al hypotension, tachycardia, igsi ng paghinga, sianosis. Sa malubhang kurso sakit, pagdurugo at pagsusuka na may halong dugo ay posible. Ang atay at pali ay pinalaki. Ang Oliguria ay nabanggit. Ang temperatura ay nananatiling patuloy na mataas sa loob ng 3-10 araw. SA peripheral na dugo- neutrophilic leukocytosis na may paglipat ng formula sa kaliwa. Bilang karagdagan sa mga inilarawan karaniwang mga pagpapakita salot, nagkakaroon ng mga sugat na katangian ng mga indibidwal na klinikal na anyo ng sakit.

Ang anyo ng balat ay bihira (3-5%). Sa site ng entrance gate ng impeksyon, lumilitaw ang isang lugar, pagkatapos ay isang papule, isang vesicle (phlyctena), na puno ng mga serous hemorrhagic na nilalaman, na napapalibutan ng isang infiltrated zone na may hyperemia at edema. Ang Phlyctena ay nailalarawan sa pamamagitan ng matinding sakit. Kapag ito ay binuksan, ang isang ulser ay nabubuo na may maitim na langib sa ilalim. Ang ulser ng salot ay may mahabang kurso at dahan-dahang gumagaling, na bumubuo ng peklat. Kung ang form na ito ay kumplikado ng septicemia, nangyayari ang pangalawang pustules at ulcers. Posible ang pagbuo ng rehiyonal na bubo (cutaneous bubonic form).

Ang bubonic form ay ang pinakakaraniwan (mga 80%) at may medyo benign na kurso. Mula sa mga unang araw ng sakit sa lugar ng rehiyon mga lymph node lumilitaw ang matinding sakit, na nagpapahirap sa paggalaw at pinipilit ang pasyente na kumuha ng sapilitang posisyon. Ang pangunahing bubo, bilang panuntunan, ay iisa; maramihang bubo ay hindi gaanong madalas na sinusunod. Sa karamihan ng mga kaso, ang inguinal at femoral lymph node ay apektado, at medyo mas madalas, ang axillary at cervical lymph nodes. Ang laki ng bubo ay nag-iiba mula sa walnut sa isang katamtamang laki ng mansanas. Ang mga matingkad na tampok ay matalim na sakit, siksik na pagkakapare-pareho, pagdirikit sa pinagbabatayan na mga tisyu, kinis ng mga contour dahil sa pag-unlad ng periadenitis. Nagsisimulang mabuo ang bubo sa ikalawang araw ng pagkakasakit. Habang lumalaki ito, ang balat sa ibabaw nito ay nagiging pula, makintab, at kadalasan ay may cyanotic tint. Sa simula ito ay siksik, pagkatapos ay lumambot, lumilitaw ang pagbabagu-bago, at ang mga contour ay nagiging hindi malinaw. Sa ika-10-12 araw ng sakit, ito ay bubukas - isang fistula at ulceration form. Sa isang benign na kurso ng sakit at modernong antibiotic therapy, ang resorption o sclerosis nito ay sinusunod. Bilang isang resulta ng hematogenous na pagpapakilala ng pathogen, ang pangalawang buboes ay maaaring mabuo, na lumilitaw sa ibang pagkakataon at maliit ang laki, hindi gaanong masakit at, bilang isang panuntunan, ay hindi suppurate. Ang isang malubhang komplikasyon ng form na ito ay maaaring ang pagbuo ng isang pangalawang pulmonary o pangalawang septic form, na masakit na nagpapalala sa kondisyon ng pasyente, kahit na humahantong sa kamatayan.

Pangunahing baga bihira ang anyo, sa panahon ng epidemya sa 5–10% ng mga kaso at ito ang pinaka-mapanganib sa mga terminong epidemiological at malala. klinikal na anyo mga sakit. Nagsisimula ito nang husto, marahas. Laban sa background ng isang binibigkas na sindrom ng pagkalasing, isang tuyong ubo, matinding igsi ng paghinga, pananakit ng pagputol sa dibdib. Ang ubo ay nagiging produktibo, kasama ang paggawa ng plema, ang dami nito ay maaaring mag-iba mula sa ilang mga dumura hanggang sa napakalaking dami, ito ay bihirang wala. Ang plema, sa simula ay mabula, malasalamin, transparent, pagkatapos ay duguan ang hitsura, kalaunan ay nagiging puro duguan, naglalaman ng malaking halaga bakterya ng salot. Karaniwan itong may pare-parehong likido - isa sa mga palatandaan ng diagnostic. Ang pisikal na data ay kakaunti: isang bahagyang pag-ikli ng tunog ng pagtambulin sa ibabaw ng apektadong umbok; sa auscultation, walang maraming pinong wheez, na malinaw na hindi tumutugma sa pangkalahatang malubhang kondisyon ng pasyente. Ang panahon ng terminal ay nailalarawan sa pamamagitan ng pagtaas ng igsi ng paghinga, cyanosis, pag-unlad ng stupor, pulmonary edema at ITS. Bumababa ang presyon ng dugo, bumibilis ang pulso at nagiging parang sinulid, humihina ang mga tunog ng puso, ang hyperthermia ay napapalitan ng hypothermia. Kung walang paggamot, ang sakit ay nagtatapos sa kamatayan sa loob ng 2-6 na araw. Sa maagang paggamit antibiotics, benign ang takbo ng sakit, may kaunting pagkakaiba

Ano ang immunoblot? Ito ay isang karaniwang pamamaraan mga diagnostic sa laboratoryo mga impeksyon sa viral tao. Ito ay itinuturing na isa sa mga pinaka-tumpak at maaasahang paraan upang makita ang pagkakaroon ng HIV. Sa pagiging maaasahan nito, nahihigitan nito kahit na ang mga resulta ng immunoblot ay itinuturing na hindi masasagot at pinal.

Pangkalahatang Impormasyon

Immunoblot - ano ito? Upang makilala ang impeksyon ng HIV sa isang tao, kinakailangan na sumailalim sa isang pagsubok sa laboratoryo ng serum ng dugo para sa pagkakaroon ng mga antibodies. Ang immunoblotting technique ay tinatawag ding Western blot. Ito ay ginagamit upang makita ang mga impeksyon sa virus ng tao bilang isang karagdagang pamamaraan ng eksperto. Kinakailangang kumpirmahin ang ELISA - isang pagsubok sa laboratoryo na nagpapahintulot sa iyo na matukoy ang pagkakaroon ng mga antibodies sa HIV sa dugo. Suriin muli gamit ang immunoblotting positibong pagsubok ELISA. Ito ay itinuturing na pinakasensitibo, kumplikado at mahal.

Layunin

Ano ang immunoblot? Ito ay isang pamamaraan sa laboratoryo para sa pagsusuri ng serum ng dugo para sa pagkakaroon ng mga antibodies sa virus. Sa panahon ng pag-aaral, pinaghihiwalay muna ng isang espesyalista ang mga viral protein sa isang gel at inililipat ang mga ito sa isang nitrocellulose membrane. Ang pamamaraan ng immunoblotting ay inilaan upang makita ang HIV sa iba't ibang yugto. Sa unang yugto, ang purified virus mula sa mga bahagi sumailalim sa electrophoresis, at ang mga antigen na kasama sa komposisyon nito ay pinaghihiwalay ng molekular na timbang.

Ito ay nagpaparami sa isang buhay na selula, na naglalagay ng genetic na impormasyon dito. Sa yugtong ito, ang isang tao ay nagiging carrier ng HIV virus kung siya ay nahawahan. Ang pagtitiyak ng sakit ay na ito sa mahabang panahon maaaring hindi ipakita ang sarili sa lahat. Sinisira ng virus ang mga lymphocyte, kaya bumababa ang kaligtasan sa sakit ng isang tao at hindi na kayang labanan ng katawan ang mga impeksiyon. Kung ang HIV ay ginagamot nang tama at nasa oras, ang pasyente ay mabubuhay hanggang sa hinog na katandaan. Ang kakulangan ng therapy ay hindi maaaring hindi humahantong sa nakamamatay na kinalabasan. Mula sa sandali ng impeksyon, ngunit walang paggamot, ang maximum na habang-buhay ay hindi hihigit sa sampung taon.

Mga kakaiba

Ang pagsusuri ng immunoblot ay isang maaasahang pamamaraan na nagbibigay-daan sa iyo upang matukoy ang pagkakaroon ng mga antibodies sa mga antigen ng HIV ng una at pangalawang uri. Kung ang isang tao ay nahawahan, ang mga antibodies ay lilitaw sa loob ng dalawang linggo, na maaaring makita sa ibang pagkakataon. Ang kakaiba ng HIV ay ang dami ng antibodies ay mabilis na tumataas at nananatili sa dugo ng pasyente. Kahit na sila ay naroroon, ang sakit ay maaaring hindi magpakita mismo sa loob ng dalawa o higit pang mga taon. Ang pamamaraan ng ELISA ay hindi palaging tumpak na tinutukoy ang pagkakaroon ng sakit, kaya ang kumpirmasyon ng mga resulta ay kinakailangan gamit ang immunoblotting at PCR kung naka-link na immunosorbent assay nagpakita positibong resulta.

Mga pahiwatig para sa paggamit

Nalaman na namin kung ano ang "immunoblot", ngunit para kanino ito inireseta? itong pag aaral? Ang dahilan para magpasuri gamit ang immunoblotting ay isang positibong resulta ng ELISA. Kinakailangang sumailalim sa enzyme immunoassay para sa mga pasyenteng sasailalim sa operasyon. Bilang karagdagan, ang mga babaeng nagpaplano ng pagbubuntis, gayundin ang sinumang hindi maayos, ay dapat masuri. buhay sex. Ang immunoblotting ay inireseta sa mga pasyenteng may HIV kung ang mga resulta ng ELISA ay may pagdududa. Ang mga sumusunod na nakababahala na sintomas ay maaaring dahilan upang kumonsulta sa isang doktor:

• biglaang pagbaba ng timbang;
• kahinaan, pagkawala ng pagganap;
• intestinal upset (pagtatae) na tumatagal ng tatlong linggo;
• dehydration ng katawan;
• lagnat;
• pinalaki ang mga lymph node sa katawan;
• pag-unlad ng candidiasis, tuberculosis, pneumonia, toxoplasmosis, exacerbation ng herpes.

Ang pasyente ay hindi kailangang maghanda bago ang pagsusulit venous blood. Hindi ka dapat kumain ng pagkain 8-10 oras bago ang pagsubok. Hindi inirerekumenda na uminom ng mga inuming may alkohol o kape o gumawa ng mabibigat na gawain sa araw bago mag-donate ng dugo. pisikal na ehersisyo, nasasabik.

Saan gagawin ang pagsusuri?

Saan ako maaaring magpasuri para sa HIV? Ang mga pag-aaral ng ELISA at immunoblot ay isinasagawa sa mga pribadong klinika ng lungsod, ang mga resulta ay ibinibigay sa loob ng 24 na oras. Pwede rin naman kagyat na diagnostic. Sa mga pampublikong institusyong medikal, ang mga pagsusuri sa ELISA at immunoblotting ay isinasagawa nang walang bayad, alinsunod sa batas ng Russian Federation. Ito ay sapilitan upang suriin para sa Nakakahawang sakit mga buntis na kababaihan, pati na rin ang mga pasyente na sumasailalim sa ospital o operasyon.

Paano isinasagawa ang pananaliksik?

Paano isinasagawa ang pagsusuri sa ELISA? Ang positibo/negatibong immunoblot ay kinukumpirma o tinatanggihan ang mga resulta ng enzyme immunoassay. Ang pamamaraan ng pananaliksik ay medyo simple. Ang espesyalista ay kumukuha ng venous blood, na tumatagal ng hindi hihigit sa limang minuto. Pagkatapos kumuha ng mga sample, ang lugar ng iniksyon ay dapat na disimpektahin at takpan ng isang band-aid. Ang sampling ay isinasagawa sa isang walang laman na tiyan, kaya pagkatapos ng pamamaraan ay hindi nasaktan na kumain ng isang bar ng maitim na tsokolate o uminom ng matamis na mainit na inumin.

Upang makakuha ng mga direksyon sa libreng pagsusuri nasa estado institusyong medikal, kailangan mong bumisita sa isang general practitioner. Sa pangkalahatan, ang immunoblotting ay hindi naiiba sa ibang mga pagsusuri sa dugo sa mga tuntunin ng paraan ng sampling. Ang pamamaraan ng pananaliksik ay simple. Kung mayroong isang virus sa dugo ng isang tao, ang katawan ay nagsisimulang gumawa ng mga antibodies upang sirain ito. Ang bawat virus ay may sariling hanay ng mga protina ng antigen. Ang pagtuklas ng mga antibodies na ito ay ang batayan ng pamamaraan ng immunoblotting.

Presyo

Magkano ang halaga ng pagsusuri? Ang immunoblot para sa HIV ay hindi isang murang pagsubok. Sa karaniwan, pagsusuri sa screening mga pamamaraan ng immunoassay ng enzyme nagkakahalaga mula 500 hanggang 900 rubles. Ang immunoblotting ay isang pag-aaral sa pag-verify, ang halaga nito ay mula tatlo hanggang limang libong rubles. Higit pa kumplikadong pamamaraan ay mas mahal. Halimbawa, kakailanganin mong magbayad ng humigit-kumulang 12,000 rubles.

Interpretasyon ng resulta

Ang pinakakaraniwang paraan para sa pag-diagnose ng impeksyon sa HIV ay ang enzyme-linked immunosorbent assays at immunoblots. Ginagamit ang mga ito upang matukoy ang mga antibodies sa immunodeficiency virus sa serum ng dugo. Ang pagkakaroon ng impeksyon ay karaniwang kinukumpirma ng dalawang pagsusuri: screening at confirmatory. Ang interpretasyon ng mga resulta ng pag-aaral ay dapat isagawa ng isang doktor, na gumagawa din ng diagnosis at nagrereseta ng paggamot. Kung positibo ang immunoblot, nangangahulugan ito na mayroong virus sa katawan ng tao.

Ang isang positibong resulta ay hindi dapat maging dahilan para sa paggamot sa sarili, dahil ang bawat pasyente ay maaaring magkaroon ng ibang larawan ng sakit. Kasama sa pagsusuri ng husay ang screening at pag-verify. Kung ang pasyente ay walang virus, ang resulta ay ipinahiwatig bilang "negatibo". Kung matukoy sa pamamagitan ng screening, isasagawa ang karagdagang pag-aaral sa pag-verify. Ang immunoblot ay isang assay na nagpapatunay o nagpapabulaan sa isang screening. Kung lumilitaw ang pagdidilim sa test strip sa ilang mga lugar (mga lokasyon ng mga protina), ang isang diagnosis ng HIV ay ginawa. Kung ang mga resulta ay may pagdududa, ang mga pagsusuri ay isinasagawa sa loob ng tatlong buwan.

Maaari mong maiwasan ang impeksyon sa immunodeficiency virus kung susundin mo ilang mga tuntunin: iwasan ang kaswal na pakikipagtalik, gumamit ng condom habang nakikipag-ugnayan, huwag umiinom ng droga. Kung ang sakit ay napansin sa isang buntis, mahalaga na mahigpit na sundin ang mga rekomendasyon ng dumadating na manggagamot at huwag kalimutang sumailalim sa mga pagsusuri para sa pagkakaroon ng virus.

Immunoblotting (immunoblot, Western Blot, western blot)- pinagsasama ang isang enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) na may paunang electrophoretic na paglipat ng mga antigen ng virus sa isang nitrocellulose strip (strip).

Sa magandang pangalang siyentipikong ito, ang "blot" ay malamang na isinalin bilang "blot," at ang "western" bilang "western" ay sumasalamin sa direksyon ng pagkalat ng "blot" na ito sa papel mula kaliwa hanggang kanan, iyon ay, sa heograpikal na mapa ito ay tumutugma sa direksyon mula kanluran hanggang silangan.” Ang kakanyahan ng paraan ng "immune blot" ay ang reaksyon ng immunoenzyme ay isinasagawa hindi sa isang halo ng mga antigen, ngunit sa mga antigen ng HIV, na dati ay ipinamahagi ng immunophoresis sa mga praksyon na matatagpuan ayon sa molekular na timbang sa ibabaw ng nitrocellulose membrane. Bilang resulta, ang mga pangunahing protina ng HIV, ang mga carrier ng antigenic determinants, ay ipinamamahagi sa ibabaw sa anyo ng magkahiwalay na mga guhit, na lumilitaw sa panahon ng isang enzyme-linked immunosorbent reaction.

Kasama sa immunoblot ang ilang mga yugto:

Paghahanda ng strip. Ang immunodeficiency virus (HIV), na dati nang nilinis at nawasak sa mga bumubuo nito, ay sumasailalim sa electrophoresis, at ang mga antigen na bumubuo sa HIV ay pinaghihiwalay ng molekular na timbang. Pagkatapos, gamit ang blotting method (katulad ng pagpiga ng labis na tinta sa isang blotter), ang mga antigen ay inililipat sa isang strip ng nitrocellulose, na ngayon ay naglalaman ng spectrum ng antigen bands na katangian ng HIV, na hindi pa rin nakikita ng mata.

Halimbawang pagsusuri. Ang materyal sa pagsubok (serum, plasma ng dugo ng pasyente, atbp.) ay inilapat sa strip ng nitrocellulose, at kung mayroong mga tiyak na antibodies sa sample, sila ay nagbubuklod sa mahigpit na katumbas (komplementaryong) antigenic band. Bilang resulta ng mga kasunod na pagmamanipula, ang resulta ng pakikipag-ugnayan na ito ay nakikita - ginawang nakikita.

Interpretasyon ng resulta. Ang pagkakaroon ng mga banda sa ilang mga lugar ng nitrocellulose plate ay nagpapatunay sa presensya sa nasubok na serum ng mga antibodies sa mahigpit na tinukoy na mga antigen ng HIV.

Strip A - Positibong Kontrol

Strip B - Mahinang Positibong Kontrol

Lane C - Negatibong Kontrol

Lane D - Positibong sample (natukoy ang mga antibodies sa HIV-1)

Sa kasalukuyan, ang immunoblotting (immunoblot) ay ang pangunahing paraan para sa pagkumpirma ng pagkakaroon ng mga antibodies na partikular sa virus sa test serum. Sa ilang mga kaso ng impeksyon sa HIV, bago mangyari ang seroconversion, ang mga partikular na antibodies ay mas epektibong natukoy sa pamamagitan ng immunoblotting kaysa sa ELISA. Kapag nag-aaral gamit ang paraan ng immunoblotting, napag-alaman na kadalasang ang mga antibodies sa gp 41 ay nakikita sa sera ng mga pasyenteng may AIDS, at ang pagtuklas ng p24 sa mga taong sinusuri para sa mga layuning pang-iwas ay nangangailangan ng karagdagang pananaliksik upang matukoy kung mayroon silang impeksyon sa HIV. Mga sistema ng pagsubok para sa immunoblotting batay sa mga recombinant na protina na nakuha ng genetic engineering, naging mas tiyak kaysa sa mga maginoo na sistema batay sa purified viral lysate. Kapag gumagamit ng isang recombinant antigen, hindi isang nagkakalat, ngunit isang malinaw na tinukoy na makitid na antigen strip ay nabuo, na madaling ma-access para sa pag-record at pagsusuri.

Ang Sera ng mga indibidwal na nahawaan ng HIV-1 ay nagpapakita ng mga antibodies sa mga sumusunod na pangunahing protina at glycoproteins - mga istrukturang envelope protein (env) - gp160, gp120, gp41; core (gag) - p17, p24, p55, pati na rin ang mga viral enzymes (pol) - p31, p51, p66. Ang mga antibodies sa env ay tipikal para sa HIV-2 - gp140, gp105, gp36; gag - p16, p25, p56; pol - p68.

Among mga pamamaraan sa laboratoryo kinakailangan upang maitaguyod ang pagtitiyak ng reaksyon, ang pinaka-tinatanggap na kinikilala ay ang pagtuklas ng mga antibodies sa mga protina ng sobre ng HIV-1 - gp41, gp120, gp160, at HIV-2 - gp36, gp105, gp140.

Isinasaalang-alang ng WHO ang positibong sera kung saan ang mga antibodies sa alinmang dalawang HIV glycoproteins ay nakita sa pamamagitan ng immunoblotting. Ayon sa mga rekomendasyong ito, kung mayroong isang reaksyon sa isa lamang sa mga protina ng sobre (gp 160, gp 120, gp 41) na pinagsama o walang reaksyon sa iba pang mga protina, ang resulta ay itinuturing na nagdududa at inirerekomenda muling pag-aaral gamit ang isang set mula sa ibang serye o mula sa ibang kumpanya. Kung kahit na pagkatapos nito ang resulta ay nananatiling nagdududa, ang pagmamasid sa loob ng 6 na buwan ay inirerekomenda (research pagkatapos ng 3 buwan).

Ang pagkakaroon ng isang positibong reaksyon sa p24 antigen ay maaaring magpahiwatig ng isang panahon ng seroconversion, dahil minsan ang mga antibodies sa protina na ito ay unang lumilitaw. Sa kasong ito, inirerekumenda, depende sa klinikal at epidemiological na data, na ulitin ang pag-aaral na may sample ng serum na kinuha nang hindi bababa sa 2 linggo mamaya, at ito mismo ang kaso kapag ang pagsusuri ng ipinares na sera ay kinakailangan sa impeksyon sa HIV.

Ang mga positibong reaksyon sa gag at pol na mga protina na walang reaksyon sa mga env protein ay maaaring magpakita ng maagang seroconversion at maaari ring magpahiwatig ng impeksyon sa HIV-2 o isang hindi tiyak na reaksyon. Ang mga indibidwal na may mga resultang ito pagkatapos ng pagsusuri para sa HIV-2 ay muling susuriin pagkatapos ng 3 buwan (sa loob ng 6 na buwan).

Ang dugo ay kinuha mula sa isang ugat. Pagkatapos ang pag-aaral ay nagpapatuloy ayon sa mga tagubilin:

• ang sample ay inilalagay sa isang gel para sa electrophoretic separation, na nagreresulta sa mga partikular na protina na sensitibo sa virus;
• nitrocellulose na papel ay inilapat sa ginagamot na gel;
• ang inihandang sample ay inilalagay sa isang blotting apparatus.

Upang makilala ang mga tiyak na enzyme, kinakailangan upang maayos na maghanda ng papel para sa pagsubok sa laboratoryo. Upang gawin ito, inilalapat dito ang mga antibodies at isang may label na radioactive conjugate. Ang resulta ng pag-aaral ay sinusuri nang biswal, ang mga itinayong enzyme chain ay sinusuri.

Pag-decode ng mga resulta

Pagkatapos ng pagmamanipula, nananatili ang mga guhit sa papel. Ang mga ito ay matatagpuan kung saan naganap ang conjugation, iyon ay, ang inilapat na gamot ay tumugon sa protina ng virus. Sa ganitong paraan maaari mong makita ang mga bahagi ng protina:

• mula sa core ng HIV-1 - p17, p24, p55;
• pathogen HIV-2 – p16, p26, p56.

Ang mga resulta ng immunoblotting ay itinuturing na positibo kung ang 2 sa 3 HIV-1 o HIV-2 na protina ay nakita. Dahil ang Western blot (ang pangalawang pangalan ng pag-aaral) ay kadalasang ginagamit upang kumpirmahin positibong ELISA, pagkatapos ay susuriin ang reaksyon para sa mga partikular na protina: gp120/160, gp41 o p24. Bahagi sila ng tatlong pangunahing gene ng AIDS - gag, pol, at env. Sa pangunahing diagnosis ang pagsubok ay isinasagawa lamang para sa mga protina na p25, gp110/120 at gp160; kung nagbibigay ito ng positibong resulta, ang pagsusuri ay isinasagawa para sa p24. Ang bahaging ito ng protina ay nagpapahintulot sa virus na matukoy sa maagang yugto.

Ang isang positibong resulta ay isang dahilan upang maghanap ng mas kumplikadong mga diagnostic. Mali lang ito sa 3 kaso:

• sa mga pasyenteng may mataas na lebel bilirubin;
• sa pakikipag-ugnay sa mga viral antigens;
• para sa mga pathologies ng connective tissue.

Kung ang pasyente ay walang mga linya na nauugnay sa mga protina ng AIDS, kung gayon ang resulta ay tinasa bilang negatibo. Nangangahulugan ito na ang tao ay hindi nahawaan ng HIV o nasa window period. Ang huli ay nangangahulugan na ang virus ay maaaring pumasok sa katawan, ngunit hindi pa nabuo dito. Upang madagdagan ang katumpakan ng diagnosis, ginagamit ang mga sistema ng pagsubok:

• Recombinant-HIV;
• Antigen;
• Peptoscreen.

Matapos suriin ang mga ito, ang resulta ay itinuturing na negatibo kung ang mga protina na gp120, gp160, Sp4 ay hindi matatagpuan sa sample.

May isa pang pagpipilian sa interpretasyon - isang neutral o kahina-hinala na resulta. Ito ay nangyayari sa mga nakipagtalik sa isang kasosyong nahawaan ng HIV. Ang mga antibodies sa mga protina na gp120 at gp160 ay matatagpuan sa kanilang dugo. Gayundin, ang isang kahina-hinala na sagot sa panahon ng blotting ay ibinibigay kapag ang impeksiyon ay asymptomatic, iyon ay, ito ay nasa isang dormant na estado.

Mahalagang sumailalim sa isang kaduda-dudang resulta masusing pagsusuri. Para sa layuning ito, ginagamit ang isang dinamikong pag-aaral ng serum ng dugo, iyon ay, regular na pagsusuri gamit ang immunoblotting at mga pamamaraan ng ELISA sa loob ng anim na buwan. Itinalaga rin karagdagang pagsusuri, dahil ang pagkakaroon ng mga autoantibodies at immune complex sa dugo ay maaaring dahil sa:

• Nakakahawang sakit;
• ang pagkakaroon ng mga kanser na tumor;
• allergy.

IMMUNOBLOT(western blot) - isang paraan ng pagsusuri sa laboratoryo ng serum ng dugo para sa pagkakaroon ng mga antibodies sa HIV; ito ay isang mas tumpak na pagsubok kaysa sa ELISA at ginagamit upang kumpirmahin ang mga resulta ng ELISA. ELISA - enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) -pananaliksik sa laboratoryo, na nagpapahintulot sa iyo na matukoy ang pagkakaroon ng HIV antibodies sa dugo; Pagsusuri sa HIV antibody.

Ayon sa mga rekomendasyon ng WHO, ang immunoblotting (Western blot) ay ginagamit sa pagsusuri ng impeksyon sa HIV bilang karagdagang pamamaraan ng eksperto, na dapat kumpirmahin ang mga resulta ng ELISA. Kadalasan, sinusuri ng pamamaraang ito ang isang positibong resulta ng ELISA, dahil ito ay itinuturing na mas sensitibo at tiyak, bagama't mas kumplikado at mahal.

Pinagsasama ng immunoblotting ang isang enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) na may paunang electrophoretic na paghihiwalay ng mga viral protein sa isang gel at ang paglipat ng mga ito sa isang nitrocellulose membrane. Ang pamamaraan ng immunoblot ay binubuo ng ilang mga yugto (). Una, ang HIV, na dati nang nilinis at nawasak sa mga sangkap na bumubuo nito, ay sumasailalim sa electrophoresis, at lahat ng antigens na kasama sa virus ay pinaghihiwalay ng molekular na timbang. Pagkatapos, gamit ang paraan ng blotting, ang mga antigen ay inililipat mula sa gel sa isang strip ng nitrocellulose o nylon filter, na ngayon ay naglalaman ng isang spectrum ng mga protina na katangian ng HIV, na hindi nakikita ng mata. Susunod, ang materyal sa pagsubok (serum, plasma ng dugo ng pasyente, atbp.) Bilang resulta ng mga kasunod na manipulasyon (katulad ng ELISA), ang resulta ng pakikipag-ugnayan na ito ay nakikita - ginawang nakikita. Ang pagkakaroon ng mga banda sa ilang mga lugar ng strip ay nagpapatunay sa presensya sa nasubok na serum ng mga antibodies sa mahigpit na tinukoy na mga antigen ng HIV.

Ang immunoblotting ay kadalasang ginagamit upang kumpirmahin ang diagnosis ng impeksyon sa HIV. Isinasaalang-alang ng WHO ang positibong sera kung saan ang mga antibodies sa alinmang dalawang protina ng HIV envelope ay nakita sa pamamagitan ng immunoblotting. Ayon sa mga rekomendasyong ito, kung mayroong isang reaksyon sa isa lamang sa mga protina ng sobre (gp160, gp120, gp41) na pinagsama o walang reaksyon sa iba pang mga protina, ang resulta ay itinuturing na nagdududa at inirerekumenda ang muling pagsusuri, gamit ang isang kit mula sa ibang serye o mula sa ibang kumpanya. Kung kahit na pagkatapos nito ay nananatiling nagdududa ang resulta, ang pag-aaral ay ipagpapatuloy bawat 3 buwan.

Upang maisagawa ang immunoblotting, sa unang yugto, ang mga protina na nakapaloob sa serum ng dugo ay pinaghihiwalay sa isang gel ayon sa kanilang molekular na timbang at singil gamit electric field(gamit ang gel electrophoresis). Pagkatapos ay isang nitrocellulose o naylon membrane ang inilalagay sa gel at "binubuwal" (ito ay blotting). Isinasagawa ito sa isang espesyal na silid, na nagbibigay-daan para sa kumpletong paglipat ng materyal mula sa gel hanggang sa lamad. Bilang resulta, ang pattern ng pag-aayos ng protina na nasa gel ay muling ginawa sa lamad (blot), na maaaring madaling manipulahin. Sa una, ang lamad ay ginagamot ng mga antibodies sa nais na antigen, at pagkatapos hugasan ang hindi nakatali na materyal, isang radioactively label na conjugate ay idinagdag na partikular na nagbubuklod sa mga antibodies (tulad ng sa ELISA). Ang lokasyon ng nagreresultang antigen-antibody-labeled conjugate complex ay tinutukoy ng autoradiography gamit ang X-ray film. Matapos ang pagpapakita nito, ang lahat ay nagiging malinaw kung mayroong mga antigen sa dugo o wala.