam et al.(1986). bagong sindrom- walang laman na follicle syndrome (EFS). Ayon sa kahulugan ng may-akda, ang kundisyong ito ay nailalarawan sa pamamagitan ng imposibilidad ng aspirasyon ng mga oocytes mula sa mga preovulatory follicle sa mga in vitro fertilization cycle dahil sa kanilang kawalan. Ang paglitaw ng sindrom na ito ay kalat-kalat, at sa kasalukuyan ay hindi masuri (ni endocrinologically o sonographically) ng anumang partikular na tugon ng ovarian sa pagpapasigla ng superovulation (Penarrulia J, et al., 1999; Zreik T.O. et al., 2000).

Mayroong magkasalungat na opinyon tungkol sa etiological factor, mga mekanismo ng pag-unlad, diagnosis at mga pamamaraan ng paggamot ng sindrom na ito. Sa kabila ng napakalaking interes ng mga reproductive scientist sa "phenomenon" na ito, nananatili itong hindi gaanong naiintindihan hanggang sa kasalukuyan.

Dahil sa medyo mababang saklaw ng SPF, ang mga tanong na nauugnay sa pagpili ng mga karagdagang taktika para sa pamamahala ng pasyente, ang pagiging posible ng mga kasunod na programa ng IVF, at ang pangangailangang gumamit ng mga donor oocyte ay nananatiling halos hindi nareresolba. Ang pag-unlad ng mga oocytes sa lumalaking pool ng mga follicle ay higit na tinutukoy ng komposisyon ng follicular fluid, kung saan ang mga hormone at growth factor ay na-adsorbed mula sa dugo o tinatago ng granulosa cells (Svetlakov A.V. et al., 2002; Burlev V.A. et al. , 1998). Bilang karagdagan, kapag pinag-aaralan ang biochemical na komposisyon ng follicular fluid, ang mga cyclical na pagbabago sa mga parameter ng antral na kapaligiran ay nabanggit depende sa mga yugto ng pag-unlad ng follicle (Boyarsky K.Yu., 2002; Burlev V.A. et al., 1999; Chernukha G.E. et. al., 1996). Ang mga biologically active compound na nakapaloob sa antral cavity ng follicle ay bumubuo sa microenvironment kung saan nabubuo ang oocyte. Ang parehong labis at kakulangan ng mga compound na ito sa follicular fluid ay maaaring magkaroon ng isang malinaw na negatibong epekto sa pag-unlad ng oocyte (Feskov A.M., 1990; Vorobyova O.A. et al., 1998; Potin V.V. et al., 1993). Sa kabila ng kahalagahan ng kasalukuyang nakuha na data, lalo na ang kakayahang mahulaan ang sindrom ng "walang laman" na mga follicle batay sa hormonal na komposisyon ng dugo sa isang tiyak na siklo ng paggamot, walang tiwala sa muling pag-unlad nito sa iba pang mga siklo ng pagpapasigla.

Ang kakulangan ng malinaw na mga taktika para sa pamamahala ng mga pasyente na may SPF ay lumilikha ng mga precedent para sa paulit-ulit na hindi matagumpay na pagpapasigla ng ovarian, na negatibong nakakaapekto sa parehong kalusugan at kalagayang psycho-emosyonal kababaihan at ang kalagayang pinansyal ng pamilya. Bilang karagdagan, ang kakulangan ng napapanahong malinaw na mga tagubilin mula sa mga doktor tungkol sa pagpapayo ng paggamit ng mga donor oocytes ay naantala ang pagpapatupad ng kinakailangang programa para sa isang hindi tiyak na panahon at, bilang isang patakaran, ay nagpasya nang nakapag-iisa ng pasyente pagkatapos ng isang serye ng mga hindi matagumpay na pagtatangka sa IVF.

Sa mga kaso kung saan ang mga paniniwalang relihiyoso, kulto at etniko ay sumasalungat sa paggamit ng mga donor oocyte, ang pasyente ay napapahamak sa "maraming taon ng pagala-gala" sa mga medikal na sentro iba't ibang antas. Ang lahat ng nasa itaas ay naging batayan para sa pag-aaral ng sindrom na ito, paghahanap at pagbuo ng magkakaibang mga taktika para sa pamamahala ng mga pasyente, na tumutukoy sa layunin at layunin ng aming pananaliksik.

Sa magagamit na siyentipikong, medikal at patent na literatura, wala kaming natukoy na mga pamamaraan na nagbibigay-daan para sa isang makatwirang pagpili ng mga kababaihang may SPF syndrome para isama sa mga susunod na cycle ng IVF at ET na mga programa. Ito ang naging batayan para isaalang-alang ang inaangkin na imbensyon na walang prototype.

Ang layunin ng pag-imbento: upang bumuo ng isang layunin at naa-access, para sa malawak na paggamit, na nagbibigay-daan para sa magkakaibang pagpili ng mga pasyente na may "ganap" at "sporadic" na anyo ng "walang laman" na follicle syndrome, na magbibigay-katwiran sa pagpapatupad ng "Oocyte Donation" programa sa grupong ito ng mga pasyente upang makuha ang ninanais na pagbubuntis.

Ang problema ay malulutas sa pamamagitan ng pagsusuri sa follicular fluid ng isang pasyente na may "empty" follicle syndrome, kung saan ang antas ng follicle-stimulating hormone, ang antas ng insulin-like growth factor-I, ang antas ng human chorionic gonadotropin ay tinutukoy at ang Kinakalkula ang differential indicator ng DP gamit ang formula: DP=exp(PP )/(1+exp(PP)), kung saan:

Exp(x) - exponential function,

Ang PP ay isang intermediate variable na kinakalkula ng formula:

PP=1.821+1×FSH-0.18×IGF-I+0.136+hCG, kung saan:

FSH - antas ng follicle-stimulating hormone sa follicular fluid, mIU/ml;

IGF-I - antas ng insulin-like growth factor sa follicular fluid, ng/ml;

hCG - antas ng chorionic gonadotropin ng tao sa follicular fluid, IU/ml,

kung ang nakuha na halaga ng DP ay mas mababa sa 0.5, kung gayon sa partikular na pasyente na ito ang pagbuo ng "walang laman" na follicle syndrome ay isang kinahinatnan ng mga nagambala na proseso ng follicle at oogenesis at ito ay isang "ganap" na kalikasan, samakatuwid ay inirerekomenda siyang mag-abuloy ng mga oocytes, at kung ang halaga ng DP ay higit sa 0.5, ang pag-unlad ng SPF ay random at "sporadic" sa kalikasan at posibleng magsagawa ng paulit-ulit na mga siklo ng paggamot sa IVF upang makakuha ng sariling mga oocytes.

Ang isang intermediate variable ay ipinakilala upang pasimplehin ang pag-record ng pangunahing diagnostic formula.

Upang maisagawa ang pagkakaiba-iba ng diagnosis, ang isang paghahambing na pagsusuri ng nilalaman ng mga lokal na intraovarian regulators ng antral fluid ay isinasagawa gamit ang formula sa itaas na nakuha gamit ang pamamaraang "logit regression", ayon sa pamamahagi ng hindi Gaussian ng paunang data. Ang paggamit ng pagpoproseso ng matematika ay nagpapahintulot sa amin na makilala ang mapagkakatiwalaang makabuluhang mga kadahilanan ng intraovarian regulation na tiyak sa "empty" follicle syndrome (FSH - follicle-stimulating hormone, hCG - human chorionic gonadotropin at IGF-I - insulin-like growth factor). Napatunayan ng aming pananaliksik na mayroong dalawang anyo ng "empty" follicle syndrome: "sporadic" at "absolute".

Kaya, ang data na nakuha namin ay nagpapakita ng isang malinaw na kaugnayan sa pagitan ng nilalaman ng FSH, LH, estradiol, progesterone, testosterone sa dugo, at sa antral fluid - FSH, hCG at IGF-I, sa kinakailangang sapat na dami, at buong folliculogenesis. . Ang mga natukoy na pagkakaiba ay malinaw na nauugnay sa pagbibigay ng pinaka-kanais-nais na mga kondisyon para sa pagbuo ng mga oocytes sa nangingibabaw na follicle dahil sa mahalagang papel ng mga regulator sa itaas sa mga proseso ng folliculogenesis. Ang pagsasama ng mga regulator na ito sa formula ay mayroon ding tiyak na biological na kahulugan. Ayon sa panitikan (Enien W.M. et al., 1998; Roche J.F., 1996), ang follicle-stimulating hormone, immunoreactive human chorionic gonadotropin, pati na rin ang insulin-like growth factor-I ay responsable para sa pagpili ng isang ganap na nangingibabaw. follicle at ang paghahanda ng cumulus-oocyte complex para sa kasunod na obulasyon. Ang konsentrasyon ng mga regulator na ito ay tinutukoy ng immunofluorescence gamit ang mga tiyak na sistema ng pagsubok. Ang isang paghahambing na pagsusuri ng mga resulta ng mga immunofluorescent na pag-aaral kasama ang kanilang karagdagang pagpoproseso sa matematika ay nagpapahiwatig na ang inilarawan sa itaas na pamamaraan ay mas nagbibigay-kaalaman upang pumili ng mga pasyente na may "walang laman" na follicle syndrome: kasama ang mga "absolute" at "sporadic" na anyo nito at, depende sa ang data na nakuha, upang bumuo ng iba pang mga taktika para sa kanilang pamamahala sa mga programang ART.

Ang pagkakaisa ng prognostic at diagnostic na pamantayan na may negatibong resulta ng kahit isang pagbutas ng mga ovary (kawalan ng mga oocytes) ay katibayan ng "ganap" na anyo ng SPF. Kung ang halaga ng indicator ng kaugalian na kinakalkula mula sa mga follicular marker ay mas mababa sa 0.5, walang advisability para sa karagdagang gonadotropic stimulation at ang paggamit ng "donor" oocytes ay ipinahiwatig. Gayunpaman, ang kakulangan ng diagnostic na makabuluhang kumpirmasyon ng "ganap" na anyo ng SPF ay lumilikha ng posibilidad ng patuloy na mga siklo ng paggamot ng mga programa ng ART.

Ang pagtatasa ng istatistika ng nagresultang set ng data ay isinagawa gamit ang pakete ng Pagsusuri ng Data at isang hanay ng mga pag-andar ng matematika at istatistika (Excel 2003), pati na rin ang paggamit ng karaniwang inilapat na mga pakete ng pagsusuri sa istatistika na Statistika 6.0 at MegaStat. Ang pagiging maaasahan ng magkakaibang pagpili ng mga pasyente na may "ganap" na anyo ng SPF ay 66.1%.

Ang pagsusuri ng katumpakan ng differential DP indicator ay ibinibigay sa ibaba:

TUMPAK (IP+IO)/(IP+IO+LP+LO)	LP/(LP+IO) 66.10%
SENSITIVITY IP/(IP+LO)	LO/(IP+LO) 68.57%
ESPESIPISYO NG AI/(IO+LP)	IP(IP+LP) 62.50%
FALSE POSITIVE RATE NG DIAGNOSIS	IO/(LO+IO) 37.50%
FALSE NEGATIVE RATE NG DIAGNOSIS	31,43%
TUMPAK NG POSITIBO NA RESULTA	72,73%
TUMPAK NG NEGATIVE RESULTA	57,69%

kung saan: IP - ang numero ay totoo mga positibong kaso sa sample,

NI - ang bilang ng mga totoong negatibong kaso,

LP - bilang ng mga maling positibong kaso,

LO - bilang ng mga maling negatibong kaso.

Ang pagganap ng iminungkahing pamamaraan ay kinumpirma ng mga sumusunod na klinikal na halimbawa.

Ang pasyenteng R-va, medikal na kasaysayan No. 2341/222, ay ipinasok sa Human Reproduction Center para sa layunin ng pagsasagawa ng IVF at PE program. Ang pasyente ay nagreklamo ng kawalan ng katabaan II sa loob ng 8 taon. Mula sa anamnesis ay nalaman na noong 1987 ang pasyente ay sumailalim sa right-sided tubectomy at subtotal resection ng kaliwang ovary dahil sa tubal pregnancy sa kanan, at noong 1992, resection ng right ovary dahil sa cystic change nito.

Upang makakuha ng isang pangkat ng mga oocytes, siya ay inireseta ng pagpapasigla ng obulasyon. Sa panahon ng pagsusuri sa ultrasound, ang paglago ng dinamika ng nangungunang follicle o cohort ng mga follicle at ang kapal ng endometrium ay natukoy alinsunod sa protocol. Sa oras ng pagbutas, ang pasyenteng ito ay may 2 nangungunang follicle sa kanang obaryo. Ang kapal ng endometrium ay 8.5 mm.

Kapag ang mga follicle ay umabot sa kapanahunan (batay sa ultrasound at hormonal monitoring data), ang pasyente ay inireseta ng isang ovulatory dose ng hCG (Pregnil) sa halagang 5000-10000 na mga yunit. Ang sandali ng pangangasiwa ng HCG ay tinutukoy depende sa oras na ang nangungunang follicle ay umabot sa diameter na hindi bababa sa 18 mm.

Ang aspirasyon ng mga oocytes at follicular fluid ay isinagawa 36 na oras pagkatapos ng pangangasiwa ng isang ovulatory dose ng hCG nang hiwalay mula sa kanan at kaliwang mga ovary. Upang makakuha ng mga oocytes mula sa mga ovarian follicle at follicular fluid, isinagawa ang isang transvaginal puncture gamit ang vaginal probe na may dalas na 5 MHz ng isang Aloka SSD-500 ultrasound device.

Sa panahon ng pagbutas ng mga follicle, walang isang oocyte ang nakuha. Sa antral fluid na hinihigop mula sa mga follicle, ang antas ng FSH, hCG at IPGF-I ay tinutukoy gamit ang immunofluorescent na paraan gamit ang mga sistema ng pagsubok: Delfia (Wallac Oy, Turku, Finland), "hCG-ECO-TEST" (000 "Diatekh -EM", Russia), DSL-10-2 800 (BioHimMak group of companies, Russia), ayon sa pagkakabanggit. Ang mga resultang konsentrasyon ng mga intrafollicular regulator na ito: FSH-5.6 mIU/ml; IGF-I - 105.7 ng/ml; hCG - 38 IU / ml, upang ibukod ang pagkakataon ng natukoy na "walang laman" na follicle syndrome sa nasuri na pasyente, ang pagproseso ng matematika ng data na nakuha ay isinagawa gamit ang formula para sa pagkalkula ng PP at DP:

PP=1.821+1×5.6-0.18×105.7+0.136×38=(-6.30726).

Differential indicator DP=exp(-6.30726)/(1+exp(-6.30726))=0.001819708.

Ayon sa nakuhang differential indicator (0.001819708), na mas mababa sa 0.5, ang pasyenteng ito ay may "absolute" form ng "empty" follicle syndrome at samakatuwid ay inalok siya ng programang "Oocyte Donation" upang makuha ang ninanais na pagbubuntis.

Ang pasyenteng V-va, medikal na kasaysayan No. 1389/158, ay pinasok sa Human Reproduction Center para sa layunin ng pagsasagawa ng IVF at ET program. Ang pasyente ay nagreklamo ng kawalan ng katabaan II sa loob ng 7 taon. Mula sa anamnesis, nalaman na noong 1997 ang pasyente ay sumailalim sa right-sided tubectomy para sa tubal pregnancy sa kanan, at noong 1999 isang left-sided tubectomy para sa tubal pregnancy sa kaliwa.

Sa yugto ng pagsusuri bago ang programa ng IVF, nakita ang ureaplasmosis at gardnerellosis, at isinagawa ang anti-inflammatory treatment (na may epekto). Upang makakuha ng isang pangkat ng mga oocytes, siya ay inireseta ng pagpapasigla ng obulasyon. Ang isang pagsusuri sa ultrasound na isinagawa sa oras ng pagbutas ng follicle ay naging posible upang magrehistro ng 9 na nangungunang follicle. Ang kapal ng endometrium ay 7.1 mm.

Ang pasyente ay sumailalim sa pagbutas ng mga follicle at aspirasyon ng kanilang mga nilalaman, ang pag-aaral kung saan ay hindi nagbubunyag ng isang solong oocyte, sa batayan kung saan ang sindrom ng "walang laman" na mga follicle ay nakumpirma sa klinika sa siklo ng pagpapasigla na ito. Ang mga antas ng biologically active substances sa antral fluid ay tinutukoy: FSH - 2.8 mIU/ml; IGF-I - 90 ng/ml; hCG - 45 IU/ml. Ang nasuri na pasyente ay sumailalim sa mathematical processing ng nakuhang data gamit ang formula para sa pagkalkula ng PP at DP:

PP=1.821+1×2.8-0.18×90+0.136×45=(-5.60152).

Differential indicator DP=exp(-5.60152)/(1+exp(-5.60152))=0.003678681.

Ayon sa nakuhang differential indicator (0.003678681), na mas mababa sa 0.5, ang pasyenteng ito ay may "absolute" form ng "empty" follicle syndrome at samakatuwid ay inalok siya ng programang "Oocyte Donation" upang makuha ang ninanais na pagbubuntis.

Patient S., medikal na kasaysayan No. 769/56, ay pinasok sa Human Reproduction Center para sa layunin ng pagsasagawa ng IVF at PE program. Ang pasyente ay nagreklamo ng kawalan ng katabaan II sa loob ng 5 taon. Mula sa anamnesis, nalaman na noong 2000 ang pasyente ay sumailalim sa left-sided tubectomy para sa left-sided tubal pregnancy, at noong 2001, plastic surgery ng right uterine tube para sa right-sided tubal pregnancy.

Sa yugto ng pagsusuri bago ang programa ng IVF magkakasamang patolohiya hindi mahanap. Upang makakuha ng isang pangkat ng mga oocytes, siya ay inireseta ng pagpapasigla ng obulasyon. Ang pagsusuri sa ultrasound na isinagawa sa oras ng pagbutas ng follicle ay naging posible upang magrehistro ng 5 nangungunang follicle sa kaliwang obaryo at 2 sa kanan. Ang kapal ng endometrium ay 11.2 mm.

Ang pagbutas ng mga follicle at aspirasyon ng kanilang mga nilalaman ay klinikal na nakumpirma ang pagkakaroon ng SPF sa pasyente na ipinakita sa programang ito, dahil ang pag-aaral ng punctate ay hindi nagbubunyag ng isang solong oocyte.

Upang linawin ang mga karagdagang taktika para sa pamamahala sa pasyenteng ito, ang mga antas ng biologically active substances sa nakuha na antral fluid ay tinutukoy: FSH - 3 mIU/ml; IGF-I - 78.2 ng/ml; hCG - 70 IU/ml, ang nasuri na pasyente ay sumailalim sa mathematical processing ng data na nakuha gamit ang formula para sa pagkalkula ng PP at DP:

PP=1.821+1×3-0.18×78.2+0.136×70=(0.20268).

Differential indicator DP=exp(0.20268)/(1+exp(0.20268))=0.550496268.

Ang natukoy na tagapagpahiwatig ng kaugalian na higit sa 0.5 ay nagpapahiwatig ng pagkakaroon ng isang "sporadic" na anyo ng "walang laman" na follicle syndrome sa pasyente na ito, samakatuwid, sa hinaharap, siya ay inirerekomenda na sumailalim sa paulit-ulit na mga siklo ng paggamot sa IVF upang makakuha ng kanyang sariling mga oocytes.

Sa kurso ng pag-aaral na ito, sinuri namin ang 158 mag-asawang nag-aplay sa Center for Human Reproduction sa Rostov Research Institute of Obstetrics and Pediatrics para sa panahon mula 1996 hanggang 2004, upang maisagawa ang mga programang kasama sa listahan ng auxiliary teknolohiya ng reproduktibo(SINING). Ang edad ng mga kababaihan sa 158 mag-asawang kasama sa kasalukuyang pag-aaral ay mula 21 hanggang 46 na taon sa parehong grupo. Average na edad ng mga kababaihan sa pangkat 1 ay 32.12±4.59, sa pangkat 2 - 31.18±3.69. Ang lahat ng mga pasyente na kasama sa pagsusuri ay nahahati sa 2 klinikal na grupo. Ang unang grupo (kontrol) ay binubuo ng 82 kababaihan, na isinagawa gamit ang mga karaniwang pamamaraan sa mga programa ng ART, na may ganap na tugon ng ovarian sa pagpapasigla ng superovulation. Kasama sa pangalawang (pangunahing) grupo ang 76 na pasyente na na-diagnose na may "empty" follicle syndrome sa oras ng follicle puncture at aspirasyon ng kanilang mga nilalaman sa panahon ng mga siklo ng paggamot ng mga programa ng ART, gamit ang mga karaniwang protocol ng pamamahala. Sa 76 na mga pasyente na may "walang laman" na follicle syndrome, 46 na kababaihan ang nabigo sa pag-aspirate ng mga oocytes sa alinman sa mga kasunod na pagtatangka sa gonadotropic stimulation ("ganap" na anyo ng SPF), habang sa 30 mga paksa posible pa ring makakuha ng mga oocytes sa kasunod na mga programa ng ART (“ sporadic” form ng SPF).

Isinasaalang-alang ang katotohanan na ang komposisyon ng follicular fluid, sa isang tiyak na lawak, ay sumasalamin sa hormonal na komposisyon ng dugo (dahil sa mga gonadotropic hormone na pumapasok sa obaryo sa pamamagitan ng daluyan ng dugo at mga steroid na hormone na ginawa sa obaryo), ang mga pagkakaiba na natukoy namin sa komposisyon ng antral na kapaligiran sa mga paksa ay inaasahang kontrol at pangunahing grupo.

Ang mga resulta ng pag-aaral ng mga hormone sa follicular fluid ng mga nasuri na kababaihan ng pangunahing grupo ay nagpapahiwatig ng kawalan ng mga makabuluhang pagkakaiba sa mga antas ng LH, FSH, progesterone, estradiol, testosterone kumpara sa mga katulad na tagapagpahiwatig sa mga pasyente sa pangkat ng paghahambing (Talahanayan 1).

Talahanayan 1. Ang nilalaman ng mga hormone sa follicular fluid ng mga ovary sa mga pasyente ng mga klinikal na grupo
Mga hormone	Control group n=82	Pangunahing pangkat n=76	Probability ng error (p)
Mga antas ng hormone (median at interquartile range)
Luteinizing hormone (LH), mIU/l	1,7	1,6	0,631018
Follicle-stimulating hormone (FSH), mIU/l	2,8	2,9	0,258362
Prolactin, mIU/l	855,0 (673,3-1124,0)	466,5 (400,0-640,0)	0,000036
Chorionic gonadotropin (hCG), mIU/ml	184,0 (128,6-275,3)	58,9 (40,0-90,5)	0,000001
Progesterone, nmol/l	11370,0 (10655,0-11940,0)	11080,0 (10530,0-11890,0)	0,290423
Estradiol, nmol/l	1654,0 (1385,5-1780,0)	1610,0 (1428,5-1714,5)	0,756587
Testosterone, ng/ml	22,9 (22,0-23,6)	23,8 (20,9-25,0)	0,117182

Sa kabila ng kawalan ng mga makabuluhang pagkakaiba, ang mas mataas na konsentrasyon ng LH, progesterone at estradiol, laban sa background ng medyo nabawasan na antas ng FSH at testosterone, ay naitala sa mga pasyente na may ganap na follicular apparatus. Kasabay nito, nagsagawa din kami ng isang paghahambing na pagsusuri ng mga antas ng intrafollicular regulators ng folliculo- at oogenesis (epidermal growth factor, insulin-like growth factor I, inhibin A) sa mga paksang sinuri. Ang mga resulta ng pag-aaral ay nagpapahiwatig ng hindi pagkakapantay-pantay ng kanilang pamamahagi sa "walang laman" at ganap na mga follicle (Talahanayan 2).

Ang mga resulta ng isinagawang pag-aaral ay binibigyang diin ang partikular na kahalagahan ng pagtukoy sa nilalaman ng naturang biochemical substrates ng antral na kapaligiran bilang hCG at IPGF-I.

Ang talahanayan 3 ay nagpapakita ng mga tagapagpahiwatig ng intrafollicular regulators sa mga pasyente na may negatibong resulta ng follicle puncture sa lahat ng kasunod na mga programa ng ART (2nd subgroup) at may matagumpay na mga cycle (sa panahon ng follicle puncture sa paulit-ulit na IVF treatment cycle, ang mga oocytes ay na-aspirated) (2nd subgroup).

Tulad ng makikita mula sa data na ipinakita sa Talahanayan 3, ang konsentrasyon ng luteinizing hormone at estradiol sa follicular fluid na hinihigop mula sa mga pasyente na may positibong resulta ng pagbutas ay makabuluhang mas mataas, at ang testosterone, sa kabaligtaran, ay makabuluhang mas mababa kaysa sa mga napagmasdan sa hindi matagumpay na mga cycle. Ang mga pagkakaibang ito ay tila sumasalamin sa kakanyahan pathological kondisyon, dahil alam na ang paglaki ng mga follicle at ang pagkahinog ng mga oocytes sa kanila ay nakasalalay sa isang kumplikadong kadena ng hormonal at kadahilanan na regulasyon ng reproductive function sa iba't ibang yugto ng kanilang progresibong pagbabago. Ang antral na kapaligiran kung saan nabubuo ang follicle ay sumasailalim sa isang paikot na pagbabago, depende sa yugto ng menstrual cycle at sa yugto ng pag-unlad ng follicle.

VC. Chaika, V.V. Lutsik, I.K. Akimova, M.V. Popova
Donetsk regional center para sa kalusugan ng ina at bata

Doktor ng kababaihan No. 3 2007, p. 13

Panimula

Ang kawalan ng katabaan ay isa sa kasalukuyang mga problema modernong ginekolohiya. Sa kabila ng makabuluhang pag-unlad sa paggamot ng kawalan ng katabaan, walang kalakaran patungo sa pagbaba ng dalas nito.

Ang problema sa pagprotekta sa kalusugan ng reproduktibo ng populasyon ng Ukraine ay naging partikular na ngayon kahalagahang panlipunan. Ang isang mahalagang salik na nagpapababa sa potensyal na reproduktibo ng populasyon ng bansa ay ang kawalan ng katabaan sa kasal sa 25% ng mga mag-asawa. Sa karamihan ng mga kababaihan, ito ay sanhi ng pagbara ng mga fallopian tubes o ang kanilang kawalan. Ang paraan ng in vitro fertilization at paglilipat ng embryo sa uterine cavity (IVF at ET) ay nagiging laganap sa paggamot ng kawalan. Ang bisa ng IVF ay katumbas o mas mataas kaysa sa mga natural na kondisyon at 35%.

Ayon sa utos ng Ministri ng Kalusugan ng Ukraine na may petsang Nobyembre 29, 2004 No. 579 "Sa pag-apruba ng Order para sa referral ng mga kababaihan para sa unang kurso ng paggamot ng kawalan ng katabaan gamit ang mga pamamaraan ng karagdagang mga teknolohiyang reproduktibo para sa ganap na mga indikasyon para sa badyet. gastos,” ang Department of Diagnostics and Treatment of Infertile Marriage (ODLBB) ng Donetsk sentrong pangrehiyon Ang Motherhood and Childhood Protection (MACHP) ay ang batayan para sa isang pagtatangka na gamutin ang kawalan ng katabaan sa mga kababaihan gamit ang mga assisted reproductive technologies (ART) para sa ganap na mga indikasyon para sa mga mapagkukunan ng badyet.

Ang unang kurso ng paggamot sa kawalan ng katabaan gamit ang mga pamamaraan ng ART ay isinasagawa para sa mga babaeng may edad na 19-40 taon. Ang mga ganap na indikasyon para sa paggamot ay: 1) normogonadotropic infertility ng tubal origin: kawalan o kumpletong sagabal ng parehong fallopian tubes; 2) surrogacy sa kondisyon na ang pagbubuntis ay dinadala ng mga kamag-anak ng dugo: ang kapatid na babae o ina ng isang pasyente na may pagkabaog sa pinagmulan ng matris na nauugnay sa kawalan ng matris, abnormal na pag-unlad ng matris, synechiae sa cavity ng may isang ina.

Ang lahat ng mga pasyente na may kawalan ng katabaan ay sinuri sa kanilang lugar ng paninirahan alinsunod sa utos ng Ministry of Health ng Ukraine na may petsang Oktubre 11, 2005 No. 4.40-1004. Kasama sa pagsusuri sa kababaihan ang: 1) Rh blood group; 2) pangkalahatang pagsusuri ng dugo; 3) pangkalahatang pagsusuri ng ihi; 4) coagulogram; 5) biochemistry ng dugo; 6) pagsusuri ng vaginal discharge; 7) pagsusuri ng cytological mula sa cervix; 8) pagsusuri para sa mga impeksyon sa TORCH; 9) RW; 10) HIV; 11) antibodies sa hepatitis B virus; 12) antigen sa hepatitis C virus; 13) hormonal examination: LH, FSH, estradiol sa mga araw na 2-3 ng menstrual cycle, testosterone, prolactin, cortisol; 14) genetic na pagsubok; 15) pagsusuri ng mga espesyalista (endocrinologist, psychiatrist, therapist, espesyalista sa nakakahawang sakit). Pagsusuri ng mga lalaki: 1) pagsusuri sa genetiko; 2) spermogram; 3) RW; 4) HIV.

Sa kabila ng malaking listahan ng mga eksaminasyon at maingat na pagpili na itinakda ng Order No. 579, ang mga pasyente ay madalas na dumarating para sa paggamot na hindi handa at kulang sa pagsusuri. Sa partikular, sa mga cervical polyp at endometrial polyp, ovarian cyst, hydro- at sactosalpinxes, nadagdagan ang mga antas ng testosterone at cortisol. Ang mga pasyenteng ito ay nangangailangan ng paghahanda sa paggamot, kabilang ang therapy sa hormone, minsan surgical treatment.

Noong 2006, nagsagawa kami ng 345 cycle ng superovulation stimulation na sinundan ng follicle puncture at embryo transfer. Ang komposisyon ng edad ng mga kababaihan ay ang mga sumusunod: 19-25 taong gulang - 78 (22.6%); 26-30 taong gulang - 114 (33.0%); 31-35 taong gulang - 124 (36.0%); 36-40 taong gulang - 29 (8.4%). Ang average na edad ng mga pasyente ay 31.3 taon, ang tagal ng kawalan ay isang average ng 7.6 taon.

Ang paggamot ay natanggap ng mga kababaihan mula sa iba't ibang rehiyon ng Ukraine na ipinakita sa Talahanayan 1.

Talahanayan 1. Bilang ng mga pasyente ng pagkabaog na ginagamot sa mga pamamaraan ng ART sa ilalim ng programa ng estado para sa 2006 ayon sa rehiyon ng Ukraine

Hindi.	Rehiyon	Bilang ng mga pasyente
		n	%
1.	Autonomous Republic of Crimea	28	8,1
2.	Dnepropetrovsk	20	5,7
3.	Donetsk	160	46,3
4.	Zaporozhye	41	11,8
5.	Lugansk	18	5,2
6.	Nikolaevskaya	13	3,8
7.	Odessa	7	2,0
8.	Poltavskaya	17	4,8
9.	Sumskaya	7	2,0
10.	Kharkovskaya	12	3,5
11.	Kherson	13	3,8
12.	Cherkasy	4	1,6
13.	Sevastopol	5	1,4
Kabuuan		345	100

Ang lahat ng mga pasyente ay sumailalim sa pagpapasigla ng superovulation sa paggamit ng mga gonadotropin-releasing hormone (GnRH) agonists ayon sa isang mahabang protocol. Para sa desensitization (mga araw 18-22 ng menstrual cycle), ang gamot na diferelin 3.75 mg ay ginamit. Ang pagpapasigla ng superovulation ay isinasagawa gamit ang gamot na Puregon 50 IU, aktibong sangkap na folitropin-beta (recombinant follicle-stimulating hormone, FSH). Ang bilang ng mga ampoules na inirerekomenda ng Ministry of Health ng Ukraine sa bawat stimulation cycle ay 40.

Ngayon, ang pangunahing at tanging indikasyon para sa pagsasama ng mga pasyente sa IVF program na may PE para sa mga pondo ng badyet ay ang kawalan o sagabal ng mga fallopian tubes. Kung pinag-uusapan lamang natin ang tungkol sa kawalan ng tubal, kung gayon ang isang hanay ng mga gamot ay maaaring makatwiran. Gayunpaman, ang endocrine factor ng infertility, sa mas malaki o mas maliit na lawak, ay naroroon sa halos bawat pasyente.

Bilang karagdagan, ang isang mahabang stimulation protocol ay hindi angkop para sa isang bilang ng mga pasyente na higit sa 30 taong gulang, na may mga ovary na pinatatakbo, "mahinang tumugon". Mas gusto nilang gumamit ng maikling protocol, na nangangailangan ng short-acting hormone-releasing agonists, na hindi available.

Nagsagawa kami ng ultrasound at hormonal monitoring ng maturing follicles. Kapag ang nangingibabaw na mga follicle ay umabot sa sukat na 18-20 mm, isang ovulatory dose ng human chorionic gonadotropin (CG) ang ibinibigay. Sa kasong ito, ang gamot na Pregnil 10 TE ay pinangangasiwaan ng intramuscularly. Ang mga follicle ay sinipsip gamit ang transvaginal puncture. Ang paglilinang ng mga oocytes ay isinasagawa ayon sa mga karaniwang pamamaraan sa daluyan ng Menezo B2.

Ang mga pangunahing tagapagpahiwatig ng pagpapasigla ng superovulation sa mga kababaihan na may ganap na mga indikasyon ay ipinakita sa Talahanayan 2.

Talahanayan 2. Mga pangunahing tagapagpahiwatig ng pagpapasigla ng superovulation

Hindi.	Mga tagapagpahiwatig (karaniwan)
1.	Bilang ng mga siklo ng pagpapasigla ng superovulation	98
2.	Edad ng babae, taon	30,5
3.	Tagal ng ikot, araw	29,1
4.	Bilang ng mga ampoules ng Puregon 50 IU	46
5.	Bilang ng mga araw ng pagpapasigla	10,2
6.	Bilang ng mga aspirated follicle	8,7
7.	Mga sukat nangingibabaw na mga follicle, mm	19,2
8.	Ang kapal ng endometrium sa araw ng pangangasiwa ng hCG, mm	10,9

Ang paglipat ng embryo ay isinasagawa 2-3 araw pagkatapos ng pagbutas. Hindi hihigit sa 3 normal na embryo ang inilipat sa uterine cavity ng pasyente. Ang suporta sa luteal phase ay isinasagawa ayon sa isang karaniwang regimen gamit ang progesterone, utrogestan o duphaston.

Sa kaso ng hindi sapat na pagpapasigla ng superovulation at dahil sa iba't ibang sensitivity aparatong receptor ovaries sa mga ibinibigay na gamot, at samakatuwid iba't ibang mga reaksyon ng ovaries, pinatataas ang panganib ng pagbuo ng isang malubhang komplikasyon - ovarian hyperstimulation syndrome (OHSS).

Sa panitikan mayroong iba't ibang data sa dalas ng OHSS, na dahil sa paggamit ng iba't ibang mga scheme para sa pagpapasigla ng superovulation at iba't ibang pamamaraan diagnosis at pag-iwas sa komplikasyon na ito. Sa karaniwan, ayon sa panitikan, ang dalas ng OHSS ay mula 8 hanggang 23%. Ang katamtamang OHSS ay 1-7%, ang malubhang OHSS ay 1-1.8% bawat stimulated cycle.

51 (14.8%) ng mga babaeng ginagamot namin ay nagkaroon ng OHSS. Sa mga ito: 30 (8.7%) ay may banayad na OHSS at 21 (6.1%) ay may katamtamang OHSS.

Sa mga babaeng may banayad na OHSS, ang mga antas ng estradiol ay may average na 2050 pg/mL. Ang isang pagsusuri sa ultrasound ay nagpakita ng mga ovary na pinalaki sa 6.0 cm ang lapad.

Sa katamtamang OHSS, ang antas ng estradiol ay may average na 4250 pg/m; ang mga ovary ay pinalaki sa 6-10 cm ang lapad; pagpapalaki at pag-igting ng tiyan, malinaw na mga palatandaan ng ascites sa pagsusuri sa ultrasound.
Ang paggamot sa banayad na OHSS ay isinagawa sa isang outpatient na batayan gamit ang maliit na dami ng mga hypotonic fluid, tulad ng tubig, juice at iba pang magagaan na inumin, pati na rin ang pagsasalin ng 6% Refortan 500.0 ml 1-2 beses.

Ang paggamot sa katamtamang OHSS ay isinagawa sa isang inpatient na batayan sa gynecological department No. 1 at ang intensive care unit ng Children's Hospital. Upang mapunan muli ang bcc at ibalik ang fluid pabalik sa vascular bed, ang mga pasyente ay tinuturukan ng mga crystalloid solution (saline solution, Ringer's solution); koloidal na solusyon (albumin, hydroxyethyl starch); antihistamines; anticoagulants. Isang pasyente ang sumailalim sa plasmapheresis session. Ang mga pasyente na may katamtamang OHSS ay sumailalim sa pagbutas lukab ng tiyan, paglalagay ng catheter para alisin ang likido. Pagkatapos ng paggamot, napansin namin ang makabuluhang klinikal na pagpapabuti, pagpapabuti ng sirkulasyon ng dugo at perfusion sa bato.

Ang pangunahing biochemical diagnosis ng pagbubuntis ay isinasagawa sa ika-14 na araw pagkatapos ng paglipat ng embryo sa pamamagitan ng pagtukoy ng konsentrasyon ng hCG sa serum ng dugo. Ang kasunod na diagnosis ng pagbubuntis (klinikal) ay isinagawa gamit ang ultrasound sa ika-21 araw pagkatapos ng paglilipat ng embryo. Ang pagsusuri sa ultratunog ng tibok ng puso ng pangsanggol ay karaniwang isinasagawa sa 4-5 na linggo ng pagbubuntis.

Talahanayan 3. Ang pagiging epektibo ng IVF at PE na paggamot

	2005r.		2006r.
Nagsimula ang mga siklo ng paggamot sa IVF at ET	0		399
Nakumpleto ang IVF at PE treatment cycle	0		345
Inalis mula sa IVF at PE treatment program	0		0
Bilang ng mga pagbubuntis	0	0%	126	36,5%
Bilang ng mga batang ipinanganak	0	0%	20	15,9%
Ang pagiging epektibo ng IVF at PE na paggamot	0%		36,5%

Kaya, ang pagiging epektibo ng paggamot sa 345 mga pasyente na may tubal at tubo-peritoneal na mga anyo ng kawalan ng katabaan gamit ang IVF at ET ay 36.5% (126 kababaihan). Noong 2006, 20 (15.9%) na mga bata ang naipanganak na.

mga konklusyon
Alinsunod sa Order No. 579 ng Ministry of Health ng Ukraine, 345 cycle ng IVF at ET ang isinagawa sa Children's Hospital. Ang pamamahagi ng edad ng mga pasyente ay ang mga sumusunod: 19-25 taon - 78 (22.6%); 26-30 taong gulang - 114 (33.0%); 31-35 taong gulang - 124 (36.0%); 36-40 taong gulang - 29 (8.4%). Ang average na edad ng mga pasyente ay 31.3 taon, ang tagal ng kawalan ay isang average ng 7.6 taon. Ayon sa rehiyon, ang ganitong uri ng paggamot ay natanggap ng: Autonomous Republic of Crimea - 28 katao (8.1%); rehiyon ng Dnipropetrovsk - 20 (5.7%); Rehiyon ng Donetsk - 160 (46.3%); rehiyon ng Zaporozhye - 41 (11.8%); Lugansk rehiyon - 18 (5.2%); rehiyon ng Nikolaev - 13 (3.8%); Rehiyon ng Odessa - 7 (2.0%); Rehiyon ng Poltava - 17 (4.8%); Rehiyon ng Sumy - 7 (2.0%); Rehiyon ng Kharkov - 12 (3.5%); Rehiyon ng Kherson - 13 (3.8%); rehiyon ng Cherkasy - 4 (1.6%); Sevastopol - 5 (1.4%). 51 (14.8%) ng mga babaeng ginagamot namin ay nagkaroon ng OHSS. Sa mga ito: 30 (8.7%) ay may banayad na OHSS at 21 (6.1%) ay may katamtamang OHSS. Ang pagiging epektibo ng paggamot sa kawalan ng katabaan gamit ang IVF at ET ay 36.5% (126 kababaihan). Noong 2006, 20 (15.9%) na mga bata ang naipanganak na.

Panitikan
1. Gordeeva V.L., Nazarenko T.A., Burlev V.A., Sotnikova E.A. Ovarian hyperstimulation syndrome // Mga problema sa reproductology. - 1998. - Hindi. 3. - P. 3-5.
2. Ivanyuta L.I. Mga problema ng kawalan ng katabaan, sanhi, pagsusuri, paggamot, at mga solusyon // Koleksyon ng mga siyentipikong gawa ng Association of Obstetricians and Gynecologists of Ukraine. - K.: "Phoenix", 2001. - P. 292-295.
3. Ivanyuta L.I. Reproductive health at infertility // Misteryo ng Likuvannya. - 2004. - No. 4. - pp. 26-30.
4. Kalinina E.A. Ovarian hyperstimulation syndrome sa panahon ng in vitro fertilization at paglilipat ng embryo // Mga problema sa reproductology. - 1997. - Hindi. 1. - P. 51-74.
5. Kvashenko V.P., Demina T.N., Adamova G.M. Ang problema sa pangangalaga sa kalusugan ng reproduktibo ng isang babae ay ang pangunahing layunin ng mga serbisyo sa pagpaplano ng pamilya // Ang pagiging ina ang pinakadakilang nagawa. Sab. mga artikulo - Donetsk: Almateo LLC, 2003. - pp. 92-104.
6. Kulakov V., Leonov B., Lukin V., Kalinina E.A. Worid Congress on Fertility and Sterility, 14th: Abstracts. - Caracas, 1992. - P. 331.
7. Leonov B.V., Kulakov V.I. Estado ng problema ng in vitro fertilization at paglilipat ng embryo // Mga problema sa reproductology. - 1998. - Bilang 4. - P. 4-5.
8. Leonov B.V., Kulakov V.I., Finogenova E.Ya. Ang paggamit ng recombinant FSH sa paggamot ng kawalan ng katabaan sa IVF at ET program // Mga problema sa reproductology. - 2001. - Bilang 4. - P. 35-40.
9. Lunenfeld B. Worid Congress on Human Reproduction, ika-8. - Helsinki, 1990. - Abstr. 496.
10. Organisasyon ng isang sistema para sa pagbibigay ng espesyal na tulong sa mga mag-asawang baog sa Ukraine / V.K. Chaika, I.K. Akimova, M.V. Popova, atbp. // Mga modernong direksyon pangangalaga ng outpatient sa obstetrics at ginekolohiya. - Donetsk: Lebed LLC, 2003. -
pp. 108-119.
11. Schenker J.G. Ovarian hyperstimulation syndrome // Mga problema sa reproductology. - 1997. - Hindi. 1. - P. 51-74.
In Vitro Fertilization (IVF) - pagpapabunga ng itlog sa vitro, paglilinang at paglipat ng embryo sa matris ( PE). Tinukoy bilang pangunahing programa ng ART sa pamamagitan ng order No. 107n ng Ministry of Health ng Russian Federation. Ito ay isang paraan ng pagtagumpayan ng kawalan, na batay sa pagpapabunga ng isang itlog at pagtiyak ng pagbuo ng isang embryo sa labas ng katawan ng babae sa loob ng ilang araw - sa isang "test tube". Ang IVF ay posible salamat sa physiological phenomenon ng pagpaparami ng tao, na binubuo sa katotohanan na ang pagpapabunga ng itlog ay nangyayari sa distal (ampullary) na bahagi ng fallopian tube at ang durog na embryo ay dinadala sa uterine cavity sa loob ng 5 araw. Sa madaling salita, sa panahong ito ang embryo ay walang koneksyon sa katawan ng ina. Ang mga kondisyon para sa pagkakaroon ng isang embryo ay maaaring kopyahin sa isang "test tube" sa vitro.

Una ECO ay ginawa noong 1944 J.Rock, M.Melkin kultura ng tao oocyte at ginawa ECO humahantong sa pagbuo ng isang dalawang-cell na embryo. Noong 1978, ipinanganak ang unang anak pagkatapos ECO At PE. ECO ginamit sa pagsasanay sa mundo ng infertility therapy mula noong 1978. Sa Russia ang pamamaraang ito matagumpay na ipinatupad sa Scientific Center para sa Obstetrics, Gynecology at Perinatology ng Russian Academy of Medical Sciences, kung saan noong 1986, salamat sa gawain ni Propesor B.V. Ipinanganak ang unang test-tube na anak ni Leonov.

Sa ngayon, ang paraang ito ay naging laganap na kung kaya't matagal na nilang itinigil ang pagbilang ng bilang ng mga bata na ipinanganak pagkatapos. ECO. Ang mabilis na pag-unlad ng pamamaraan ay dahil sa mga tagumpay ng pharmacology, echoscopy, at biochemistry. Ang mga gamot ay na-synthesize upang pasiglahin ang superovulation sa obaryo - ang pagbuo ng ilang mga follicle na naglalaman ng isang itlog nang sabay-sabay. Ang mga high-resolution na echoscopic device na nilagyan ng mga vaginal sensor at instrumento para sa pagkolekta ng mga itlog sa pamamagitan ng vaginal vault sa ilalim ng patnubay ng ultrasound ay ipinakilala sa pagsasanay. Ang lahat ng ito ay pinadali ang pagpapatupad ng pamamaraan at humantong sa pagkalat nito. Sa maraming bansa sa Europa at Amerika ECO ay itinuturing na mga nakagawiang pamamaraan ng paggamot sa kawalan ng katabaan. Mainit na pagtalakay sa moral, etikal at legal na aspeto ECO isang bagay ng nakaraan. Ang pagpapabunga gamit ang donor sperm at pagtatanim ng isang "banyagang" embryo ay katanggap-tanggap at ginagawa; pinalawak ang mga limitasyon sa edad. ECO. Nai-publish na mga kaso ng mga batang ipinanganak pagkatapos ECO sa mga kababaihan na higit sa 50 taong gulang. Hindi malamang na ang huli ay dapat tratuhin nang positibo para sa naiintindihan na mga medikal na dahilan: halimbawa, paano haharapin ng isang babae sa edad na menopausal ang pagbubuntis at paano ito makakaapekto sa mga supling? Gayunpaman, ang mga halimbawang ibinigay ay nagpapahiwatig na ang mga detalye ng pamamaraan ay malinaw na nagawa.

Ang dalas ng infertile marriages sa Russia ay lumampas sa 15%, na, ayon sa WHO, ay itinuturing na isang kritikal na antas. Mayroong higit sa 5 milyong mga infertile couple na nakarehistro sa bansa, higit sa kalahati sa kanila ay kailangang gumamit ng mga pamamaraan tinulungang mga teknolohiya sa reproduktibo(SINING). Ayon sa mga pagtatantya ng eksperto, ang rate ng kawalan ng babae lamang ay tumaas ng 14% sa nakalipas na 5 taon.

Ang batayan para sa pagbuo ng isang bilang ng mga diskarte, na kasalukuyang nagkakaisa sa ilalim ng pangkalahatang terminong "assisted reproductive technologies" (ART), ay ang klasikal na pamamaraan. ECO at paglilipat ng embryo ( PE) sa cavity ng matris. Sa kasong ito, ang mga oocytes (mga selulang mikrobyo ng babae), pagkatapos ng paglilinang sa isang espesyal na nutrient medium, ay pinataba ng tamud, na pre-centrifuged at naproseso sa isang nutrient medium.

Mga uri ng ART:

●pagdala ng embryo ng isang boluntaryong babae ("kapalit" na pagiging ina) para sa kasunod na paglipat ng bata (mga bata) sa genetic na mga magulang;

●donasyon ng mga oocytes at embryo;

●ICSI (ang abbreviation na “ICSI” ay nagmula sa English abbreviation na “ICSI”, ibig sabihin, “IntraCytoplasmic Sperm Injection”, kapag isinalin sa Russian ito ay nangangahulugang “pagpapasok ng sperm sa cytoplasm” (iyon ay, sa itlog);

● cryopreservation ng mga oocytes at embryo;

●preimplantation diagnosis ng mga namamana na sakit;

●pagbabawas ng mga embryo sa maraming pagbubuntis;

●talagang IVF at PE.

Kaugnay ng mga pasyente ng IVF program kinakailangan na pag-usapan natin ang kawalan ng katabaan ng mag-asawa sa kabuuan . Sa panimula nitong binabago ang diskarte sa pagpili at paghahanda ng pasyente para sa programa - ginagawa nitong mandatory ang paunang pagtatasa ng kondisyon reproductive system parehong babae at lalaki.

Humigit-kumulang 40% ng mga kaso ng kawalan ng katabaan sa mga mag-asawa ay dahil sa pagkabaog ng lalaki. Ang pamamaraan ng ICSI ay nagbibigay-daan sa mga lalaking may malubhang anyo ng kawalan ng katabaan (oligo, astheno, malubhang teratozoospermia) na magkaroon ng mga supling, kung minsan lamang kung mayroong isang semilya sa punctate na nakuha mula sa testicular biopsy.

ECOgamit ang donor oocytes ginagamit upang mapagtagumpayan ang kawalan ng katabaan sa mga kaso kung saan imposible para sa isang babae na makakuha ng kanyang sariling mga oocytes o makatanggap ng mababang kalidad na mga oocyte na hindi kaya ng pagpapabunga at pagbuo ng isang ganap na pagbubuntis.

Programa ng surrogacy- ang tanging paraan ng genetically pagkuha ng isang bata para sa mga kababaihan na may isang absent uterus o may malubhang extragenital pathology, kapag ang pagbubuntis ay imposible o kontraindikado.

Ang diagnosis ng preimplantation ay batay din sa pamamaraan ECO. Ang kanyang layunin ay makakuha ng embryo sa maagang yugto pag-unlad ng preimplantation, sinusuri ito para sa genetic na patolohiya at PE sa cavity ng matris.

Pagpapababa ng operasyon ginagawa kapag mayroong higit sa tatlong embryo. Ito ay isang sapilitang pamamaraan, ngunit kinakailangan para sa matagumpay na kurso ng maraming pagbubuntis. Ang makatwiran at siyentipikong paggamit ng pagbabawas, pati na rin ang pagpapabuti ng pamamaraan ng pagpapatupad nito sa maraming pagbubuntis, ay ginagawang posible upang ma-optimize ang klinikal na kurso ng naturang pagbubuntis, mahulaan ang kapanganakan ng malusog na supling at bawasan ang dalas ng pagkalugi ng perinatal.

Layunin ang mga assisted reproductive technologies ay upang makakuha ng malusog na supling mula sa mga mag-asawang baog.

Mga indikasyon para sa IVF

●absolute tubal infertility sa kawalan ng fallopian tubes o sagabal nito;

● kawalan ng katabaan hindi kilalang pinanggalingan;

●infertility na hindi magagamot, o infertility na mas malamang na magtagumpay sa IVF kaysa sa ibang paraan;

●immunological forms of infertility (presensya ng antisperm antibodies ayon sa MAP test ≥50%);

●iba't ibang anyo ng kawalan ng katabaan ng lalaki (oligo, astheno o teratozoospermia), na nangangailangan ng paggamit ng ICSI method;

●polycystic ovary syndrome;

●endometriosis.

Contraindications

●congenital malformations o nakuhang deformation ng uterine cavity, kung saan imposible ang pagtatanim ng mga embryo o pagbubuntis;

●mga benign tumor ng matris na nangangailangan ng surgical treatment;

● malignant neoplasms ng anumang lokasyon (kabilang ang kasaysayan);

●ovarian tumor;

●mga talamak na nagpapaalab na sakit ng anumang lokalisasyon;

●somatic at mental na mga sakit na kontraindikado para sa pagbubuntis at panganganak.

Paghahanda

Saklaw ng pagsusuri ng mag-asawa dati ECO kinokontrol ng Order ng Ministry of Health ng Russian Federation na may petsang Pebrero 26, 2003 No. 67 "Sa paggamit ng ART sa paggamot ng kawalan ng katabaan ng babae at lalaki."

Para sa isang babae ang mga sumusunod ay kinakailangan:

●konklusyon ng doktor tungkol sa estado ng kalusugan at ang posibilidad ng pagbubuntis;

●pagsusuri ng microflora mula sa urethra at cervical canal at ang antas ng kalinisan ng vaginal;

●klinikal na pagsusuri sa dugo, kabilang ang pagtukoy sa oras ng pamumuo ng dugo (may bisa sa 1 buwan);

●pangkalahatan at espesyal na pagsusuri sa ginekologiko;

●pagtukoy ng pangkat ng dugo at Rh factor;

●Ultrasound ng pelvic organs.

Ayon sa mga indikasyon, ang mga sumusunod ay karagdagang isinasagawa:

●bacteriological na pagsusuri ng materyal mula sa urethra at cervical canal;

●endometrial biopsy;

●nakakahawang pagsusuri (chlamydia, ureaplasma, mycoplasma, HSV, CMV, toxoplasma, rubella virus);

●pagsusuri ng kondisyon ng matris at fallopian tubes (hysterosalpingography o hysterosalpingoscopy at laparoscopy);

●pagsusuri para sa pagkakaroon ng antisperm at antiphospholipid antibodies;

● pagpapasiya ng mga konsentrasyon sa plasma ng dugo ng FSH, LH, estradiol, prolactin, testosterone, cortisol, progesterone, thyroid hormone, TSH, STH;

●cytological examination ng cervical smears.

Kung kinakailangan, ang mga konsultasyon sa ibang mga espesyalista ay inireseta.

Para sa isang lalaki ang mga sumusunod ay kinakailangan:

●pagsusuri ng dugo para sa syphilis, HIV, hepatitis B at C (may bisa sa loob ng 3 buwan);

●spermogram.

Ayon sa mga indikasyon:

●nakakahawang pagsusuri (chlamydia, ureaplasma, mycoplasma, HSV, CMV);

●FISH diagnostics ng sperm (fluorescence in situ hybridization method);

●pagtukoy ng pangkat ng dugo at Rh factor.

Ang isang konsultasyon sa isang andrologo ay naka-iskedyul din.

Para sa isang mag-asawang higit sa 35 taong gulang, kinakailangan ang medikal na genetic counseling.

Pamamaraan

Ang pamamaraan ng IVF ay binubuo ng mga sumusunod na yugto:

●pagpili, pagsusuri at, kung may nakitang abnormalidad, paunang paghahanda ng mga pasyente;

●stimulation of superovulation (controlled ovarian stimulation), para makakuha ng ilang mature na itlog at, bilang resulta, ang pagbuo ng ilang embryo, na nagpapataas ng posibilidad ng pagbubuntis.

●pagbutas ng ovarian follicles para makakuha ng preovultory oocytes. Ang pagbutas ay isinasagawa sa isang outpatient na batayan, sa ilalim ng anesthesia, sa pamamagitan ng posterior vaginal fornix.

●insemination ng mga oocytes at cultivation ng mga embryo na nabuo bilang resulta ng fertilization in vitro. Pagpapabunga ng mga itlog na may espesyal na inihanda na tamud ng asawa (kasosyo) sa isang laboratoryo. Ang follicular fluid na nakuha bilang resulta ng pagbutas ay ibinubuhos sa isang espesyal na tasa at sinusuri sa ilalim ng mikroskopyo upang matiyak ang pagkakaroon ng isang itlog. Ang mga itlog ay inililipat sa isang ulam na naglalaman ng isang espesyal na daluyan ng kultura. Ang tasa ay inilalagay sa isang incubator kung saan ang isang pare-pareho ang temperatura at isang tiyak na komposisyon ng pinaghalong gas ay pinananatili. Ang mga itlog ay naiwan sa incubator sa loob ng ilang oras upang umangkop sila sa mga bagong kondisyon. Pagkatapos kung saan ang tamud ay idinagdag sa kanila - ang pamamaraang ito ay tinatawag na insemination. Parehong sariwa (katutubo) at cryopreserved sperm ay pinoproseso bago gamitin upang ihiwalay ang normal at motile sperm. Ang kontrol sa pagpapabunga ay karaniwang isinasagawa pagkatapos ng 12-18 oras.

●Ang paglipat ng mga embryo sa uterine cavity ay maaaring isagawa 48-120 oras pagkatapos matanggap ang mga itlog. Para sa paglipat ng embryo, ginagamit ang mga espesyal na catheter, na ipinasok sa lukab ng matris sa pamamagitan ng cervical canal. Sa karamihan ng mga kaso, 2 embryo ang inililipat sa pasyente.

●suporta para sa panahon pagkatapos ng paglilipat ng embryo Pagkatapos ng paglilipat ng embryo, isinasagawa ang hormonal na suporta, kadalasang may paghahanda ng progesterone. Depende sa mga indibidwal na indikasyon, ang mga paghahanda ng estrogen at human chorionic gonadotropin ay maaaring gamitin.

●Ang diagnosis ng pagbubuntis sa mga unang yugto sa pamamagitan ng nilalaman ng hCG sa dugo o ihi ay isinasagawa 12-14 araw mula sa sandali ng paglilipat ng embryo. Mga diagnostic sa ultratunog ang pagbubuntis ay maaaring isagawa mula 21 araw pagkatapos ng paglilipat ng embryo. Ang diagnosis ng "klinikal na pagbubuntis" ay itinatag kapag ang isang fertilized na itlog ay nakita sa cavity ng matris.

EFFICIENCY

Ayon sa European Association of Reproductive Medicine, higit sa 290,000 ART cycle ang kasalukuyang ginagawa sa Europe kada taon, kung saan 25.5% ang nagreresulta sa panganganak; sa USA - higit sa 110,000 cycle bawat taon na may average na rate ng pagbubuntis na 32.5%.

Sa mga klinika ng Russian ART, 10,000 cycle ang ginagawa bawat taon, na may rate ng pagbubuntis na humigit-kumulang 26%.

MGA KOMPLIKASYON

●mga reaksiyong alerhiya sa mga gamot upang pasiglahin ang obulasyon;

●nagpapasiklab na proseso;

●pagdurugo;

●maraming pagbubuntis;

●ovarian hyperstimulation syndrome, na kadalasang nangyayari pagkatapos ng PE, ay isang kondisyon na nailalarawan sa pamamagitan ng pagtaas ng laki ng mga ovary at pagbuo ng mga cyst sa mga ito. Ang kundisyong ito ay sinamahan ng pagtaas ng vascular permeability, hypovolemia, hemoconcentration, hypercoagulation, ascites, hydrothorax at hydropericardium, electrolyte imbalance, nadagdagan na konsentrasyon ng estradiol at tumor marker CA-125 sa plasma ng dugo;

●ectopic ectopic pregnancy. Dalas ng paglitaw ectopic na pagbubuntis kapag gumagamit ng ART, umaabot ito ng 3% hanggang 5%.

kaya, ECO At PE ay medyo kumplikado at nangangailangan ng mamahaling kagamitan, reagents, gamot at, higit sa lahat, espesyal na kaalaman. Ito ay humantong sa katotohanan na ang IVF at PE ay isang hiwalay na lugar ng gynecological practice at ginagawa lamang ng mga espesyalista.

Ang pag-unlad ng pamamaraan ng IVF ay nagdala ng problema sa pagpapagamot ng kawalan ng katabaan mula sa isang patay na dulo at naging posible na makamit ang pagbubuntis sa isang malaking bilang ng mga kababaihan na dati ay napapahamak sa kawalan ng anak.

Ang imbensyon ay nauugnay sa gamot, lalo na sa ginekolohiya. Ang kakanyahan ng pamamaraan para sa paghula ng mga kinalabasan ng programa ng IVF at ET: ang nilalaman ng TNF- at -FGF ay tinutukoy sa follicular fluid. Ang prognostic index (PI) ay kinakalkula gamit ang formula: PI=0.0027·X+Y·(+8.9626·10 -7 ·Y-3.0827·10 -6 ·X)-0.1448, kung saan ang X ay ang numerong TNF-, Y - halaga ng -FGF. Ang isang resulta na mas mababa sa 0.3038 ay nagpapahiwatig ng isang paborableng pagbabala para sa in-vitro fertilization. Kung ang halaga ay katumbas o mas malaki sa 0.3038, hindi ito hinuhulaan kanais-nais na kinalabasan in-vitro fertilization. Ginagawang posible ng pamamaraan na mapataas ang katumpakan at nilalaman ng impormasyon ng prognosis ng IVF at PE program.

(56) (ipinagpapatuloy):

CLASS="b560m"FASOULIOTIS SJ et al. Ang mga antas ng serum ng ina ng interferon-gamma at interleukin-2 na natutunaw na receptor-alpha ay hinuhulaan ang kinalabasan ng maagang pagbubuntis ng IVF. Hum Reprod. 2004, 19(6), p. 1357-63, ref.

DRIANCOURT MA et al. Kontrolin ang paglaki at pagkahinog ng oocyte ng mga follicular cell at molekula na nasa follicular fluid. Isang pagsusuri. Reprod Nutr Dev. 1998, 38(4), p. 345-62, ref.

MCNATTY KP et al. Kontrolin ang maagang pag-unlad ng ovarian follicular. J Reprod Fertil Suppl. 1999, 54, p. 3-16, ref.

Ang imbensyon ay nauugnay sa medisina, lalo na sa ginekolohiya, at gagamitin para sa paghula ng in-vitro fertilization upang mapataas ang kahusayan ng paraan ng in vitro fertilization at embryo transfer (IVF).

Ang problema ng paggamot sa kawalan ng katabaan ay kasalukuyang nagiging hindi lamang medikal, sosyo-demograpiko, kundi pati na rin kahalagahan ng ekonomiya(Kulakov V.I., Leonov B.V., 2004). Ang dalas ng kawalan ng katabaan sa Russia ay 10-15%, at sa ilang mga rehiyon ito ay lumampas sa 15% na antas na tinukoy ng pangkat ng problema ng WHO bilang kritikal, na nakakaapekto sa mga tagapagpahiwatig ng demograpiko (Kulakov V.I., 1999). Ngayon, ang paraan ng paggamot sa kawalan ng katabaan sa pamamagitan ng in vitro fertilization at paglipat ng mga durog na embryo sa uterine cavity ng pasyente ay lalong laganap sa ating bansa at sa buong mundo. Kung noong 1987-1990 ang pagiging epektibo ng pamamaraan ay 10-15% sa bawat paglilipat ng embryo, sa kasalukuyan ang bilang na ito ay tumaas sa 25-35% ng mga kaso. Kasabay nito, sa mga klinika na gumagamit ng IVF at ET na pamamaraan, ang paghahanap para sa mga bagong diskarte upang madagdagan ang pagiging epektibo ng pamamaraan ay nagpapatuloy.

Ang programa ng IVF at PE ay masalimuot dahil sa katotohanan na ito ay multi-stage, ngunit hindi lahat ng mga yugto ay maaaring masubaybayan. Sa isang tiyak na lawak, ang ilan sa mga hindi matagumpay na kinalabasan ng IVF ay likas sa mismong likas na katangian ng proseso ng reproduktibo ng tao, na umaabot sa halos 20% para sa isang mag-asawa sa edad na 20 (Nikitin A.I., 1995). Sa bagay na ito, lumitaw ang ideya ng pagpapasigla ng superovulation upang makuha higit pa itlog sa pamamagitan ng paggamit ng mga gonadotropin. Gayunpaman, ang pagtaas sa bilang ng mga itlog ay nangangailangan ng isa pang negatibong kadahilanan - ang ilan sa mga ito ay maaaring maging may depekto, na may kapansanan sa oogenesis o chromosomal pathology, habang ang iba ay maaaring tumahak sa landas ng reverse development sa proseso ng folliculogenesis. Upang mapabuti ang kalidad ng mga oocytes at maiwasan ang kanilang napaaga na pagkahinog dahil sa paglabas ng endogenous luteinizing hormone, ang gonadotropin-releasing hormone agonists ay kasama sa superovulation stimulation scheme (Fleming R. et al., 1990).

napaka mahalagang salik para sa kinalabasan ng IVF ay ang estado ng mga male reproductive cells. Kasabay nito, ang makabuluhang pag-unlad na nauugnay sa pagpapakilala sa pagsasagawa ng paraan ng intracytoplasmic sperm injection ay nagpapahintulot sa mga lalaki na may malubhang anyo ng mga sakit, na dati nang napapahamak sa ganap na kawalan, na magkaroon ng mga supling (Leonov et al., 1999).

Kahandaan ng endometrium - ang pinakamahalagang kondisyon matagumpay na pagtatanim ng isang embryo na inilipat sa matris (Tabibzadeh S. et al., 1995). Kung ang isang paglabag sa cyclic transformation ng endometrium ay pinaghihinalaang, ang isang bilang ng mga may-akda ay nagrerekomenda ng paunang therapy na may mga gamot na naglalaman ng progesterone at estradiol (Ffrindler S. et al., 1992).

Ang isang napakahalagang kadahilanan na nakakaimpluwensya sa tagumpay ng pagtatanim ng embryo ay ang proseso ng paglipat nito sa matris (Tomar et al., 2002). Ngunit sa kasalukuyan mayroong iba't ibang uri ng mga catheter na tinitiyak na ang pamamaraang ito ay isinasagawa nang atraumatically (Mansour R.T. et al., 2002). Bilang karagdagan, ang hysteroscopy bago ang programa ng IVF ay nagbibigay-daan sa iyo upang masuri ang kondisyon ng mga dingding ng cervical canal, endometrium at, sa mga kaso ng patolohiya, magsagawa ng naaangkop na mga interbensyon sa kirurhiko.

Ang isang makabuluhang kadahilanan na nakakaimpluwensya sa tagumpay ng pagtatanim ng embryo ay ang edad ng babae. Gayunpaman, isinasaalang-alang ang paggamit ng mga donor oocytes, ang dalas ng matagumpay na mga resulta ng mga programang IVF at ET ay hindi naiiba sa pagitan ng mga pasyente na may maaga at huli. edad ng reproductive(Craft J., 1990).

Ang partikular na atensyon ay dapat bayaran sa mga nakakahawang sakit na nakakaapekto sa reproductive system, na maaaring humantong sa kapansanan sa in-vitro fertilization at pagbubuntis, at maiwasan ang pagsilang ng malusog na supling (Steyaert S.R., et al., 2000). Samakatuwid, ang isang mahalagang punto sa pagpapatupad ng IVF at ET program ay ang napapanahong pagkilala at paggamot ng mga impeksyon sa mag-asawa na malapit na nauugnay sa reproductive system, kasama sa tinatawag na TORCH complex (toxaplasmosis, rubella, cytomegalovirus at mga impeksyong herpetic, chlamydia, syphilis, hepatitis A at B , impeksyon sa gonococcal, listeriosis) (Kuzmichev L.N., 1998).

Pagtukoy sa kadahilanan positibong resulta Ang mga programa ng IVF at ET ay ang estado ng embryo, na tumutukoy sa tagumpay ng pagtatanim (Lenz J.V. et al., 1996). Kasabay nito, upang makakuha ng magandang kalidad na mga embryo, kinakailangan na ang pag-unlad ng preovulatory oocyte ay hindi magambala sa ilalim ng mga kondisyon ng in-vitro fertilization.

Pananaliksik mga nakaraang taon suportahan ang hypothesis na ang iba't ibang immunoactive cytokine ay kasangkot sa mga proseso ng pagtatanim at pag-unlad ng inunan. Ang tugon ng selulang T helper (Th) ng ina na kinakailangan para sa normal na pagbubuntis ay kapansin-pansing nagbabago mula sa Thi- tungo sa Th2-type na tugon. Sa kabaligtaran, ang pagtitiyaga ng isang Th1-type na tugon ay katangian ng mga karamdaman sa pagbubuntis maagang mga petsa(Hill J.A. et al., 1995). Ang opinyon na ito ay sinusuportahan ng marami klinikal na pag-aaral(Marzi M. et al., 1996; Raghupathy R. et al., 2000; Makhseed M. et al., 2001), na nakakumbinsi na nagpapakita na ang pagtaas sa produksyon ng Th1 cytokines sa pamamagitan ng peripheral lymphocytes ay sinusunod sa mga kababaihan na may hindi kanais-nais. mga resulta ng isang IVF program at PE, sa kaibahan sa pangingibabaw ng tugon ng Th2, katangian ng isang normal na pagbubuntis.

Kasabay nito, nakuha ang data na nagpapahiwatig na ang mga cytokine, lalo na ang mga kadahilanan ng paglago na nilalaman sa follicular fluid, ay mahalagang mga modulator ng mga proseso ng intraovarian na kumokontrol sa pag-unlad ng oocyte (Kane M.T. Morgan P.M. Coonan C. Peptide growth factor at preimplantation development // Hum. Reprod. Upd. - 1997-Vol.3 - 137-157).

Ang isang pinababang nilalaman ng insulin-like growth factor (IGF) sa follicular fluid ay nakita sa isang pangkat ng mga infertile na pasyente na may endometriosis, ovarian dysfunction at hindi magandang resulta ng IVF at ET program (Cunha-Filho J.S.L., Lemos N.A., Freitas F.M., Kiefer K, Faller M., Passos E.P. // Insulin-like growth factor (IGF)-l at IGF binding protein-1 at -3 sa follicular fluid ng mga infertile na pasyente na may endometriosis Hum. Reprod.- 2003-18-423-428 ).

Iniuugnay ng ilang mananaliksik ang mga pinababang konsentrasyon ng vascular endothelial growth factor (VEGF) sa follicular fluid sa paggawa ng mas mataas na kalidad na mga oocytes at embryo at tumaas na mga rate ng pagbubuntis (Friedman C.I., Seifer D.B., Kennard E.A., et al.. Nakataas na antas ng follicular fluid vascular endothelial ang growth factor ay isang marker ng pinaliit na potensyal ng pagbubuntis // Fertil. Steril. - 1998-70-836-839; Barroso G., Barrionuevo M., Rao P. et al Vascular endothelial growth factor, nitric oxide, at mga antas ng leptin follicular fluid negatibong nauugnay sa kalidad ng embryo sa mga pasyente ng IVF // Fertil. Steril.-1999-V.72-P.1024-1026).

Alam na ang mas mataas na konsentrasyon ng transforming growth factor (TGF-b1) sa follicular fluid ay makabuluhang nauugnay sa matagumpay na pag-unlad ng preembryonic, pagtaas ng antas ng pagtatanim ng embryo at pagbubuntis (van Rooij I.A.J., M.Broekmans F.J., te Velde E.R. Serum anti-Mullerian mga antas ng hormone : isang nobelang sukatan ng ovarian reserve //Hum. Reprod. - 2002-17-3065-3071).

Hammadeh M. E. et al. (2002) ay hindi nakahanap ng mga makabuluhang pagbabago sa konsentrasyon ng colony-stimulating growth factor sa follicular fluid sa isang paghahambing na pag-aaral ng mga pasyente na may iba't ibang mga kadahilanan ng kawalan (tubal, endometriosis, kawalan ng hindi kilalang pinagmulan at male factor) (Hammaden M.E., Ertan A.K. , Zeppezauer M. et al. Immunoglobulins at Cytokines Level sa Follicular Fluid na May kaugnayan sa Etiology of Infertility at sa kanila.//AJRI 2002-47-82-90).

Gayunpaman karaniwang pagkukulang ng mga gawain sa itaas ay: pagpapasiya ng mga kadahilanan ng paglago sa follicular fluid sa mga grupo ng mga pasyente na may iba't ibang etiological na mga kadahilanan kawalan ng katabaan ng babae at lalaki, sa madaling salita, walang pamantayan para sa pagsasama at pagbubukod sa mga grupo ng pag-aaral batay sa mga prinsipyo ng etiolohiko. Ang mga gawa ay kulang din ng impormasyon tungkol sa mga indikasyon para sa IVF at ET program. Gayundin, ang isang makabuluhang disbentaha ng mga gawa sa itaas ay dapat kilalanin bilang ang kakulangan ng impormasyon sa nilalaman ng mga kadahilanan ng paglago sa follicular fluid sa mga kaso ng paghinto ng pagpapabunga ng mga oocytes o embryo.

Kaya, hanggang ngayon, ang ilang impormasyon ay naipon na nagpapahiwatig ng posibleng hula ng mga resulta ng isang IVF at ET na programa batay sa pagtukoy sa nilalaman ng mga kadahilanan ng paglago sa follicular fluid.

Kasabay nito, alam na sa grupo ng mga pasyente na may tubal infertility sa panahon ng IVF program, ang kawalan ng in-vitro fertilization ng mga itlog ay sinusunod sa 9% ng mga kaso, at ang pag-aresto sa pagbuo ng embryo sa 8.4% ng mga kaso ( Witkin, S.S et al., 1996). Dapat itong lalo na bigyang-diin na sa Russia, para sa karamihan ng mga pasyente, ang pangunahing indikasyon para sa IVF at ET na programa ay tubal infertility.

Sa pagsasaalang-alang na ito, ito ay kinakailangan upang higit pang bumuo ng mga pamamaraan na ginagawang posible upang mahulaan ang in-vitro fertilization, lalo na para sa kategoryang ito ng mga pasyente, na kung saan ay partikular na nauugnay sa mga kaso ng paggamit ng mga mamahaling pamamaraan ng paggamot sa kawalan ng katabaan, na kinabibilangan ng IVF at ET.

Ang prototype ng imbensyon ay isang paraan para sa pagtatasa ng pagbuo ng oocyte sa pamamagitan ng pagsusuri ng mga marker sa follicular fluid na nakuha sa panahon ng pagbutas ng mga follicle at aspirasyon ng kanilang mga nilalaman sa panahon ng IVF at ET na programa upang matukoy ang mga kinalabasan ng programa. Ang kakanyahan ng pag-aaral na ito ay ang mas mataas na antas ng insulin-like growth factor (IGF) at mababang interleukin-1 ay tinutukoy sa follicular fluid, na nagpapahiwatig ng isang kanais-nais na pagbabala para sa pagbubuntis. (Mendoza S., Ruiz-Requena E., Ortega E., Cremades N., Martinez F., Bemabeu R., Greco, E., Tesarik, J.Follicular fluid marker ng oocyte developmental potential.// Hum. Reprod. - 2002-17-1017-1022).

Ang mga disadvantages ng prototype ay: una, ang kakulangan ng malinaw na pamantayan sa kung anong mga halaga ng pinag-aralan na mga marker ang dapat isipin ng isang tao tungkol sa isang hindi kanais-nais na kinalabasan ng programa ng IVF, na binabawasan ang katumpakan at nilalaman ng impormasyon. ang pamamaraang ito; Pangalawa, itong pag aaral na isinasagawa sa isang pangkat ng mga pasyente na walang patolohiya ng reproductive system, ang indikasyon para sa programa ng IVF ay lalaki factor kawalan ng katabaan, na may kaugnayan sa kung saan ang in-vitro fertilization ay isinagawa gamit ang intracytoplasmic sperm injection, habang ang mga pangunahing indikasyon para sa isang in vitro fertilization program ay tubal infertility; pangatlo, walang impormasyon tungkol sa mga pasyente kung saan hindi isinagawa ang paglilipat ng embryo dahil sa kapansanan sa in-vitro fertilization.

Ang mga kawalan na ito ay inalis sa iminungkahing imbensyon. Ang layunin ng imbensyon ay pataasin ang katumpakan ng pamamaraan at nilalaman ng impormasyon nito.

Ang problema ay nalutas sa pamamagitan ng katotohanan na pagkatapos ng pagbutas ng mga follicle, aspirasyon ng kanilang mga nilalaman at paghihiwalay ng mga oocytes, ang average na konsentrasyon ng TNF- at -FGF ay natutukoy. Ang prognostic index (PI) ay nakuha sa pamamagitan ng pagkalkula ng formula: PI=0.0027·Х+Y·(+8.9626·10 -7 ·Y-3.0827·10 -6 ·Х)0.1448, kung saan ang X ay TNF -, Y- - FRF. Ang halaga ng PI na katumbas ng o mas mataas sa 0.3038 ay nagpapahiwatig na ang in-vitro fertilization ay mapipinsala. Pagiging maaasahan ng resultang formula - P-value: 2.299e-8

Ang teknikal na resulta na nakuha bilang resulta ng paghula sa mga kinalabasan ng IVF at ET na programa gamit ang pamamaraang ito ay na:

1) ang katumpakan at nilalaman ng impormasyon ng pagtataya ng mga kinalabasan ng IVF at ET na programa sa mga unang yugto ng pagpapatupad nito ay makabuluhang nadagdagan;

2) posible na pag-aralan ang materyal na nakuha sa panahon ng pagbutas (follicular fluid at ang mga cell na nakapaloob dito) para sa layunin ng napapanahong pagsusuri ng pasyente;

3) ang pagiging epektibo ng mga sumusunod na programa ng IVF ay nadagdagan sa pamamagitan ng pagsasagawa ng etiotropic therapy para sa pasyente, na isinasaalang-alang ang mga resulta ng pagsusuri;

4) isang napapanahong desisyon ay maaaring gawin tungkol sa intracytoplasmic sperm injection upang mapabuti ang resulta ng in-vitro fertilization;

5) ang sikolohikal na pasanin sa pasyente na naghihintay ng impormasyon tungkol sa mga resulta ng in-vitro fertilization at ang araw ng paglilipat ng embryo ay nabawasan dahil sa maagang babala ng isang posibleng hindi kanais-nais na resulta ng pagpapabunga.

6) ang bigat ng gamot sa pasyente ay nababawasan sa pamamagitan ng pagbubukod sa kanya sa IVF at PE program.

Ang criterion para sa tagumpay ng isa sa pinakamahalagang yugto ng IVF program ay ang pagkuha ng magandang kalidad ng mga embryo. Kasabay nito, ang pagbuo ng embryo in-vitro ay direktang nauugnay sa estado ng oocyte at ang mga proseso ng introvarial na nagsisiguro sa pag-unlad nito, na nangyayari, tulad ng nabanggit sa itaas, na may direktang pakikilahok ng mga kadahilanan ng paglago, ang pagpapasiya ng nilalaman na kung saan sa follicular fluid ay maaaring makatulong na mahulaan ang mga kinalabasan ng IVF at ET program sa mga unang yugto ng pagpapatupad nito.

Upang makabuo ng isang paraan para sa paghula ng mga resulta ng isang IVF at PE program, nagsagawa kami ng pag-aaral ng nilalaman ng mga salik ng paglago sa follicular fluid - TNF- at -FGF sa 637 follicle sa 75 mga pasyente na may tubal factor infertility na nag-apply sa ang Rostov Research Institute of Obstetrics and Pediatrics. Sa 36 na pasyente (pangkat 1), ang in-vitro fertilization ay nagambala sa yugto ng pag-unlad ng oocyte sa 61.2% (22) ng mga kaso, at sa yugto ng pag-unlad ng embryo sa 38.8% (14). Ang paglilipat ng embryo ay hindi isinagawa sa pangkat na ito. Kasama sa pangalawang grupo ng pag-aaral ang 39 na mga pasyente kung saan ang in-vitro fertilization ay nagpapatuloy nang normal at natapos sa paglilipat ng embryo. Ang prognostic formula (PI) ay nakuha batay sa isang comparative analysis ng average na konsentrasyon ng TNF- at -FGF sa mga grupo ng mga pasyente na may in-vitro fertilization at walang in-vitro fertilization. Pagsusuri sa matematika ay isinagawa sa tulong software PolyAnalist 3.5 (Megaputer Intelligence).

Ang isang pagsusuri ng siyentipiko, medikal at patent na literatura ay naging posible upang maitaguyod na kakaunti lamang ang mga pag-aaral na nakatuon sa pag-aaral ng mga karamdaman ng in-vitro fertilization, na kumukulo sa pagtukoy ng masamang epekto ng likido na nasa loob ng hydrosalpinx sa ang pagbuo at pagtatanim ng embryo sa eksperimento (Arrighi C.V. et aL, 2001, Carrasco I .et al., 2001, Ajonuma L.C. et al., 2003). Sa iba pang mga pag-aaral, ang kapansanan sa pagpapabunga sa panahon ng kultura ng oocyte ay nauugnay sa cellular o genetic disorder, na tinatawag na "oocyte factor", at, gaya ng binibigyang-diin mismo ng mga may-akda, ang mga konklusyong ito ay nangangailangan ng karagdagang paglilinaw (Levran D. et al., 2002).

Kasabay nito, ang karamihan sa mga pasyente na naghihirap mula sa tubal infertility ay may talamak na proseso ng pamamaga, na nagiging sanhi ng malagkit na sakit ng pelvic organs. Ang mga adhesion ng pelvic organ ay maaaring resulta ng reconstructive plastic surgery o tubectomy. Ang pangangasiwa ng gonadotropins sa panahon ng kinokontrol na pagpapasigla ng superovulation ay maaaring isa sa mga salik na nag-aambag sa paglala ng talamak. nagpapasiklab na proseso may isang ina appendages, na humahantong sa ang hitsura ng cellular at plasma mediators ng nagpapasiklab na proseso - cytokines, na kinabibilangan ng paglago kadahilanan TNF- at -FGF.

Ang TNF- at -FGF na nakapaloob sa follicular fluid ay maaaring itago ng mga granulosa cells at leukocytes: B-lymphocytes, monocytes, natural killer cells, ang bilang nito ay nadagdagan ng nagpapaalab na sakit pelvic organs. Sa teoryang, maaari rin silang pumasok sa mga follicle mula sa peritoneal fluid dahil sa pagsasabog sa pamamagitan ng ovarian capsule sa mga kaso ng pelvic inflammatory disease, ngunit ang mga datos na ito ay kasalukuyang kulang sa panitikan. Kasabay nito, ang pag-aaral ni Cheong Y.C. et al. (2002) ay nagpapahiwatig mataas na konsentrasyon TNF- sa peritoneal fluid sa panahon ng malagkit na sakit ng pelvic organs, na maaari ring magkaroon ng negatibong epekto sa mga proseso ng oogenesis. Ang mga kadahilanan ng paglaki ay maaaring magkaroon ng epekto sa mga selula ng follicle sa iba't ibang paraan: autocrine, paracrine, intracrine at endocrine (Mandrup-Poulsen T. et al., 1995; Vinatier D. et al., 1995). Ang TNF- ay maaaring maging sanhi ng pagbawas sa paggana ng ovarian laban sa background ng isang nagpapasiklab na proseso dahil sa pagsugpo sa gonadotropin-stimulated steroidogenesis sa mga di-nagkakaibang mga ovarian cells dahil sa pagbawas sa pagtatago ng adenylyl cyclase at c-ATP (Terranova P.F., Rice V.M., 1997 ). Bilang karagdagan, ang pagtaas ng mga konsentrasyon ng TNF-α sa follicular fluid ay humantong sa apoptosis (Matsubara H. et al, 2000).

Sa kasalukuyan, ang data ay nakuha na nagpapahiwatig ng pagsugpo sa produksyon ng estrogen ng TNF- (Pottratz S.T. et al., 1994). Bukod dito, itinatag na ang TNF- ay pumipigil sa paggawa ng progesterone dilaw na katawan at nagiging sanhi ng follicular atresia (Buscher U. et al., 1999, Nash M. A. et al., 1999; Yeh J. at Adashi E.Y., 1999; Doraiswamy V. et al, 2000). Ang pagtaas ng konsentrasyon ng TNF- sa follicular fluid ay maaaring negatibong makaapekto sa obulasyon at in-vitro fertilization (Cianci A. et al., 1996) at magkaroon ng embryotoxic effect (Sung L. et al., 1997). Sa kabilang banda, alam na ang obaryo ay isang organ na may napakataas na antas ng angiogenesis (Redmer, D.A. at Reynolds, L.P., 1996) at ang paglaki ng vascular na bahagi ng thecal tissue ng mga follicle ay kinokontrol ng - FGF (Schams D. et al., 1996). Mayroon ding hypothesis na ang mababang antas ng estrogen sa serum ng dugo, hindi sapat para sa paglaganap ng cell, ay nakasalalay sa iba't ibang salik paglago, kabilang ang mula sa -FRF (Hermenegildo S., Sapo A., 2000). Mayroon ding impormasyon tungkol sa kahalagahan ng -FGF para sa preimplantation development ng embryo (Chai N. et al., 1998).

Ang mga isinagawang pag-aaral ay naging posible na magtatag ng isang relasyon sa pagitan ng mga konsentrasyon ng TNF- at -FGF sa follicular fluid at in-vitro fertilization. Ang pagtukoy sa nilalaman ng mga salik ng paglago na ito ay ginagawang posible upang mahulaan ang resulta ng in-vitro fertilization sa mga unang yugto ng isang IVF at ET program.

Detalyadong paglalarawan ng pamamaraan at mga halimbawa ng partikular na aplikasyon nito.

Upang ipatupad ang pamamaraan, ang mga sumusunod na kagamitan ay ginagamit: isang karaniwang hanay ng mga kagamitan at kagamitan para sa IVF at PE laboratories, isang photometer (Victor, 1420 Multilabel counter, Wallac, Finland). Ang antas ng konsentrasyon ng mga cytokine sa follicular fluid ay tinutukoy gamit ang mga komersyal na sistema ng pagsubok na TNF- (CytElisa) at FGF (ACCUCYTE) (CYTIMMUNE, Science INC., USA).

Ang pagpapasigla ng superovulation ay isinasagawa ayon sa isang "maikling protocol" gamit ang isang GnRH analogue (Diferelin, Bofur Ipsen) sa pang-araw-araw na dosis na 0.1 mg, na inireseta sa unang araw ng panregla pagkatapos ng pagsusuri sa ultrasound. Sa susunod na araw, ang pagpapasigla ng folliculogenesis ay nagsisimula sa pagpapakilala ng mga paghahanda ng recombinant na follicle-stimulating hormone (Puregon, Organon) sa pang-araw-araw na dosis na 150-250 IU. Ang pagpapasigla ay isinasagawa hanggang sa araw na ang mga nangungunang follicle ay umabot sa diameter na 18 mm, na tinutukoy ng transvaginal echography, pagkatapos kung saan ang isang iniksyon ng isang "ovulatory dose" ng human chorionic gonadotropin (Pregnil, Organon) ay inireseta.

35-36 na oras pagkatapos ng pag-iniksyon ng human chorionic gonadotropin, ang transvaginal puncture ng mga follicle at aspiration ng preovulatory oocytes ay ginaganap. Ang transvaginal puncture ay ginagawa sa isang gynecological chair gamit ang ultrasound machine na “ALOKA SAL500” (Japan). Ang perineum at puki ay nadidisimpekta. Ang pasyente ay natatakpan ng mga sheet, na iniiwan ang perineum na bukas. Gamit ang isang vaginal sensor na may isang espesyal na attachment para sa isang puncture needle na naka-install dito, ang isang pagsusuri sa ultrasound ng mga pelvic organ ay isinasagawa upang piliin ang pinakamainam na posisyon para sa puncture trajectory. Matapos matukoy ang tamang direksyon ng puncture trajectory, ang mga nilalaman ng mga follicle ay nabutas gamit ang isang karayom ​​sa pamamagitan ng lumen ng nozzle ng vaginal ultrasound sensor. Ang aspirasyon ng mga nilalaman ng mga follicle ay isinasagawa gamit ang isang vacuum suction, sa ilalim ng presyon ng 80 mm Hg, na tinitiyak na ang aspirate ay pumapasok sa mga sterile tubes. Ang nagreresultang follicular fluid ay inilipat sa embryologist para sa pagkakakilanlan at paghihiwalay ng mga oocytes mula dito. Ang paghahanda ng tamud ay isinasagawa gamit ang pamamaraan ng paglangoy sa Mtdium B1 medium (CCD, France). Ang mga aspirated oocytes ay inseminated at nilinang sa B2 INRA MEDIUM medium (CCD, France). Ang mga sample ng follicular fluid ay ini-centrifuge sa 400 g sa loob ng 10 minuto at ang purong fraction ay ginagamit upang matukoy ang TNF- at -FGF. Ang paraan para sa pagtukoy ng TNF- at -FGF ay inilarawan sa mga tagubilin ng tagagawa ng komersyal na kit.

Ang mga nakuhang halaga ng TNF- at -FGF ay inihahalili sa formula ng pagkalkula PI=0.0027·X+Y·(+8.9626·10 -7 ·Y-3.0827·10 -6 ·X)-0.1448, kung saan X - TNF -, Y - -FGF, at kung ang halaga ng PI ay katumbas o higit sa 0.3038, kung gayon ang isang hindi kanais-nais na resulta ng IVF at PE ay hinuhulaan, na isang indikasyon para sa pagbubukod ng isang babae mula sa programa at pagre-refer sa kanya para sa karagdagang pagsusuri.

Nagbibigay kami ng mga klinikal na halimbawa na nagpapatunay sa pagiging epektibo ng pamamaraan.

Pasyente P-va L.V., 35 taong gulang, medikal na kasaysayan No. 582/60, petsa ng follicle puncture 06.14.01.

Diagnosis: Talamak bilateral salpingitis. Kondisyon pagkatapos ng salpingo-ovariolysis, salpingostomy. Fitz-Hugh-Curtis syndrome. Pangalawang kawalan ng katabaan.

Ang average na konsentrasyon ay TNF-=20.5 pg/ml, -FGF=167.5 ng/ml.

Matapos palitan ang nakuha na data sa formula, nakuha ang halaga ng PI = -0.0501, na nagpahiwatig ng isang kanais-nais na kinalabasan ng IVF. Bilang resulta ng in-vitro oocyte cultivation, nakuha ang mga embryo at isinagawa ang kanilang paglipat.

Pasyente Ch-va N.V. 28 taong gulang, medikal na kasaysayan No. 4094/441, petsa ng follicle puncture 06/19/02.

Ang average na konsentrasyon ay TNF-=315.1 pg/ml, -FGF=1210.0 ng/ml.

Matapos palitan ang nakuha na data sa formula, nakuha ang halaga ng PI = 1.1933, na nagpahiwatig ng isang hindi kanais-nais na kinalabasan ng IVF. Bilang resulta ng paglilinang ng oocyte, hindi naganap ang in-vitro fertilization at walang nakuhang mga embryo.

Pasyente Sh-k I.V., 33 taong gulang, medikal na kasaysayan No. 2529/286, petsa ng follicle puncture 04/13/02.

Diagnosis: Kondisyon pagkatapos ng 2-sided tubectomy. Malagkit na sakit ng pelvic organs. Pangalawang kawalan ng katabaan.

Ang average na konsentrasyon ay TNF-=87.0 pg/ml, -FGF=482.3 ng/ml.

Matapos palitan ang nakuhang data sa formula, nakuha ang halaga ng PI = 0.3038, na nagpahiwatig ng hindi kanais-nais na kinalabasan ng IVF at PE. Bilang resulta ng paglilinang ng oocyte, hindi naganap ang in-vitro fertilization at walang nakuhang mga embryo.

Batay sa mga materyales ng iminungkahing pamamaraan para sa paghula ng programa ng IVF at PE, sinuri namin ang 152 mga pasyente na nag-apply para sa in vitro fertilization dahil sa tubal infertility sa Rostov Research Institute of Obstetrics and Pediatrics. Ang edad ng mga nasuri na pasyente ay mula 24 hanggang 36 taon, na may average na 29.4±2.2 taon. Sa mga ito, 59% ang na-diagnose na may primary infertility, at 41% ay na-diagnose na may secondary infertility. Ang tagal ng kawalan ng katabaan ay nag-iiba mula 6 hanggang 14 na taon, na may average na 7.4±2.1 taon. Sa 11 mga pasyente, ang mga halaga ng PI ay higit sa 0.3038; hindi nangyari ang in-vitro fertilization sa mga kasong ito, na nagsilbing batayan para sa karagdagang pagsusuri. Sa natitirang mga pasyente, ang mga halaga ng PI ay mas mababa sa 0.3038; naganap ang in-vitro fertilization sa mga kasong ito at sumailalim sila sa paglilipat ng embryo.

Ang iminungkahing pamamaraan ay batay sa paggamit ng karaniwang kagamitan sa laboratoryo at hindi nangangailangan ng teknikal na pagbabago. Ang paggamit ng diskarteng ito ay nagpapahintulot sa doktor na mahulaan ang resulta ng pagpapabunga sa unang araw ng paglilinang ng oocyte upang bumuo ng karagdagang mga taktika para sa pamamahala ng pasyente at magsagawa ng karagdagang mga pagsubok sa laboratoryo upang linawin ang mga sanhi ng pagkabigo sa pagpapabunga. Ang sinasabing paraan ay maaaring gamitin sa mga gynecological na ospital gamit ang IVF at PE program.

CLAIM

Isang paraan para sa paghula ng resulta ng isang IVF at PE program sa pamamagitan ng pagsusuri sa follicular fluid, na nailalarawan sa dami ng nilalaman ng TNF- at -FGF sa follicular fluid, at ang prognostic index (PI) ay kinakalkula gamit ang formula

PI=0.0027·Х+Y·(+8.9626·10 -7 ·Y-3.0827·10 -6 ·Х)-0.1448,

kung saan ang X ay ang halaga ng TNF-, ang Y ay ang halaga ng -FGF, at may halaga ng PI na mas mababa sa 0.3038, ang isang kanais-nais na resulta ng in-vitro fertilization ay hinuhulaan, at may isang halaga na katumbas ng o mas mataas sa 0.3038, isang hindi kanais-nais ang kinalabasan ng pagpapabunga ay hinuhulaan sa in-vitro.