Istruktura endothelial cells, Kupffer at Ito cells, isasaalang-alang natin ang halimbawa ng dalawang figure.

Ang figure sa kanan ng teksto ay nagpapakita sinusoidal capillaries (SC) ng atay- intralobular sinusoidal capillaries, tumataas mula sa input venule hanggang sa central vein. Ang hepatic sinusoid capillaries ay bumubuo ng isang anastomotic network sa pagitan ng hepatic laminae. Ang lining ng sinusoidal capillaries ay nabuo ng mga endothelial cells at Kupffer cells.

Ang figure sa kaliwa ng teksto ay nagpapakita ng liver plate (LP) at dalawa sinusoidal capillaries (SCs) ng atay hiniwa patayo at pahalang upang ipakita ang mga Ito perisinusoidal cells (CIs). Ipinapakita rin ng figure ang mga cut bile ducts (LC).

Endothelial cells (EC)- malakas na na-flattened squamous cells na may pinahabang maliit na nucleus, mga hindi nabuong organelles at isang malaking bilang ng mga micropinocytic vesicle. Ang cytomembrane ay may tuldok-tuldok na may mga hindi permanenteng butas (O) at fenestra, kadalasang pinagsama-sama sa mga cribriform plate (RP). Ang mga butas na ito ay nagpapahintulot sa plasma ng dugo na dumaan, ngunit hindi sa mga selula ng dugo, na nagbibigay-daan sa pag-access sa mga hepatocytes (D). Ang mga endothelial cell ay walang basement membrane at walang phagocytosis. Ang mga ito ay konektado sa isa't isa gamit ang maliliit na connector complex (hindi ipinapakita). Kasama ng mga cell ng Kupffer, ang mga endothelial cell ay bumubuo sa panloob na hangganan ng espasyo ng Disse (PD); ang panlabas na hangganan nito ay nabuo ng mga hepatocytes.

Kupffer cells (CC)- malaki, hindi matatag na mga stellate cell sa loob ng hepatic sinusoidal capillaries, bahagyang sa kanilang mga bifurcations.

Ang mga proseso ng mga cell ng Kupffer ay dumadaan nang walang anumang mga aparato na nagkokonekta sa pagitan ng mga endothelial cell at madalas na tumatawid sa lumen ng mga sinusoid. Ang mga cell ng Kupffer ay naglalaman ng isang hugis-itlog na nucleus, maraming mitochondria, isang mahusay na binuo Golgi complex, mga maiikling cisterns ng granular endoplasmic reticulum, maraming lysosome (L), mga natitirang katawan, at mga bihirang annular plate. Ang mga cell ng Kupffer ay naglalaman din ng malalaking phagolysosome (PL), na kadalasang naglalaman ng mga hindi na ginagamit na erythrocytes at dayuhang bagay. Ang hemosiderin o iron inclusions ay maaari ding makita, lalo na sa supravital staining.

Ang ibabaw ng mga cell ng Kupffer ay nagpapakita ng irregular na pipi na cytoplasmic folds na tinatawag na lamellipodia (LP) - lamellar stalks, pati na rin ang mga prosesong tinatawag na filopodia (F) at microvilli (MV) na natatakpan ng glycocalyx. Ang plasmalemma ay bumubuo ng mga vermiform body (CT) na may gitnang kinalalagyan na siksik na linya. Ang mga istrukturang ito ay maaaring kumakatawan sa isang condensed glycocalyx.

Mga cell ng Kupffer- Ito ay mga macrophage, malamang na bumubuo ng isang independiyenteng genus ng mga cell. Karaniwang nagmumula ang mga ito sa iba pang mga selula ng Kupffer dahil sa mitotic division ng huli, ngunit maaari ring nagmula sa bone marrow. Ang ilang mga may-akda ay naniniwala na sila ay mga activated endothelial cells.

Paminsan-minsan, ang isang random na autonomic nerve fiber (NF) ay dumadaan sa espasyo ng Disse. Sa ilang mga kaso, ang mga hibla ay may kontak sa mga hepatocytes. Ang mga gilid ng hepatocytes ay nililimitahan ng mga interhepatocyte depressions (MU) na may tuldok na microvilli.

Ito ay mga stellate cells na naisalokal sa loob ng mga puwang ng Disse (PD). Ang kanilang nuclei ay mayaman sa condensed chromatin at kadalasang deformed ng malalaking lipid drops (LA). Ang huli ay naroroon hindi lamang sa perikaryon, kundi pati na rin sa mga proseso ng cell at nakikita mula sa labas bilang spherical protrusions. Ang mga organel ay hindi maganda ang pag-unlad. Ang mga perisinusoidal cells ay nagpapakita ng mahinang endocytic na aktibidad, ngunit kulang sa mga phagosome. Ang mga cell ay may ilang mahabang proseso (O) na nakikipag-ugnayan sa mga kalapit na hepatocytes, ngunit hindi bumubuo ng mga connecting complex.

Saklaw ng mga sanga sinusoidal capillaries ng atay at sa ilang mga kaso ay dumaan sa hepatic laminae, na nakikipag-ugnayan sa mga katabing hepatic sinusoids. Ang mga proseso ay hindi pare-pareho, branched at manipis; maaari din silang maging patag. Ang pag-iipon ng mga grupo ng mga patak ng lipid, sila ay nagpapahaba at kumukuha ng hitsura ng isang brush ng ubas.

Ito ay pinaniniwalaan na ang perisinusoidal Ito cell ay hindi maganda ang pagkakaiba-iba ng mga mesenchymal cells na maaaring ituring bilang hematopoietic stem cell, dahil maaari silang mag-transform sa ilalim ng mga pathological na kondisyon sa mga fat cell, aktibong blood stem cell o fibroblast.

Sa ilalim ng normal na mga kondisyon, ang mga selulang Ito ay kasangkot sa akumulasyon ng taba at bitamina A pati na rin sa paggawa ng intralobular reticular at collagen fibers (KB).

1

Ang isang ultrastructural, immunohistochemical at morphometric na pagsusuri ng populasyon ng stellate cell ng atay sa dinamika ng pag-unlad ng fibrosis at cirrhosis ng nakakahawang viral na pinagmulan ay isinagawa. Ang fibrogenic activation ng stellate cells ng atay ay ipinahayag, na kung saan ay nailalarawan sa pamamagitan ng pagbawas ng mga patak ng lipid at kasabay na pagpapahayag ng mga katangian na tulad ng fibroblast - isang positibong immunohistochemical reaksyon sa makinis na kalamnan α-actin, hyperplasia ng butil na cytoplasmic reticulum, at pericellular formation ng maraming collagen fibrils. Ipinakita na, sa kabila ng progresibong pagbaba sa bilang ng density ng mga selulang stellate na naglalaman ng lipid sa panahon ng pag-unlad ng fibrosis, kailangan pa ring mapanatili ang pag-andar ng deposition ng mga retinoid - sa cirrhosis ng atay, ang mga selulang stellate na naglalaman ng lipid ay matatagpuan sa fibrous septa at sa loob ng lobules. Napagpasyahan na ang mga stellate cell ng atay ay isang polymorphic heterogenous na populasyon na may malawak na spectrum ng functional na aktibidad.

fibroogenesis

stellate cells ng atay

ultrastructure

immunohistochemistry

1. Balabaud C., Bioulac-Sage P., Desmouliere A. Ang papel ng hepatic stellate cells sa pagbabagong-buhay ng atay // J. Hepatol. - 2004. - Vol. 40. – P. 1023–1026.

2. Brandao D.F., Ramalho L.N.Z., Ramalho F.S. Liver cirrhosis at hepatic stellate cells // Acta Cirúrgica Brasileira. - 2006. - Vol. 21. – P. 54–57.

3. Desmet V.J., Gerber M., Hoofnagle J.H. Pag-uuri ng talamak na hepatitis: Diagnosis, grading at staging // Hepatology. - 1994. - Vol. 19. - P. 1523-1520.

4. Gabele E., Brenner D.A., Rippe R.A. Liver fibrosis: Mga senyales na humahantong sa pagpapalakas ng fibrogenic hepatic stellate cell // Front. Biosc. - 2003. - Vol. 8. – P. 69–77.

5. Geerts A. Sa pinagmulan ng mga stellate cells: mesodermal, endodermal o neuro-ectodermal? // J. Hepatol. - 2004. - Vol. 40. – P. 331–334.

6. Gutierrez-Ruiz M.C., Gomez-Quiroz L.E. Liver fibrosis: paghahanap ng mga sagot sa modelo ng cell // Liver Intern. - 2007. - Vol. 10. – P. 434–439.

7. Kisseleva T., Brenner D.A. Ang papel ng hepatic stellate cells sa fibrogenesis at ang pagbabalik ng fibrosis // J. Gastroenterol. Hepatol. - 2007. - Vol. 22.–P. S73–S78.

8. Ryder S.D. Pag-unlad ng hepatic fibrosis sa mga pasyente na may hepatitis C: isang prospective na pag-aaral ng biopsy sa atay // Gut. - 2004. - Vol. 53. – P. 451–455.

9. Schuppan D., Afdhal N.H. Cirrhosis ng atay // Lancet. - 2008. - Vol. 371. - P. 838-851.

10. Senoo H. Istraktura at pag-andar ng hepatic stellate cells // Med. elektron. microsc. - 2004. - Vol. 37. – P. 3–15.

Ang mga stellate cell ng atay (lipocytes, Ito cells, fat-accumulating liver cells) ay naisalokal sa mga puwang ng Disse sa pagitan ng mga hepatocytes at ng endothelial lining ng sinusoid at gumaganap ng isang nangungunang papel sa regulasyon ng retinoid homeostasis, na nagdedeposito ng hanggang 80% ng bitamina A . Ang espasyo ng Disse ay ang lugar ng pinakamalaking responsibilidad sa pagganap, na nagbibigay ng transsinusoidal exchange. Gamit ang mga pang-eksperimentong modelo at sa kultura ng cell, ipinakita na ang mga hepatic stellate cells ay naiba sa malalaking cytoplasmic lipid droplet na naglalaman ng bitamina A; ang phenotype na ito ay binibigyang kahulugan bilang "pagpapahinga".

Ang pagtaas ng kahalagahan ay nakakabit sa papel ng mga stellate cells sa pagbuo ng fibrosis at cirrhosis ng atay. Sa pagtanggap ng fibrogenic stimuli, "nagpapahinga" ang mga stellate cells na "transdifferentiate", nakakakuha ng myofibroblast-like phenotype, at nagsimulang gumawa ng collagen, proteoglycans, at iba pang bahagi ng extracellular matrix. Fibrosis sa antas ng gitnang veins, sinusoids o portal vessels nililimitahan ang normal na hemodynamics ng atay, na humahantong sa isang pagbawas sa metabolically mahusay na parenkayma, karagdagang - portal hypertension at porto-systemic shunting. Ang akumulasyon ng connective tissue sa mga puwang ng Disse ay nakakagambala sa normal na metabolic na trapiko sa pagitan ng dugo at mga hepatocytes sa pamamagitan ng pag-abala sa clearance ng circulating macromolecules, pagbabago ng intercellular interaction, at humahantong sa liver cell dysfunction.

May mga magkasalungat na opinyon kung ang mga naka-activate na stellate cell ay makakabalik sa isang resting phenotype. May nakuhang ebidensya na ang liver fibrogenic stellate cells ay maaaring bahagyang i-level ang proseso ng pag-activate, halimbawa, kapag nalantad sa mga retinoid o kapag nakikipag-ugnayan sa mga bahagi ng extracellular matrix, kabilang ang type I fibrillar collagen o mga bahagi ng basement membrane. Ang solusyon sa isyung ito ay sumasailalim sa problema ng reversibility ng fibrosis at ang pagbuo ng mga therapeutic approach sa paggamot ng liver cirrhosis.

Layunin ng pag-aaral- upang magsagawa ng isang komprehensibong pag-aaral ng mga istruktura at functional na mga tampok ng mga stellate cell ng atay sa dinamika ng mga fibrotic na pagbabago sa isang modelo ng talamak na impeksyon sa HCV.

Mga pamamaraan ng materyal at pananaliksik

Ang isang kumplikadong light-optical, electron-microscopic at morphometric na pag-aaral ng liver biopsy specimens sa talamak na impeksyon sa HCV sa iba't ibang yugto ng fibrotic na pagbabago ay isinagawa (100 sample na hinati sa 4 na pantay na grupo ayon sa kalubhaan ng fibrosis). Mahalagang tandaan na ang mga lipid-containing stellate cells ay pinakamahusay na nakikita sa mga semi-thin na seksyon, fibrogenic stellate cells - sa mga ultra-manipis na seksyon lamang o gumagamit ng immunohistochemical imaging.

Ang mga sample ng atay ay naayos sa isang 4% na solusyon ng paraformaldehyde na pinalamig sa 4°C, na inihanda sa phosphate buffer ng Millonig (pH 7.2-7.4); Ang mga seksyon ng paraffin ay nabahiran ng hematoxylin at eosin kasabay ng reaksyon ng Perls, ayon kay van Gieson na may karagdagang paglamlam ng mga nababanat na hibla na may resorcinol fuchsin ng Weigert, at isang reaksyon ng PAS ang isinagawa. Ang mga semi-manipis na seksyon ay nabahiran ng Schiff's reagent at azure II. Ang pag-aaral ay isinagawa sa isang Leica DM 4000B universal microscope (Germany). Ang mga micrograph ay kinuha gamit ang isang Leica DFC 320 digital camera at Leica QWin software. Ang mga ultrathin na seksyon na na-counterstain ng uranyl acetate at lead citrate ay sinuri sa isang JEM 1010 electron microscope sa isang accelerating na boltahe na 80 kW.

Ang yugto ng fibrosis ng atay ay tinutukoy sa isang 4-point scale, mula sa portal fibrosis (yugto I) hanggang sa cirrhosis na may pagbuo ng porto-central vascularized septa at nodular transformation ng parenchyma. Ang mga selula ng stellate ng atay at iba pang mga elemento ng cellular na gumagawa ng matrix ay nakita sa dinamika ng fibrosis sa pamamagitan ng pagpapahayag ng makinis na kalamnan na α-actin.

Ang pagpapahayag ng makinis na kalamnan na α-actin sa mga selula ng atay na gumagawa ng matrix ay nasubok gamit ang isang dalawang-hakbang na hindi direktang paraan ng immunoperoxidase na may negatibong kontrol na streptavidin-biotin imaging system para sa mga produkto ng reaksyon. Ang mga pangunahing antibodies na ginamit ay ang mouse monoclonal antibodies sa makinis na kalamnan na α-actin (NovoCastra Lab. Ltd, UK) na diluted 1:25; bilang pangalawang antibodies - unibersal na biotinylated antibodies. Ang mga produkto ng immunohistochemical reaction ay na-visualize gamit ang diaminobenzidine, pagkatapos ay ang mga seksyon ay na-counterstain ng Mayer's hematoxylin. Ang bilang ng density ng mga selulang stellate na naglalaman ng lipid ay nasuri sa mga semi-manipis na seksyon sa isang visual field unit na 38,000 µm2. Para sa pagpoproseso ng istatistikal na datos, ginamit ang t-test ng Mag-aaral; ang mga pagkakaiba sa inihambing na mga parameter ay itinuturing na makabuluhan kung ang posibilidad ng error P ay mas mababa sa 0.05.

Mga resulta ng pananaliksik at talakayan

Sa kaunting mga pagbabago sa fibrotic sa atay ng mga pasyente na may talamak na hepatitis C, bilang isang panuntunan, ang isang sapat na malaking bilang ng mga stellate cell ay matatagpuan, na malinaw na nakikita lamang sa mga semi-manipis at ultra-manipis na mga seksyon at naiiba sa mga puwang ng Disse sa pamamagitan ng pagkakaroon ng malalaking patak ng lipid sa cytoplasm. Ang pagbabagong-anyo ng mga stellate cell mula sa "resting", na naglalaman ng mga retinoid, sa mga fibrogenic ay sinamahan ng isang unti-unting pagbaba sa bilang ng mga lipid droplet. Kaugnay nito, ang tunay na bilang ng mga stellate cells ay maaaring matukoy gamit ang isang komprehensibong electron microscopic at immunohistochemical study.

Sa mga unang yugto ng fibrosis (0, I) sa talamak na hepatitis C, kapag nag-aaral ng mga semi-manipis na seksyon, ang populasyon ng mga stellate cell ng atay ay nakikilala sa pamamagitan ng binibigkas na polymorphism - ang laki, hugis, bilang ng mga patak ng lipid at ang kanilang mga katangian ng tinctorial ay iba-iba nang husto. : pagkakaiba sa osmiophilicity ng materyal na naglalaman ng lipid sa iba't ibang mga cell. Ang bilang ng density ng mga stellate cells ng atay, na nakikita sa paghahanda sa pamamagitan ng pagkakaroon ng cytoplasmic lipid droplets, ay 5.01 ± 0.18 bawat yunit ng visual field.

Ang mga tampok ng ultrastructure ng stellate cells ay nauugnay sa heterogeneity ng electron density ng lipid droplets hindi lamang sa loob ng parehong cell, kundi pati na rin sa pagitan ng iba't ibang lipocytes: ang isang mas osmiophilic marginal rim ay nakatayo laban sa background ng isang electron-transparent lipid substrate; bilang karagdagan, ang nuclei ay mahigpit na polymorphic, at ang haba ng mga proseso ng cytoplasmic ay iba-iba. Kabilang sa mga ultrastructural na tampok ng mga selulang stellate na naglalaman ng lipid, kasama ang pagkakaroon ng mga patak ng lipid, mapapansin ng isang tao ang isang napakaliit na halaga ng cytoplasmic matrix, mahirap sa mga organelle ng lamad, kabilang ang mitochondria, at samakatuwid, tila, ang phenotype ng lipocytes na ito ay tinatawag na " nagpapahinga" o "passive" .

Sa mga yugto ng fibrosis II at III, ang ultrastructure ng karamihan sa mga stellate cells ay nakakuha ng tinatawag na mixed o transitional phenotype - ang sabay-sabay na pagkakaroon ng morphological features ng parehong lipid-containing at fibroblast-like cells. Sa gayong mga lipocytes, ang nuclei ay nagkaroon ng malalim na invaginations ng nucleolemma, isang mas malaking nucleolus, at isang pagtaas ng dami ng cytoplasm na nagpapanatili ng mga patak ng lipid. Kasabay nito, ang bilang ng mitochondria, libreng ribosomes, polysomes, at tubules ng granular cytoplasmic reticulum ay tumaas nang husto. Bilang isang patakaran, mayroong isang lamad na kontak ng mga patak ng lipid at mitochondria, na nagpapahiwatig ng "paggamit" ng mga lipid. Sa maraming mga cell, ang pagkasira ng mga patak ng lipid ay isinasagawa sa pamamagitan ng pagbuo ng mga autophagosome, na pagkatapos ay tinanggal ng exocytosis. Sa ilang mga kaso, ang paglaganap ng mga stellate cells ng isang halo-halong phenotype ay nabanggit.

Ang mga selulang stellate na gumagawa ng matrix, ang pinakamarami sa yugto ng cirrhosis ng atay, ay nailalarawan sa pamamagitan ng kumpletong kawalan ng mga butil ng lipid, isang anyo na tulad ng fibroblast, isang binuo na kompartimento ng synthesizing ng protina, at ang pagbuo ng mga contractile fibrillar na istruktura sa cytoplasm; pericellularly sa mga puwang ng Disse, maraming mga bundle ng collagen fibrils na may isang tiyak na transverse striation ay naisalokal.

Sa pangkalahatan, sa panahon ng pag-unlad ng talamak na hepatitis C, na sinamahan ng intralobular perisinusoidal fibrogenesis, mayroong mga morphological na palatandaan ng pag-activate ng mga selula ng stellate ng atay, ang kanilang pagbabago mula sa tinatawag na "passive", na nag-iipon ng bitamina A, sa fibrogenic at proliferating na mga cell.

Sa yugto ng pagbabagong-anyo sa cirrhosis ng atay, nagkaroon ng makabuluhang pagbaba sa numerical density ng mga selulang stellate na naglalaman ng lipid, na nagpapahiwatig ng kanilang pagbabagong fibrogenic. Gayunpaman, sa kaso ng nabuo na cirrhosis ng atay, sa mga nakahiwalay na kaso, mayroong mga lugar ng parenchyma ng atay na may perisinusoidal lipid-containing stellate cells. Bilang karagdagan, sa isang sample, maraming lipocytes ang natagpuan sa periportal fibrous tissue, na malamang na nagpapahiwatig ng mahalagang papel ng mga stellate cells sa metabolismo ng mga retinoid sa katawan, kahit na sa yugto ng organ cirrhosis. Bilang karagdagan, ang mga stellate cell ay tila may maraming iba pang mga function, sila ay matatagpuan din sa mga extrahepatic na organo tulad ng pancreas, baga, bato at bituka, at mayroong isang opinyon na ang hepatic at extrahepatic stellate cells ay bumubuo ng isang disseminated stellate cell system ng ang katawan, katulad ng APUD system. Halimbawa, sa kabila ng pagkakaugnay ng fibrogenic stellate cells na may liver cirrhosis, ang kanilang activation ay maaaring maglaro ng isang kapaki-pakinabang na papel sa mga kaso ng matinding pinsala, dahil ang resulta ay isang naaangkop na stromal circuit para sa pagbabagong-buhay ng mga parenchymal cells.

Ang kalubhaan ng perihepatocellular fibrosis sa talamak na impeksyon sa HCV, ayon sa morphometric analysis, ay may makabuluhang kabaligtaran na ugnayan sa numerical density ng lipid-containing stellate cells - sa yugto ng fibrosis III at may organ cirrhosis, ito ay 0.20 ± 0.03 bawat visual field yunit, na mas kaunti (p< 0,05), чем на стадиях фиброза 0 - I (5,01 ± 0,18) и II (2,02 ± 0,04).

Ang fibrogenic na aktibidad ng mga selula ng atay na gumagawa ng matrix ay sinubukan namin gamit ang isang immunohistochemical na pag-aaral sa pagpapahayag ng makinis na kalamnan na alpha-actin. Ang mga produkto ng immunohistochemical reactions ng iba't ibang intensity ay natagpuan sa cytoplasm ng activated stellate cells na naisalokal sa loob ng hepatic lobules. Lalo na ang makabuluhang pagpapahayag ng makinis na kalamnan na α-actin ay nabanggit sa cytoplasm ng fibroblast at myofibroblast ng mga portal zone, makinis na mga selula ng kalamnan ng mga sisidlan at myofibroblast sa paligid ng mga gitnang ugat.

Karamihan sa mga data sa mga mekanismo ng cellular ng fibrogenesis ay nagmumula sa mga pag-aaral na isinagawa sa hepatic stellate cells, gayunpaman, malinaw na ang iba't ibang mga cell na gumagawa ng matrix (bawat isa ay may isang tiyak na lokalisasyon, immunohistochemical at ultrastructural phenotype) ay nag-aambag sa pagbuo ng hepatic fibrosis. Kasama sa mga ito ang mga fibroblast at myofibroblast ng mga portal tract, mga selula ng makinis na kalamnan ng vascular, at mga myofibroblast sa paligid ng mga sentral na ugat, na pinapagana sa mga kondisyon ng talamak na pinsala sa atay.

Konklusyon

Ang papel na ginagampanan ng mga selula ng stellate ng atay sa pagbuo ng organ fibrosis sa talamak na hepatitis C ay ipinakita. Sa pag-unlad ng fibrosis, ang bilang ng density ng mga selulang stellate na naglalaman ng lipid ay makabuluhang bumababa, habang ang bahagi ng populasyon ay nagpapanatili ng tinatawag na "resting "phenotype para sa metabolic function. Ang "Myofibroblast-like" na mga stellate cells sa isang estado ng fibrogenic activation ay nailalarawan sa pamamagitan ng mga sumusunod na istruktura at functional na mga tampok: isang pagbaba sa bilang at kasunod na pagkawala ng mga patak ng lipid, hyperplasia ng butil na cytoplasmic reticulum at mitochondria, focal proliferation, immunohistochemical expression ng mga katangiang tulad ng fibroblast, kabilang ang makinis na kalamnan na α-actin, at ang pagbuo ng pericellular collagen fibrils sa mga espasyo ng Disse.

Kaya, ang mga stellate cells ng atay ay hindi isang static, ngunit isang dinamikong populasyon na direktang kasangkot sa remodeling ng intralobular perihepatocellular matrix.

Mga Reviewer:

Vavilin V.A., Doktor ng Medical Sciences, Propesor, Head. Laboratory of Drug Metabolism, Research Institute of Molecular Biology at Biophysics, Siberian Branch ng Russian Academy of Medical Sciences, Novosibirsk;

Kliver E.E., Doctor of Medical Sciences, Nangungunang Mananaliksik, Laboratory of Pathomorphology at Electron Microscopy, Novosibirsk Research Institute of Circulatory Pathology na ipinangalan sa akademikong E.N. Meshalkin ng Ministry of Health at Social Development ng Russian Federation, Novosibirsk.

Ang gawain ay natanggap ng mga editor noong Agosto 15, 2011.

Bibliograpikong link

Postnikova O.A., Nepomnyashchikh D.L., Aidagulova S.V., Vinogradova E.V., Kapustina V.I., Nokhrina Zh.V. STRUCTURAL AT FUNCTIONAL NA KATANGIAN NG STELLATED LIVER CELLS SA DYNAMICS OF FIBROSIS // Fundamental Research. - 2011. - Hindi. 10-2. – P. 359-362;
URL: http://fundamental-research.ru/ru/article/view?id=28817 (petsa ng access: 01/30/2020). Dinadala namin sa iyong pansin ang mga journal na inilathala ng publishing house na "Academy of Natural History"

Ang pangunahing pinagmumulan ng endotoxin sa katawanay isang Gram-negative na intestinal flora. Sa kasalukuyan, walang duda na ang atay ang pangunahing organ paglilinis ng endotoxin. Sinabi ni EnAng dotoxin ay unang kinukuha ng cell Kami Kupffer (KK), na nakikipag-ugnayan sa receptor ng lamad CD 14. Maaaring magbigkis sa receptor bilang mismo lipopolysaccharide(LPS), at ang complex nito sa lipid A-binding protein bukol ng plasma. Ang pakikipag-ugnayan ng LPS sa mga macrophage ng atay ay nagpapalitaw ng isang kaskad ng mga reaksyon, na batay sa paggawa at pagpapalabas ng ion ng mga cytokine at iba pang biologically active mga tagapamagitan.

Maraming mga publikasyon tungkol sa papel ng macrong atay (LK) sa uptake at clearance ng bacterial LPS, gayunpaman, ang pakikipag-ugnayan ng endothelium sa iba pang mesenchymal mga cell, sa partikular perisinusoidal ng Ito cell, ay halos hindi pinag-aralan.

PARAAN NG PANANALIKSIK

Ang mga puting lalaking daga na tumitimbang ng 200 g ay na-injected intraperitoneally sa 1 ml ng sterile saline napakadalisay lyophilized LPS E. coli strain 0111 sa mga dosis na 0.5,2.5, 10, 25 at 50 mg/kg. Sa mga panahon ng 0.5, 1, 3, 6, 12, 24, 72 h, at 1 linggo, ang mga panloob na organo ay tinanggal sa ilalim ng kawalan ng pakiramdam at inilagay sa buffered 10% formalin. Ang materyal ay naka-embed sa mga bloke ng paraffin. Ang mga seksyon na 5 µm ang kapal ay nabahiran immunohistochemicalstreptavidin-biotin sa pamamagitan ng paraan ng mga antibodies sa desmin, α - makinis - muscle actin (A-GMA) at nuclear antigen mahusay na lumalagong mga selula ( PCNA," Dako"). Ginamit si Desmin bilang pananda perisinusoidalIto cells, A-GMA - as pananda ve myofibroblast, PCNA - dumarami ang mga selula. Upang makita ang endotoxin sa mga selula ng atay, purified anti-Re-glycolipidantibodies (Institute of General and Clinical Pathology KDO, Moscow).

RESULTA NG PAG-AARAL

Sa isang dosis na 25 mg/kg pataas, ang nakamamatay na pagkabigla ay naobserbahan 6 na oras pagkatapos ng pangangasiwa ng LPS. Ang talamak na pagkakalantad sa LPS sa tisyu ng atay ay sanhi ng pag-activate ng mga selulang Ito, na ipinakita sa pamamagitan ng pagtaas ng kanilang bilang. Numero desminpositive tumaas ang mga cell mula 6 na oras pagkatapos ng iniksyon ng LPS at umabot sa maximum ma hanggang 48-72 h (Larawan 1, a, b).

kanin. 1. Mga seksyon ng atay ng daga sy, naproseso LSAB -ako- chennymiantibodies sa des akin(isang banda α - makinis cervical actin (c), x400 (a, b) x200 (c).

a - bago ang pagpapakilala ng endotoxinsa, single desminpositiveIto mga cell sa periportal zone; b- 72 oraspagkatapos ng pangangasiwa ng endotoxin sa: marami desminpositive Ito cell; sa- 120 oras pagkatapos ng pagpapakilala ng en dotoxin: α - makinis na kalamnan present lang ang actinco sa makinis na mga selula ng kalamnan kah mga sisidlan.

Sa 1 numero ng linggo desminpositive nabawasan ang mga selula, ngunitay mas mataas kaysa sa mga benchmark. Sa Sa kasong ito, hindi namin naobserbahan ang hitsura ng A-GMA-positive mga selula sa sinus dah liver. panloob na positibo kontrol kapag nabahiran ng antibodies sa A-GMA nagsilbi upang makilala ang makinis na mga selula ng kalamnanvenous vessels ng portal tracts na naglalaman ng A-GMA (Fig. 1, sa). Samakatuwid, sa kabila ng pagtaas ng bilang ng mga Ito cell, isang beses Ang epekto ng LPS ay hindi humahantong sa pagbabago ( transdifferentiation) ang mga ito sa myofibroblast.

kanin. 2. Mga seksyon ng ataydaga, ginagamot LSAB -may label na antibodies sa PCNA. a - bago ang pagpapakilala ng en dotoxin: singlelumalaganap na mga gene mga pathocytes, x200; b - 72 oras pagkatapos ng pagpapakilala ng endotoxin: maraming proliferating hepatocytes, x400.

Pagtaas ng dami desminpositive nagsimula ang mga cell sa loob ng portal zone. Mula 6 h hanggang 24 h pagkatapos ng pangangasiwa ng LPS perisinusoidal Ang mga cell ay matatagpuan lamang sa paligid ng mga portal tract, i.e. sa 1st aci zone noosa. Sa oras ng 48-72 na oras, kapag naobserbahan ang poppymaximum na dami desminpositive pandikit kasalukuyang, lumitaw din sila sa iba pang mga zone ng acinus; gayunpaman, karamihan sa mga selulang Ito ay matatagpuan pa rin sa periportal.

Marahil ito ay dahil sa katotohanan na periportalmatatagpuan ang mga CC ang unang nakunan endotoxin na nagmumula sa bituka sa pamamagitan ng portal vein o mula sa systemic circulation. Ak ang tivated QC ay gumagawa ng malawak na hanay cytokines, na inaakalang nag-trigger ng activation ng Ito cells at transdifferentiation ang mga ito sa myofibroblast. Malinaw, ito ang dahilan kung bakit ang mga Ito cell na matatagpuan malapit sa mga activated liver macrophage (sa 1st zone ng acinus) ang unang tumugon sa pagpapalabas ng mga cytokine. Gayunpaman, hindi namin sila naobserbahan sa aming pag-aaral. transdifferentiation sa myofibroblast, at ito ay nagmumungkahi na ang mga cytokine na itinago ng CK at hepatocytes ay maaaring magsilbi bilang isang kadahilanan na sumusuporta sa proseso na nagsimula na. transdifferentiation, ngunit malamang na hindi nila ito ma-trigger sa isang solong pagkakalantad ng atay sa LPS.

Ang isang pagtaas sa proliferative na aktibidad ng mga cell ay naobserbahan din pangunahin sa 1st zone ng acinus. Ito ay malamang na nangangahulugan na ang lahat (o halos lahat) na proseso ay naglalayong out tungkol sa- at paracrine regulation ng intercellular interactions, magpatuloy sa periportal zones. Ang isang pagtaas sa bilang ng mga proliferating na mga cell ay naobserbahan mula sa 24 h pagkatapos ng pangangasiwa ng LPS; ang bilang ng mga positibong selula ay tumaas hanggang 72 h (maximum proliferative activity, Fig. 2, a, b). Ang parehong mga hepatocytes at sinusoid cells ay dumami. Gayunpaman, ang pangkulay PCNA hindi nagbibigay kakayahang kilalanin ang uri ng proliferi pagmamaneho ng mga sinusoidal na selula. Ayon sa panitikan, ang pagkilos ng endotoxin ay humahantong sa isang pagtaas sa ang bilang ng QC. Sa tingin nila ito ay tungkol sa nagpapatuloy kapwa dahil sa paglaganap ng mga macrophage ng atay, at dahil sa paglipat ng mga monocytes mula sa ibang mga organo. Ang mga cytokine na inilabas ng CK ay maaaring mapataas ang proliferative capacity ng Ito cells. Samakatuwid, lohikal na ipagpalagay na ang proliferating na mga cell ay kinakatawan ng perisinusoidal Ito cell. Ang pagtaas sa kanilang bilang na nakarehistro sa amin ay tila kinakailangan upang madagdagan ang synthesis ng mga kadahilanan ng paglago at ibalik ang extracellular matrix sa ilalim ng mga kondisyon ng pinsala. Ito ay maaaring isa sa mga link sa mga compensatory-regenerative na reaksyon ng atay, dahil ang mga cell ng Ito ay ang pangunahing pinagmumulan ng mga bahagi ng extracellular matrix, stem cell factor at hepatocyte growth factor, na kasangkot sa pagkumpuni at pagkita ng kaibhan. rovka epithelial cells ng atay. Wala ang parehong pagbabago ng Ito cell sa myofibroblast ay nagpapahiwatig na ang isang yugto ng pagsalakay ng endotoxin ay hindi sapat para sa pagbuo ng fibrosis ng atay.

Kaya, acute exposure sa endotok sina sanhi ng pagtaas ng bilang desminpositive Ito cells, na isang hindi direktang tanda ng pinsala sa atay. Dami perisinusoidal tumataas ang mga selula, tila bilang resulta ng kanilang paglaganap. Ang isang episode ng endotoxin aggression ay nagdudulot ng pagbaliktad ang aking pag-activate perisinusoidal Ito cell at hindi humahantong sa transdifferentiation sa myofibroblast. Sa pagsasaalang-alang na ito, maaari itong ipagpalagay na sa mga mekanismo ng pag-activate at transdifferentiation Sa mga cell ng Ito, hindi lamang endotoxin at cytokine ang kasangkot, kundi pati na rin ang ilang iba pang mga kadahilanan ng intercellular na pakikipag-ugnayan.

PANITIKAN

1. Mayansky D.N., Wisse E., Decker K. // Bagong Frontiers hepatolohiya. Novosibirsk, 1992.

2. Salakhov I.M., Ipatov A.I., Konev Yu.V., Yakovlev M.Yu. // Nagtagumpay sa modernong, biol. 1998. Tomo 118, Isyu . 1. S. 33-49.

3. Yakovlev M.Yu. // Kazan . m mga yunit magazine 1988. Bilang 5. S. 353-358.

4. Freudenberg N., Piotraschke J., Galanos C. et al. // Virchows Arch. [b]. 1992. Vol. 61.P. 343-349.

5. Gressner A. M. // Hepatogastronerology. 1996 Vol. 43. P. 92-103.

6. Schmidt C, Bladt F., Goedecke S. et al. // Kalikasan. 1995 Vol. 373, Blg. 6516. P. 699-702.

7. matalino E., Braet F., Luo D. et al. // Toxicol. Pathol. 1996. Vol. 24, Blg. 1. P. 100-111.

Mga keyword

ATAY / ITO STAR CELLS/ MORPOLOHIYA / KATANGIAN / BITAMIN A / FIBROSIS

anotasyon artikulong pang-agham sa pangunahing gamot, may-akda ng gawaing pang-agham - Tsyrkunov V.M., Andreev V.P., Kravchuk R.I., Kondratovich I.A.

Panimula. Ang papel ng Ito stellate cells (ISCs) ay tinukoy bilang isa sa mga nangungunang sa pagbuo ng fibrosis sa atay, gayunpaman, sa vivo visualization ng istraktura ng ITOs sa klinikal na kasanayan ay ginagamit nang minimal. Ang layunin ng trabaho: upang ipakita ang mga istruktura at functional na katangian ng HCI batay sa mga resulta ng cytological identification ng intravital liver biopsy specimens. Mga materyales at pamamaraan. Ang mga klasikal na pamamaraan ng light at electron microscopy ng biopsy specimens at orihinal na mga diskarte gamit ang mga ultrathin section, fixation at staining ay ginamit. Mga resulta. Ang mga larawan-ilustrasyon ng liwanag at electron microscopy ng mga specimen ng biopsy sa atay mula sa mga pasyente na may talamak na hepatitis C ay nagpapakita ng mga katangian ng istruktura ng HSC sa iba't ibang yugto (pahinga, pag-activate) at sa proseso ng pagbabago sa myofibroblast. Mga konklusyon. Ang paggamit ng mga orihinal na pamamaraan ng clinical morphological identification at pagtatasa ng functional state ng HCI ay mapapabuti ang kalidad ng diagnosis at hula ng fibrosis ng atay.

Mga Kaugnay na Paksa siyentipikong mga gawa sa pangunahing gamot, ang may-akda ng siyentipikong gawain - Tsyrkunov V.M., Andreev V.P., Kravchuk R.I., Kondratovich I.A.

• Clinical Liver Cytology: Kupffer cells

  2017 / Tsyrkunov V.M., Andreev V.P., Kravchuk R.I., Prokopchik N.I.

• Pagsubaybay sa morphological effect ng autologous mesenchymal stem cell na inilipat sa atay sa viral cirrhosis (clinical observation)

  2018 / Aukashnk S.P., Alenikova O.V., Tsyrkunov V.M., Isaykina Ya.I., Kravchuk R.I.

• Klinikal na morpolohiya ng atay: nekrosis

  2017 / Tsyrkunov V.M., Prokopchik N.I., Andreev V.P., Kravchuk R.I.

• Polymorphism ng atay stellate cells at ang kanilang papel sa fibrogenesis

  2008 / Aidagulova S.V., Kapustina V.I.

• Ang istraktura ng sinusoidal liver cells sa mga pasyente na may co-infection na may HIV / hepatitis C virus

  2013 / Matievskaya N. V., Tsyrkunov V. M., Kravchuk R. I., Andreev V. P.

• Mesenchymal stem cell bilang isang promising na paraan para sa paggamot ng liver fibrosis/cirrhosis

  2013 / Lukashik S. P., Aleinikova O. V., Tsyrkunov V. M., Isaykina Ya. I., Romanova O. N., Shimansky A. T., Kravchuk R. I.

• Paghihiwalay at paglilinang ng mga myofibroblast ng atay ng daga sa pamamagitan ng pagpapaliwanag

  2012 / Miyanovich O., Shafigullina A. K., Rizvanov A. A., Kiyasov A. P.

• Mga pathological na aspeto ng pagbuo ng fibrosis ng atay sa impeksyon sa HCV at iba pang mga sugat sa atay: mga modernong konsepto

  2009 / Lukashik S. P., Tsyrkunov V. M.

• Pagsusuri ng myofibroblasts ng daga na nakuha mula sa mga istruktura ng portal tract ng atay sa pamamagitan ng explantation

  2013 / Miyanovich O., Katina M. N., Rizvanov A. A., Kiyasov A. P.

• Ang mga inilipat na stellate cell ng atay ay kasangkot sa pagbabagong-buhay ng organ pagkatapos ng bahagyang hepatectomy nang walang panganib na magkaroon ng fibrosis ng atay

  2012 / Shafigullina A. K., Gumerova A. A., Trondin A. A., Titova M. A., Gazizov I. M., Burganova G. R., Kaligin M. S., Andreeva D. I., Rizvanov A. A., Mukhammedov A. R., Kiyasov A. P.

pagpapakilala. Ang papel na ginagampanan ng Ito stellate cells (Hepatic Stellate Cells, HSC) ay nakilala bilang isa sa nangunguna sa pagbuo ng liver fibrosis, ngunit ang paggamit ng intravital visualization ng HSC structures sa klinikal na kasanayan ay minimal. Ang layunin ng gawain ay upang ipakita ang istruktura at functional na katangian ng HSC batay sa mga natuklasan ng cytological identification ng intravital liver biopsy sample. materyales at pamamaraan. Ang mga klasikal na pamamaraan ng light at electron microscopy ng mga sample ng biopsy sa loob ng orihinal na pamamaraan ng paggamit ng mga ultrathin na seksyon, pag-aayos at paglamlam ay inilapat. resulta. Ang mga istrukturang katangian ng HSC ng mga sample ng biopsy sa atay mula sa mga pasyente na may talamak na hepatitis C ay ipinakita sa mga larawang ilustrasyon ng light at electron microscopy. Ang mga HSC ay inilalarawan sa iba't ibang yugto (pahinga, pag-activate) at sa panahon ng proseso ng pagbabago sa myofibroblast. Mga konklusyon. Ang paggamit ng mga orihinal na pamamaraan ng clinical at morphological identification at pagsusuri ng functional status ng HSC ay nagbibigay-daan upang mapabuti ang kalidad ng diagnosis at pagbabala ng fibrosis ng atay.

Ang teksto ng gawaing siyentipiko sa paksang "Clinical Liver Cytology: Ito stellate cells"

UDK 616.36-076.5

CLINICAL LIVER CYTOLOGY: ITO Stellate Cells

Tsyrkunov V. M. ( [email protected]), Andreev V.P. ( [email protected]), Kravchuk R. I. ( [email protected]), Kondratovich I. A. ( [email protected]) EE "Grodno State Medical University", Grodno, Belarus

Panimula. Ang papel ng Ito stellate cells (ISCs) ay tinukoy bilang isa sa mga nangungunang sa pagbuo ng fibrosis sa atay, gayunpaman, ang intravital visualization ng istraktura ng ITOs sa klinikal na kasanayan ay ginagamit nang minimal.

Layunin ng trabaho: upang ipakita ang mga istruktura at functional na katangian ng HCI batay sa mga resulta ng cytological identification ng intravital liver biopsy specimens.

Mga materyales at pamamaraan. Ang mga klasikal na pamamaraan ng light at electron microscopy ng biopsy specimens at orihinal na mga diskarte gamit ang mga ultrathin section, fixation at staining ay ginamit.

Mga resulta. Ang mga larawan-ilustrasyon ng liwanag at electron microscopy ng mga specimen ng biopsy sa atay mula sa mga pasyente na may talamak na hepatitis C ay nagpapakita ng mga katangian ng istruktura ng HSC sa iba't ibang yugto (pahinga, pag-activate) at sa proseso ng pagbabago sa myofibroblast.

Mga konklusyon. Ang paggamit ng mga orihinal na pamamaraan para sa clinical morphological identification at pagtatasa ng functional state ng HCI ay mapapabuti ang kalidad ng diagnosis at hula ng fibrosis ng atay.

Mga pangunahing salita: atay, Ito stellate cells, morpolohiya, katangian, bitamina A, fibrosis.

Panimula

Ang isang hindi kanais-nais na kinalabasan ng karamihan sa mga talamak na nagkakalat na mga sugat sa atay ng iba't ibang mga etiologies, kabilang ang talamak na hepatitis C (CHC), ay fibrosis ng atay, sa pagbuo kung saan ang mga pangunahing kalahok ay na-activate ang mga fibroblast, ang pangunahing pinagmumulan kung saan ay na-activate ang Ito stellate cells (SSCs) .

HSC, kasingkahulugan - liver stellate cells, fat-storing cells, perisinusoidal lipocytes, stellate cells (English Hepatic Stellate Cell, HSC, Cell of Ito, Ito cell). Ang ZKI ay unang inilarawan noong 1876 ni K. Kupffer at pinangalanan niya ang mga stellate cell ("Stemzellen"). T. Ito, na natagpuan ang mga patak ng taba sa kanila, itinalaga ang mga ito sa una na sumisipsip ng taba ("shibo-sesshusaibo"), at pagkatapos, na itinatag na ang taba ay ginawa ng mga selula mismo mula sa glycogen, mga cell na nag-iimbak ng taba ("shibo -chozosaibo”) . Noong 1971, pinatunayan ni K. Wake ang pagkakakilanlan ng mga Kupffer stellate cell at mga cell na Ito na nag-iimbak ng taba at ang mga cell na ito ay "nag-iimbak" ng bitamina A.

Humigit-kumulang 80% ng bitamina A sa katawan ang naiipon sa atay, at hanggang 80% ng lahat ng liver retinoids ay idineposito sa HKI fatty drops. Ang mga retinol ester sa chylomicrons ay pumapasok sa mga hepatocytes, kung saan sila ay na-convert sa retinol, na bumubuo ng isang complex ng bitamina A na may retinol-binding protein (RBP), na itinago sa perisinusoidal space, mula sa kung saan ito idineposito ng mga cell.

Itinatag ni K. Popper, ang malapit na ugnayan sa pagitan ng HCI at liver fibrosis ay nagpakita ng kanilang dynamic kaysa sa static na function - ang kakayahang direktang lumahok sa remodeling ng intralobular perihepatocellular matrix.

Ang pangunahing paraan ng morphological na pagsusuri ng atay, na isinasagawa upang masuri ang mga pagbabago sa intravital biopsy specimens, ay light microscopy, na sa klinikal na kasanayan ay ginagawang posible upang maitaguyod ang aktibidad ng pagpaparami.

nasusunog at ang yugto ng talamak. Ang kawalan ng pamamaraan ay ang mababang resolution, na hindi pinapayagan ang pagsusuri sa mga tampok na istruktura ng mga cell, intracellular organelles, inclusions, at functional na mga katangian. Ang panghabambuhay na electron microscopic na pagsusuri ng mga ultrastructural na pagbabago sa atay ay ginagawang posible upang madagdagan ang data ng light microscopy at dagdagan ang kanilang diagnostic value.

Kaugnay nito, ang pagkilala sa hepatic HCI, ang pag-aaral ng kanilang phenotype sa proseso ng transdifferentiation, at ang pagpapasiya ng intensity ng kanilang paglaganap ay ang pinakamahalagang kontribusyon sa paghula sa mga kinalabasan ng mga sakit sa atay, pati na rin sa pathomorphology at pathophysiology ng fibrogenesis.

Layunin - upang ipakita ang structural at functional na mga katangian ng HCI batay sa mga resulta ng cytological identification ng intravital liver biopsy specimens.

Mga materyales at pamamaraan

Ang isang intravital liver biopsy ay nakuha sa pamamagitan ng aspiration liver biopsy sa mga pasyenteng may CHC (HCV+ RNA), kung saan nakuha ang nakasulat na pahintulot na may kaalaman.

Para sa light microscopy ng semi-thin na mga seksyon, ang mga sample ng biopsy sa atay ng mga pasyente na may sukat na 0.5 × 2 mm ay naayos sa pamamagitan ng double fixation: una, ayon sa pamamaraang Sato Taizan, pagkatapos ay ang mga sample ng tissue ay karagdagang naayos para sa 1 oras sa isang 1% osmium fixative na inihanda sa 0.1 M phosphate Sorensen's buffer, pH 7.4. Ang Potassium dichromate (K2Cr2O7) o chromic anhydride crystals (1 mg/mL) ay idinagdag sa 1% osmium tetroxide upang mas maipakita ang mga intracellular na istruktura at interstitial substance sa mga seksyon ng semithin. Pagkatapos ng dehydration ng mga sample sa isang serye ng mga alkohol na solusyon ng pagtaas ng konsentrasyon at acetone, sila ay inilagay sa isang prepolymerized na pinaghalong butyl methacrylate at styrene at polymerized sa 550C. Ang mga semi-manipis na seksyon (1 µm makapal) ay sunud-sunod na nabahiran

azure II-basic na fuchsin. Ang mga micrograph ay nakuha gamit ang isang digital video camera (Leica FC 320, Germany).

Ang isang electron microscopic study ay isinagawa sa mga sample ng liver biopsy specimens na 0.5x1.0 mm ang laki, na naayos na may 1% na solusyon ng osmium tetroxide sa 0.1 M Millonig's buffer, pH 7.4, sa +40C sa loob ng 2 oras. Pagkatapos ng pag-aalis ng tubig sa pataas na mga alkohol at acetone, ang mga sample ay ibinuhos sa araldite. Ang mga seksyon ng Semithin (400 nm) ay inihanda mula sa nakuha na mga bloke sa isang Leica EM VC7 ultramicrotome (Germany) at nabahiran ng methylene blue. Ang mga paghahanda ay napagmasdan sa ilalim ng isang magaan na mikroskopyo at isang solong uri ng site ang napili para sa karagdagang pag-aaral ng mga pagbabago sa ultrastructural. Ang mga ultrathin na seksyon (35 nm) ay na-counterstain ng 2% uranyl acetate sa 50% methanol at lead citrate ayon kay E. S. Reynolds. Ang mga paghahanda ng mikroskopiko ng elektron ay pinag-aralan gamit ang isang JEM-1011 electron microscope (JEOL, Japan) sa mga magnification na 10,000–60,000 sa isang accelerating na boltahe na 80 kW. Upang makakuha ng mga larawan, ginamit ang isang complex mula sa Olympus MegaViewIII digital camera (Germany) at iTEM image processing software (Olympus, Germany).

resulta at diskusyon

Ang mga HSC ay matatagpuan sa perisinusoidal space (Disse) sa mga bulsa sa pagitan ng mga hepatocytes at endothelial cells; mayroon silang mahabang proseso na tumagos nang malalim sa pagitan ng mga hepatocytes. Sa karamihan ng mga publikasyong nakatuon sa populasyon na ito ng mga HSC, ibinibigay ang kanilang eskematiko na representasyon, na nagpapahintulot lamang sa isa na italaga ang "teritoryal" na pag-aari ng mga HSC sa atay at may kaugnayan sa kanilang nakapaligid na "mga kapitbahay" (Larawan 1).

Ang mga HSC ay malapit na nakikipag-ugnayan sa mga endothelial cells sa pamamagitan ng mga bahagi ng isang hindi kumpletong basement membrane at mga interstitial collagen fibers. Ang mga dulo ng nerbiyos ay tumagos sa pagitan ng SC at parenchymal cells, kaya naman ang espasyo ng Disse ay tinukoy bilang ang puwang sa pagitan ng mga plate ng parenchymal cells at

isang complex ng HCI at endothelial cells.

Ang mga HSC ay pinaniniwalaan na nagmula sa mahinang pagkakaiba-iba ng mga mesenchymal cells sa transverse septum ng pagbuo ng atay. Nalaman ng eksperimento na ang mga hematopoietic stem cell ay kasangkot sa pagbuo ng mga HSC at ang prosesong ito ay hindi dahil sa cell fusion.

Ang mga sinusoidal cells (SC), pangunahin ang mga HSC, ay gumaganap ng isang nangungunang papel sa lahat ng uri ng pagbabagong-buhay ng atay. Ang fibrosing regeneration ng atay ay nangyayari bilang resulta ng pagsugpo sa mga stem function ng HSC at bone marrow stem cells. Sa atay ng tao, ang mga HSC ay bumubuo ng 5-15%, na isa sa 4 na uri ng mga SC na may pinagmulang mesenchymal: Kupffer cells, endotheliocytes, at Pb cells. Ang SC pool ay naglalaman din ng 20-25% ng mga leukocytes.

Sa cytoplasm ng HCI mayroong mga fatty inclusions na may retinol, triglycerides, phospholipids, cholesterol, free fatty acids, a-actin at desmin. Ang ZKI ay nakikita gamit ang gold chloride staining. Natagpuan sa eksperimento na ang marker ng pagkita ng kaibahan ng HKI mula sa iba pang myofibroblast ay ang kanilang pagpapahayag ng protina ng reelin.

Ang mga HSC ay umiiral sa isang quiescent ("hindi aktibong HSC"), lumilipas at pangmatagalang naka-activate na estado, na ang bawat isa ay nailalarawan sa pamamagitan ng pagpapahayag ng gene at phenotype (α-IgMA, ICAM-1, chemokines at cytokines).

Ang mga HSC sa isang hindi aktibong estado ay may isang bilugan, bahagyang pinahaba o hindi regular na hugis, isang malaking nucleus at isang maliwanag na visual sign - mga pagsasama ng lipid (mga patak) na naglalaman ng retinol (Larawan 2).

Ang bilang ng mga patak ng lipid sa isang hindi aktibong HSC ay umabot sa 30 o higit pa, ang mga ito ay malapit sa laki, katabi ng bawat isa, pagpindot sa nucleus at itulak ito sa paligid (Larawan 2). Ang mga maliliit na pagsasama ay maaaring matatagpuan sa pagitan ng malalaking patak. Ang kulay ng mga patak ay depende sa fixative at ang kulay ng materyal. Sa isang kaso, ang mga ito ay magaan (Larawan 2a), sa kabilang banda ay madilim na berde (Larawan 2b).

Figure 1. Scheme ng lokasyon ng ICH (stellatecell, perisinusoidal lipocyte) sa perisinusoidal space ng Disse (space of Disse), Internet resource

Figure 2. - Mga CCI na nasa hindi aktibong estado

a - bilog na hugis HCI na may mataas na nilalaman ng mga light-colored lipid droplets (white arrow), hepatocytes (Hz) na may wasak na cytoplasm (itim na arrow); b - HCI na may maitim na mga patak ng lipid na malapit sa isang macrophage (Mf); a-b - semi-manipis na mga seksyon. Pangkulay azure II - pangunahing magenta. Micrographs. Nadagdagan 1000; c - HCI na may kasaganaan ng lipid droplets (higit sa 30), pagkakaroon ng hindi regular na hugis (magnitude 6,000); d-ultrastructural na mga bahagi ng HCI: l-lipid drops, mitochondria (orange arrow), GRES (green arrow), Golgi complex (pulang arrow), sw. 15,000; c-d - mga electronogram

Sa electron microscopy, isang mas osmiophilic marginal rim ang nabuo laban sa background ng isang light lipid substrate (Larawan 5a). Sa karamihan ng mga "nagpapahinga" na HSC, kasama ang malalaking lipid inclusions, mayroong isang kapansin-pansing maliit na halaga ng cytoplasmic matrix, mahirap sa mitochondria (Mx) at granular endoplasmic reticulum (GRES). Kasabay nito, ang mga compartment ng isang katamtamang binuo na Golgi complex ay malinaw na nakikita sa anyo ng isang stack ng 3-4 flattened cisterns na may bahagyang pinalawak na mga dulo (Larawan 2d).

Sa ilalim ng ilang mga kundisyon, ang mga aktibong HSC ay nakakakuha ng isang halo-halong o transisyonal na phenotype, na pinagsasama ang mga morphological na tampok ng parehong mga lipid na naglalaman at mga fibroblast na tulad ng mga cell (Larawan 3).

Ang transitional phenotype ng HCI ay mayroon ding sariling mga tampok na morphological. Ang cell ay nakakakuha ng isang pinahabang hugis, ang bilang ng mga lipid inclusions ay bumababa, at ang bilang ng mga nucleolemma invaginations ay bumababa. Ang dami ng cytoplasm ay tumataas, na naglalaman ng maraming GRES cisterns na may mga nakagapos na ribosome at libreng ribosome, Mx. Mayroong hyperplasia ng mga bahagi ng lamellar Golgi complex, na kinakatawan ng ilang mga stack ng 3-8 flattened cisterns, isang pagtaas sa bilang ng mga lysosome na kasangkot sa pagkasira.

Figure 3. - ZKI, na nasa isang transisyonal na estado

a - ZKI (mga puting arrow). Half cut. Pangkulay azure II - pangunahing magenta. Micrograph. Nadagdagan 1000; b - ZKI ng isang pinahabang hugis at may isang maliit na halaga ng mga patak ng lipid; uv. 8000; c - HCI na nakikipag-ugnayan sa mga selulang Kupffer (CC) at lymphocyte (Lc), SW. 6000. (Hz - hepatocyte, l - patak ng lipid, E - erythrocyte); d - mitochondria (orange na arrow), GRES (berdeng arrow), c. Goldji (pulang arrow), lysosomes (asul na arrow), magn. b, c, d - mga pattern ng electron diffraction

mga patak ng lipid (Larawan 3d). Ang hyperplasia ng mga bahagi ng GRES at ang Golgi complex ay nauugnay sa kakayahan ng mga fibroblast na mag-synthesize ng mga molekula ng collagen, pati na rin ang pag-modelo sa kanila sa pamamagitan ng post-translational hydroxylation at glycosylation sa endoplasmic reticulum at mga elemento ng Golgi complex.

Sa isang buo na atay, ang HCI, na nasa isang kalmadong estado, ay sumasakop sa sinusoidal capillary sa kanilang mga proseso. Ang mga proseso ng HCI ay nahahati sa 2 uri: perisinusoidal (subendothelial) at interhepatocellular (Larawan 4).

Ang dating ay umalis sa cell body at umaabot sa ibabaw ng sinusoidal capillary, na tinatakpan ito ng manipis na mga sanga na parang daliri. Ang mga ito ay natatakpan ng maikling villi at may katangian na mahabang microprotrusions na umaabot pa sa ibabaw ng capillary endothelial tube. Ang mga interhepatocellular outgrowth, na nagtagumpay sa plato ng mga hepatocytes at naabot ang kalapit na sinusoid, ay nahahati sa ilang mga perisinusoidal outgrowth. Kaya, ang FQI ay sumasaklaw sa average ng higit sa dalawang katabing sinusoid.

Sa pinsala sa atay, ang pag-activate ng HSC at ang proseso ng fibrogenesis ay nangyayari, kung saan ang 3 mga yugto ay nakikilala. Ang mga ito ay tinutukoy bilang pagsisimula, pagpapahaba at paglutas (resolution ng fibrous tissue). Ang prosesong ito ng pagbabago ng "nagpapahinga" na mga HSC sa fibrosing myofibroblast ay pinasimulan ng mga cytokine (^-1, ^-6,

Figure 4. - Perisinusoidal (subendothelial) at interhepatocellular na proseso (outgrowths) ng HCI

(a) ang proseso ng ZKI (dilaw na mga arrow) na umuusbong mula sa cell body, uv. 30,000; b - isang proseso ng HCI, na matatagpuan sa kahabaan ng ibabaw ng sinusoidal capillary, na naglalaman ng isang lipid drop, SW. 30,000; (c) mga subendothelially na matatagpuan na mga proseso ng HCI. Mga proseso ng endothelial cells (pink arrow); d - interhepatocellular na proseso ng HCI; lugar ng pagkasira ng mga lamad ng HCI at hepatocyte (itim na arrow), namamaga 10 000. Electronograms

TOT-a), underoxidized metabolic products, reactive oxygen species, nitric oxide, endothelin, platelet activating factor (PDGF), plasminogen activator, transforming growth factor (TGF-1), acetaldehyde, at marami pang iba. Ang mga direktang activator ay mga hepatocyte sa isang estado ng oxidative stress, Kupffer cells, endotheliocytes, leukocytes, platelets na gumagawa ng mga cytokine (paracrine signal) at ang ZKI mismo (autocrine stimulation). Ang pag-activate ay sinamahan ng pagpapahayag (pagsasama sa trabaho) ng mga bagong gene, ang synthesis ng mga cytokine at protina ng extracellular matrix (collagens I, III, Y na mga uri).

Sa yugtong ito, ang proseso ng pag-activate ng mga HSC ay maaaring makumpleto sa pamamagitan ng pagpapasigla sa pagbuo ng mga anti-namumula na cytokine sa mga HSC, na pumipigil sa paggawa ng TOT-a ng mga macrophage sa nasirang lugar. Bilang isang resulta, ang bilang ng mga HSC ay nabawasan nang husto, sumasailalim sila sa apoptosis, at ang mga proseso ng fibrosis sa atay ay hindi bubuo.

Sa pangalawang yugto (matagal), na may matagal na pare-parehong paracrine at autocrine na pagkakalantad sa pag-activate ng stimuli, ang isang activated phenotype ay "pinananatili" sa HSC, na nailalarawan sa pamamagitan ng pagbabagong-anyo ng HSC sa mga contractile na myofibroblast na tulad ng mga cell na synthesize ang extracellular fibrillar collagen.

Ang activated phenotype ay nailalarawan sa pamamagitan ng paglaganap, chemotaxis, contractility, pagkawala ng retinoid stores, at pagbuo ng mga cell na kahawig ng myofibroblastic cells. Ang mga aktibong HSC ay nagpapakita rin ng mas mataas na antas ng mga bagong gene tulad ng a-SMA, ICAM-1, chemokines at cytokine. Ang pag-activate ng cell ay nagpapahiwatig ng simula ng isang maagang yugto ng fibrogenesis at nauuna ang pagtaas ng produksyon ng mga protina ng ECM. Ang mga nagresultang fibrous tissues ay sumasailalim sa remodeling dahil sa matrix cleavage sa tulong ng matrix metalloproteinases (matrixmetaloproteinases - MMPs). Sa turn, ang matrix breakdown ay kinokontrol ng tissue inhibitors ng MMPs (tissue inhibitors ng matrix metaloproteinases - TIMPs). Ang mga MMP at TIMP ay mga miyembro ng pamilya ng zinc dependent enzyme. Ang mga MMP ay na-synthesize sa mga HSC bilang mga hindi aktibong proenzyme na naisaaktibo sa propeptide cleavage ngunit nahahadlangan sa pakikipag-ugnayan sa mga endogenous na TIMP, TIMPs-1 at TIMPs-2. Ang mga HSC ay gumagawa ng 4 na uri ng mga MMP na uri ng lamad na ina-activate ng IL-1 p. Sa mga MMP, MMPs-9, isang neutral na matrix metalloproteinase, ay partikular na kahalagahan, na may aktibidad laban sa type 4 na collagen, na bahagi ng basement membrane, gayundin laban sa bahagyang denatured type 1 at 5 collagen.

Ang pagtaas sa populasyon ng HCI sa iba't ibang uri ng pinsala sa atay ay hinuhusgahan ng aktibidad ng isang makabuluhang bilang ng mga mitogenic na kadahilanan, mga kaugnay na tyrosine kinase receptor at iba pang natukoy na mitogens na nagiging sanhi ng pinaka-binibigkas na paglaganap ng HKI: endothelin-1, thrombin, FGF - fibroblast growth factor, PDGF - endothelial growth factor vessels, IGF - insulin-like growth factor. Ang akumulasyon ng mga HSC sa mga lugar ng pinsala sa atay ay nangyayari hindi lamang dahil sa paglaganap ng mga cell na ito, kundi dahil din sa kanilang direktang paglipat sa mga zone na ito sa pamamagitan ng chemotaxis, kasama ang pakikilahok ng mga chemoattractant tulad ng PDGF at leukocyte chemoattractant-MCP (monocyte chemotactic protein- 1) .

Sa mga aktibong HSC, ang bilang ng mga patak ng lipid ay nabawasan sa 1-3 kasama ang kanilang lokasyon sa kabaligtaran ng mga poste ng cell (Larawan 5).

Ang mga aktibong HSC ay nakakakuha ng isang pinahabang hugis, ang mga makabuluhang lugar ng cytoplasm ay inookupahan ng Golgi complex, at medyo maraming mga GRES cisterns (isang tagapagpahiwatig ng synthesis ng protina para sa pag-export) ay ipinahayag. Ang bilang ng iba pang mga organelles ay nabawasan: ilang mga libreng ribosome at polysomes, solong mitochondria, at hindi regular na lysosomes ay matatagpuan (Larawan 6).

Noong 2007, ang mga HSC ay unang pinangalanang liver stem cells, dahil ipinapahayag nila ang isa sa mga marker ng hematopoietic mesenchymal stem cells, CD133.

Figure 5. - Ang mga CCI ay nasa activated state

a, b - HCI (asul na mga arrow) na may mga solong pagsasama ng lipid na naisalokal sa magkabilang poste ng nucleus. Ang perisinusoidal connective tissue (Fig. 6a) at ang intercellular matrix layer sa paligid ng hepatocyte (Fig. 6b) ay nabahiran ng pula. Cytotoxic lymphocytes (purple arrow). Endothelial cell (puting arrow). Malapit na kontak sa pagitan ng isang plasma cell (pulang arrow) at isang hepatocyte. Mga semi-manipis na hiwa. Pangkulay azure II - pangunahing magenta. Micrographs. Nadagdagan 1000 ; c, d - ultrastructural na mga bahagi ng HCI: mitochondria (orange arrow), Golgi complex (pulang arrow), cisternae ng mas osmiophilic cis-side nito na nakaharap sa mga pinahabang elemento ng granular endoplasmic reticulum (berdeng mga arrow), lysosome (asul na arrow) (magn 10,000 at 20,000, ayon sa pagkakabanggit); c, d - mga pattern ng diffraction ng elektron

Ang mga myofibroblast, na wala sa normal na atay, ay may tatlong potensyal na mapagkukunan: una, sa panahon ng intrauterine development ng atay, sa mga portal tract, ang mga myofibroblast ay pumapalibot sa mga vessel at bile ducts sa panahon ng kanilang pagkahinog, at pagkatapos ng buong pag-unlad ng atay, nawala sila. at pinapalitan sa mga portal tract ng mga portal fibroblast; ang pangalawa - na may pinsala sa atay, sila ay nabuo dahil sa portal mesenchymal cells at resting HSCs, mas madalas dahil sa transitional epithelial-mesenchymal cells. Ang mga ito ay nailalarawan sa pamamagitan ng pagkakaroon ng CD45-, CD34-, Desmin+, glial fibrillar protein na nauugnay sa (GFAP)+ at Thy-1+.

Ipinakita ng mga kamakailang pag-aaral na ang mga hepatocytes, cholangiocytes, at endothelial cells ay maaaring maging myofibroblast sa pamamagitan ng epithelial o endothelial-to-mesenchymal transition (EMT). Kasama sa mga cell na ito ang mga marker gaya ng CD45-, albumin+ (ibig sabihin hepatocytes), CD45-, CK19+ (ie cholangiocytes) o Tie-2+ (endothelial cells).

Figure 6. - Mataas na fibrotic activity ng HSC

a, b - myofibroblast (Mfb), ang cell ay naglalaman ng isang malaking nucleus, mga elemento ng GRES (mga pulang arrow), maraming libreng ribosome, polymorphic vesicles at granules, solong mitochondria at isang maliwanag na visualization sign - isang bundle ng actin filament sa cytoplasm (dilaw mga arrow); inakay palayo. 12,000 at 40,000; c, d, e, f - mataas na fibrotic na aktibidad ng HSC na may pagpapanatili ng mga retinoid-containing lipid droplets sa cytoplasm. Maraming mga bundle ng collagen fibrils (white arrow) ang napanatili (a) at nawala (d, e, f) partikular na transverse striation; inakay palayo. 25,000, 15,000, 8,000, 15,000. Electronograms

Bilang karagdagan, ang mga selula ng utak ng buto, na binubuo ng mga fibrocytes at nagpapalipat-lipat na mga selulang mesenchymal, ay maaaring magbago sa mga myofibroblast. Ito ay ang CD45+ (fibrocytes), CD45+/- (circulating mesenchymal cells), collagen type 1+, CD11d+ at MHC class 11+ (Figure 7).

Kinumpirma ng data ng literatura hindi lamang ang malapit na kaugnayan sa pagitan ng paglaganap ng mga oval na selula at ng paglaganap ng mga sinusoidal na selula, kundi pati na rin ang data sa posibleng pagkita ng kaibhan ng HSC sa hepatic epithelium, na tinatawag na mesenchymal-epithelial transformation ng perisinusoidal cells.

Sa estado ng fibrogenic activation, ang myofibroblast-like HSCs, kasama ang pagbaba sa bilang at kasunod na pagkawala ng lipid droplets, ay nailalarawan sa pamamagitan ng focal proliferation (Figure 8), immunohistochemical expression ng fibroblast-like marker, kabilang ang makinis na kalamnan na α-actin. , at ang pagbuo ng pericellular collagen fibrils sa mga puwang ng Disse.

Sa yugto ng pag-unlad ng fibrosis, ang pagtaas ng hypoxia ng tissue ng atay ay nagiging isang kadahilanan ng karagdagang overexpression sa mga stem cell ng pro-inflammatory adhesion molecule - 1CAM-1, 1CAM-2, VEGF, pro-inflammatory

Pakikipag-ugnayan ng ductal hepatic progenitor cells na may liver myofibroblasts

Mga HSC na tulad ng Myofibroblast sa isang estado ng fibrogenic activation.

Figure 7. - Mga kalahok ng myofibroblastic activation ng HSC

makapangyarihang chemoattractants - M-CSF, MCP-1 (monocyte chemotactic protein-1) at SGS (cytokine-mediated neutrophil chemoattractant) at iba pa na nagpapasigla sa pagbuo ng mga pro-inflammatory cytokine (TGF-b, PDGF, FGF, PAF, SCF, ET-1 ) at mapahusay ang mga proseso ng fibrogenesis sa atay, na lumilikha ng mga kondisyon para sa self-sustained induction ng patuloy na pag-activate ng HSC at mga proseso ng fibrogenesis.

Sa mga mikroskopikong paghahanda, ang pericapillary fibrosis ay nagpapakita ng sarili sa anyo ng matinding pangkulay ng perisinusoidal connective tissue at ang intercellular matrix layer sa paligid ng mga hepatocytes (madalas na namamatay) sa pula. Sa mga paghahandang mikroskopiko ng elektron, ang mga pagbabago sa fibrotic ay makikita sa anyo ng mga nabuong malalaking bundle ng fibrils ng mga collagen fibers na nagpapanatili ng transverse striation, o sa anyo ng isang napakalaking

mga deposito sa espasyo ng Disse fibrous mass, na namamaga na mga hibla ng collagen na nawala ang kanilang panaka-nakang striation (Larawan 9).

Ayon sa mga modernong konsepto, ang fibrosis ay isang dinamikong proseso na maaaring umunlad at bumagsak (Larawan 10).

Kamakailan lamang, ilang partikular na marker ng ICD ang iminungkahi: ang bitamina A (VA) ay namumulaklak sa mga patak ng lipid, GFAP, ang p75 NGF receptor, at synaptophysin. Ang mga pag-aaral ay isinasagawa sa paglahok ng liver HCI sa paglaganap at pagkita ng kaibahan ng mga liver stem cell.

Pinag-aralan namin ang nilalaman ng retinol-binding protein (RBP-4), na bumubuo ng isang kumplikadong may VA, ang konsentrasyon kung saan sa plasma ng dugo ay karaniwang nauugnay sa pagkakaloob ng katawan na may VA, 80% nito ay nasa HCI .

Ang kaugnayan sa pagitan ng nilalaman

Figure 8. - Focal proliferation ng HSC sa estado ng fibrogenic activation

a - HCI hyperplasia (mga puting arrow) sa lumen ng dilat na sinusoids; b - paglaganap ng transdifferentiated HSCs (white arrow), endothelial cell (pink arrow). Mga semi-manipis na hiwa. Pangkulay azure II - pangunahing magenta. Micrographs. Nadagdagan 1000

Figure 9. - Ang huling yugto ng myofibroblastic activation ng HSC

a, b - perisinusoidal fibrosis (mga puting arrow). Ang peri-sinusoidal connective tissue at ang intercellular matrix layer sa paligid ng hepatocytes (b) ay nabahiran ng pula ng basic fuchsin. Ang mga HSC ay aktibo at nabago sa mga fibroblast (asul na mga arrow). Hz sa fig. a - hepatocyte na may nawasak na cytoplasm. Mga semi-manipis na hiwa. Pangkulay azure II - pangunahing magenta. Micrographs. Nadagdagan 1000; c, d - perisinusoidal at perihepatocellular fibrosis sa lobule ng atay, nadagdagan ang density ng electron ng collagen fiber fibrils; condensation ng mitochondrial matrix sa hepatocyte (orange na arrow). Boost 8,000 at 15,000, ayon sa pagkakabanggit. electronograms

Talahanayan 1. Mga tagapagpahiwatig ng nilalaman ng RBP-4 sa mga pasyenteng may liver cirrhosis (LC) at talamak na hepatitis (CH) ng iba't ibang etiologies, ng/ml (M±m)

Pangkat n M±m p

Cirrhosis ng atay 17 23.6±2.29<0,05

CG, AsAT norm 16 36.9±2.05* >0.05

CG, ASAT >2 pamantayan 13 33.0±3.04* >0.05

CG, ALT norm 13 37.5±3.02* >0.05

CG, ALT >2 norms 21 35.9±2.25* >0.05

Kontrol 15 31.2±2.82

Tandaan: p - makabuluhang pagkakaiba sa kontrol (p<0,05); * - достоверные различия между ЦП и ХГ (р<0,05)

False lobule na napapalibutan ng fibrous septum na may fibrous septum. Pangkulay ayon kay Masso - isang bilog ng isang maling lobule. Pangkulay ayon sa u.Uv.x50 Masson. Dagdagan ang x200

Figure 10 - Dynamics ng mga kaganapan sa false lobule ng isang pasyente na may viral cirrhosis 6 na buwan pagkatapos ng paglipat ng mga autologous mesenchymal stem cell sa atay

Kumakain ako ng RBP-4 at stage 4 fibrosis (cirrhosis), sa kaibahan sa talamak na hepatitis, kung saan hindi naobserbahan ang gayong pag-asa, anuman ang mga biochemical marker ng aktibidad ng pamamaga sa atay.

Ang katotohanang ito ay dapat isaalang-alang kapag nagpapatunay ng kapalit na therapy upang maalis ang kakulangan sa VA sa katawan, na maaaring dahil sa pag-ubos ng potensyal ng HSC dahil sa pag-unlad ng fibrosis sa atay.

1. Ang pinakamataas na bisa ng pagtatasa ng istruktura at functional na estado ng HCI ay sinisiguro ng isang morphological na pag-aaral ng isang intravital biopsy specimen na may sabay-sabay na paggamit ng isang kumplikadong mga diskarte sa visualization ng cell (light, electron microscopy ng mga ultrathin section at orihinal na pamamaraan ng pag-aayos at paglamlam).

2. Ang mga resulta ng morphological study ng HCI ay nagbibigay-daan upang mapabuti ang kalidad ng in vivo diagnosis ng fibrosis, upang masubaybayan ito at mahulaan ang mga kinalabasan ng talamak na nagkakalat na mga sugat sa atay sa isang mas mataas na modernong antas.

3. Ang mga resulta ng morphological na konklusyon ay magbibigay-daan sa clinician na magdagdag ng pinong data sa yugto ng chronicity (pagpapanatag, pag-unlad o paglutas ng fibrosis) sa kurso ng therapy sa pagbabalangkas ng panghuling pagsusuri.

Panitikan

1. Ivashkin, V. T. Mga klinikal na sintomas ng pre-fibrotic na pagbabago: isang transcript ng lecture ng All-Russian Internet Congress of Internal Medicine Specialists / V. T. Ivashkin, A. O. Bueverov // INTERNIST: National Internet Society of Internal Medicine Specialists. - 2013. - Access mode: http://internist. ru/publications/detail/6569/. - Petsa ng pag-access: 21.11.2016.

2. Kiyasov, A.P. Oval cells - putative liver stem cells o hepatoblasts? / A. P. Kiyasov, A. A. Gumerova, M. A. Titova // Cell transplantology at tissue engineering. - 2006. - V. 2, No. 4. - S. 55-58.

. : Rezhipa 20 do13. - //internist.ru/publications/detail/6569/ - Na-access ang data: 11/21/2016.

2. Kiyasov, A. P. Oval "nye kletki - predpolagaemye stvolovye kletki pecheni o gepatoblasty? / A. P. Kiyasov, A. A. Gumerova, M. A. Titova // Kletochnaya transplantologiya i tkanevaya inzheneriya. - 2006. - No. T.4. - 58.

3. Sa papel na ginagampanan ng sinusoidal liver cells at bone marrow cells sa pagbibigay ng regenerative na diskarte para sa isang malusog at nasirang atay / A. V. Lundup [et al.] // Bulletin ng transplantology at mga artipisyal na organo. -2010. - T. XII, No. 1. - S. 78-85.

4. Serov, V. V. Morphological na pamantayan para sa pagtatasa ng etiology, antas ng aktibidad at yugto ng proseso sa viral chronic hepatitis B at C / V. V. Serov, L. O. Severgina // Archives of Pathology. - 1996. - Bilang 4. - S. 61-64.

5. Structural at functional na mga katangian ng liver stellate cells sa dynamics ng fibrosis / OA Postnikova [et al.] // Pangunahing pananaliksik. - 2011. - No. 10.

6. Ultrastructural at immunohistochemical na pag-aaral ng atay stellate cells sa dynamics ng fibrosis at cirrhosis ng infectious-viral genesis / G. I. Nepomnyashchikh [et al.] // Bulletin ng experimental biology at medicine. - 2006. - T. 142, No. 12. - S. 681-686.

7. Shcheglev, AI Structural at metabolic na mga katangian ng sinusoidal liver cells / AI Shcheglev, OD Mishnev // Mga tagumpay ng modernong biology. - 1991. - V. 3, No. 1. - S. 73-82.

10. Mga epekto ng dietary retinoid at triglyceride sa lipid composition ng rat liver stellate cells at stellate cell lipid droplets / H. Moriwaki // J. Lipid. Res. - 1988. - Vol. 29. - R. 1523-1534.

13. Friedman, S. Hepatic fibrosis 2006: Ulat ng Ikatlong AASLD Single Topic Conference / S. Friedman, D. Rockey, B. Montgomery // Hepatology. - 2006. - Vol. 45(1). - R. 242-249.

18. Iredale, J. P. Hepatic Stellate Cell Behavior Sa panahon ng Resolution of Liver Injury / J. P. Iredale // Semin. LiverDis. -2001. - Vol. 21(3). - R. 427-436.

19. Kobold, D. Pagpapahayag ng reelin sa hepatic stellate cells at sa panahon ng pag-aayos ng hepatic tissue: isang nobelang marker para sa pagkita ng kaibahan ng HSC mula sa iba pang myofibroblast sa atay / D. Kobold // J. Hepatol. - 2002. - Vol. 36(5). - R. 607-613.

20. Lepreux, S. Mga myofibroblast sa atay ng tao sa panahon ng pag-unlad at mga sakit na may pagtuon sa portal (myo)

3. O roli sinusoidal "nyh kletok pecheni at kletok kostnogo mozga v obespechenii regeneratornoj strategii zdorovoj i povrezhdennoj pecheni / A. V. Lyundup // Vestnik transplantologii at iskusstvennyh organov. - 2010.. - T. 7 -8 S. .

4. Serov, V. V. Morfologicheskie kriterii ocenki ehtiologii, stepeni aktivnosti at stadii processa pri virusnyh chrononicheskih gepatitah V i S / V. V. Serov, L. O. Severgina // Arhiv patologii.

1996. - Bilang 4. - S. 61-64.

5. Strukturno-funkcional "naya harakteristika zvezdchatyh kletok pecheni v dinamike fibroza / O. A. Postnikova // Fundamental" nye issledovaniya. - 2011. - Hindi. 10. - C. 359-362.

6. Ul "trastrukturnoe i immunogistohimicheskoe issledovanie zvezdchatyh kletok pecheni v dinamike fibroza at cirroza pecheni infekcionno-virusnogo geneza / G. I. Nepomnyashchih // Byulleten" ehksperimental "nojologii i mediciny. - 20.8 at mediciny. - 201. 686.

7. SHCHeglev, A. I. Strukturno-metabolicheskaya harakteristika sinusoidal "nyh kletok pecheni / A. I. SHCHeglev, O. D. Mishnev // Uspekhi sovremennoj biologii. - 1991. - T. 3, No. 1. - S. 73-82

8. Ang CD34 hepatic stellate cells ay mga progenitor cells / C. Kordes // Biochem., Biophys. Res. Karaniwan. - 2007. -Vol. 352(2). - P. 410-417.

9. Pagkasira ng mga protina ng matrix sa fibrosis ng atay / M. J. Arthur // Pathol. Res. Magsanay. - 1994. - Vol. 190(9-10).

10. Mga epekto ng dietary retinoid at triglyceride sa lipid composition ng rat liver stellate cells at stellate cell lipid droplets / H. Moriwaki // J. Lipid. Res. - 1988. - Vol. 29. - R. 1523-1534.

11. Ang fetal liver ay binubuo ng mga selula sa epithelial-to-mesenchymal transition / J. Chagraoni // Dugo. - 2003. - Vol. 101. - P. 2973-2982.

12. Fixation, dehydration at pag-embed ng biological specimens / A. M. Glauert // Mga Praktikal na Paraan sa Electron Microscopy. - New York: Am. Elsevier, 1975. - Vol. 3, bahagi 1.

13. Friedman, S. Hepatic fibrosis 2006: Ulat ng Ikatlong AASLD Single Topic Conference / S. Friedman, D. Rockey, B. Montgomery // Hepatology. - 2006. - Vol. 45(1). - R. 242-249.

14. Gaga, M. D. Ang mga human at rathepatic stellate cells ay gumagawa ng stem cell factor: isang posibleng mekanismo para sa mast cell recruitment sa liver fibrosis / M. D. Gaga // J. Hepatol. - 1999. - Vol. 30, No. 5. - P. 850-858.

15. Glauert, A. M. Araldite bilang medium ng pag-embed para sa electron microscopy / A. M. Glauert, R. H. Glauert // J. Biophys. Biochem. Cytol. - 1958. - Vol. 4. - P. 409-414.

16. Ang mga hepatic stellate cells at portal fibroblast ay ang mga pangunahing cellular source ng collagens at lysyl oxidases sa normal na atay at maaga pagkatapos ng pinsala / M. Perepelyuk // Am. J Physiol. gastrointest. Physiol ng Atay. - 2013. - Vol. 304(6). - P. 605614.

17. Hepatitis C virus core at nonstructural proteins induce fibrogenic effects in hepatic stellate cells / R. Bataller // Gastroenterology. - 2004. - Vol. 126, ay. 2. - P. 529-540.

18. Iredale, J. P. Hepatic Stellate Cell Behavior Sa panahon ng Resolution of Liver Injury / J. P. Iredale // Semin. LiverDis. -2001. - Vol. 21(3). - R. 427-436.

19. Kobold, D. Pagpapahayag ng reelin sa hepatic stellate cells at sa panahon ng pag-aayos ng hepatic tissue: isang nobelang marker para sa pagkita ng kaibahan ng HSC mula sa iba pang myofibroblast sa atay / D. Kobold // J. Hepatol. - 2002. - Vol. 36(5). - R. 607-613.

20. Lepreux, S. Mga myofibroblast sa atay ng tao sa panahon ng pag-unlad at mga sakit na may pagtuon sa mga portal (myo) fibroblast / S. Lepreux, A. Desmouliére

fibroblasts / S. Lepreux, A. Desmoulière // Harap. physiol. - 2015. - Mode ng pag-access: http://dx.doi. org/10.3389/fphys.2015.00173. - Petsa ng pag-access: 31.10.2016.

22. Mesenchymal Bone Marrow-derived Stem Cells Transplantation sa mga Pasyenteng may HCV Related Liver Cirrhosis / S. Lukashyk // J. Clin. Transl. Hepatol. - 2014. - Vol. 2, ay. 4. - P. 217-221.

23. Millonig, G. A. Mga kalamangan ng isang phosphate buffer para sa mga solusyon sa osmium tetroxide sa pag-aayos / G. A. Millonig // J. Appl. Physics. - 1961. - Vol. 32. - P. 1637-1643.

Vol. 158. - P. 1313-1323.

Vol. 24. - P. 205-224.

29. Querner, F. Der mikroskopische Nachweis ng Vitamin Aimanimalen Gewebe. Zur Kenntnis der paraplasmatischen Leberzellen-einschlüsse. Dritte Mitteilung / F. Querner // Klin. Wschr. - 1935. - Vol. 14. - P. 1213-1217.

30. Kamakailang mga pag-unlad sa myofibroblast biology: paradigms para sa connective tissue remodeling / B. Hinz // Am. J. Pathol. - 2012. - Vol. 180. - P. 1340-1355.

35. Ang Septum transversum-derived mesothelium ay nagdudulot ng hepatic stellate cells at perivascular mesenchymal cells sa pagbuo ng mouse liver / K. Asahina // Hepatology. -2011. - Vol. 53.-P. 983-995.

Vol. 50.-P. 66-71.

38. Thabut, D. Intrahepatic angiogenesis at sinusoidal remodeling sa talamak na sakit sa atay: mga bagong target para sa paggamot ng portal hypertension? / D. Thabut, V. Shah // J. Hepatol. - 2010. - Vol. 53. - P. 976-980.

39. Wake, K. Hepatic stellate cells: Three-dimensional na istraktura, localization, heterogeneity at development / K.

// harap. physiol. - 2015. - Mode ng pag-access: http://dx.doi. org/10.3389/fphys.2015.00173. - Petsa ng pag-access: 31.10.2016.

21. Ligands ng peroxisome proliferator-activated receptor gamma mod-ulateprofibrogenic at proinflammatory actions sa hepatic stellate cells / F. Marra // Gastroenterology. -2000. - Vol. 119. - P. 466-478.

22. Mesenchymal Bone Marrow-derived Stem Cells Transplantation sa mga Pasyenteng may HCV Related Liver Cirrhosis / S. Lukashyk // J. Clin. Transl. Hepatol. - 2014. - Vol. 2, ay. 4.-R. 217-221.

23. Millonig, G. A. Mga kalamangan ng isang phosphate buffer para sa mga solusyon sa osmium tetroxide sa pag-aayos / G. A. Millonig // J. Appl. Rhysics. - 1961. - Vol. 32. - P. 1637-1643.

24. Pinagmulan at structural evolution ng maagang proliferating oval cells sa atay ng daga / S. Paku // Am. J. Hepatol. - 2001.

Vol. 158. - P. 1313-1323.

25. Pinagmulan ng myofibroblast sa liver fibrosis / D. A. Brenner // Pag-aayos ng Tissue ng Fibrogenesis. - 2012. - Vol. 5 suppl. 1. - S. 17.

26. Mga pinagmulan at pag-andar ng myofibroblast sa atay / S. Lemoinne // Biochim. Biophys. acta. - 2013. - Vol. 1832(7). - P. 948-954.

27. Pinzani, M. PDGF at signal transduction sa hepatic stellate cells / M. Pinzani // Front. biosci. - 2002. - Vol. 7. - P. 1720-1726.

28. Popper, H. Pamamahagi ng bitamina A sa tissue gaya ng ipinahayag ng fluorescence microscopy / H. Popper // Physiol. Sinabi ni Rev. - 1944.

Vol. 24.-R. 205-224.

29. Querner, F. Der mikroskopische Nachweis ng Vitamin Aimanimalen Gewebe. Zur Kenntnis der paraplasmatischen Leberzellen-einschlüsse. Dritte Mitteilung / F. Querner // Klin. Wschr. - 1935. - Vol. 14. - R. 1213-1217.

30. Kamakailang mga pag-unlad sa myofibroblast biology: paradigms para sa connective tissue remodeling / B. Hinz // Am. J. Pathol. - 2012. - Vol. 180. - R. 1340-1355.

31. Reynolds, E. S. Ang paggamit ng lead citrate sa mataas na pH bilang electronopaque stain sa electron microscopy / E. S. Reynolds // J. Cell. Biol. - 1963. - Vol. 17. - P. 208-212.

32. Safadi, R. Immune stimulation ng hepatic fibrogenesis ng CD8 cells at attenuation ng transgenic interleukin-10 mula sa hepatocytes / R. Safadi // Gastroenterology. - 2004. - Vol. 127(3). - P. 870-882.

33. Sato, T. Isang electron microscopic na pag-aaral ng specimen-fixed para sa mas mahabang panahon sa phosphate buffered formalin / T. Sato, I. Takagi // J. Electron Microsc. - 1982. - Vol. 31, No. 4. - P. 423-428.

34. Senoo, H. Vitamin A-Storing Cells (Stellate Cells) / H. Senoo, N. Kojima, M. Sato // Vitam. Horm. - 2007. - Vol. 75.

35. Ang Septum transversum-derived mesothelium ay nagdudulot ng hepatic stellate cells at perivascular mesenchymal cells sa pagbuo ng mouse liver / K. Asahina // Hepatology. -2011. - Vol. 53.-R. 983-995.

36. Stanciu, A. Bagong data tungkol sa mga cell ng ITO / A. Stanciu, C. Cotutiu, C. Amalinei, Rev. Med. Chir. soc. Med. Nat. Iasi. -2002. - Vol. 107, No. 2. - P. 235-239.

37. Suematsu, M. Propesor Toshio Ito: isang clairvoyant sa pericyte biology / M. Suematsu, S. Aiso // Keio J. Med. - 2000.

Vol. 50.-R. 66-71.

38. Thabut, D. Intrahepatic angiogenesis at sinusoidal remodeling sa talamak na sakit sa atay: mga bagong target para sa paggamot ng portal hypertension? / D. Thabut, V. Shah // J. Hepatol. - 2010. - Vol. 53.-R. 976-980.

39. Wake, K. Hepatic stellate cells: Three-dimensional na istraktura, localization, heterogeneity at development / K. Wake // Proc. Jpn. Acad. Ser. B, Phys. Biol. sci. - 2006. - Vol.

Gumising // Proc. Jpn. Acad. Ser. B, Phys. Biol. sci. - 2006. - Vol. 82(4). - P. 155-164.

82(4). - P. 155-164.

40. Wake, K. In Cells of the Hepatic Sinusoid / K. Wake, H. Senoo // Kupffer Cell Foundation (Rijswijk, The Netherlands). - 1986. - Vol. 1. - P. 215-220.

41. Watson, M. L. Paglamlam ng mga seksyon ng tissue para sa electron micro na may mabibigat na metal / M. L. Watson // J. Biophys. Biochem. Cyt. - 1958. - Vol. 4. - P. 475-478.

CLINICAL CYTOLOGY NG Atay: ITO STELLATE CELLS (HEPATIC STELLATE CELLS)

Tsyrkunov V. M, Andreev V. P., Kravchuk R. I., Kandratovich I. A. Educational Establishment "Grodno State Medical University", Grodno, Belarus

pagpapakilala. Ang papel na ginagampanan ng Ito stellate cells (Hepatic Stellate Cells, HSC) ay nakilala bilang isa sa nangunguna sa pagbuo ng fibrosis ng atay, ngunit ang paggamit ng intravital visualization ng mga istruktura ng HSC sa klinikal na kasanayan ay minimal.

Ang layunin ng gawain ay upang ipakita ang istruktura at functional na katangian ng HSC batay sa mga natuklasan ng cytological identification ng intravital liver biopsy sample.

materyales at pamamaraan. Ang mga klasikal na pamamaraan ng light at electron microscopy ng mga sample ng biopsy sa loob ng orihinal na pamamaraan ng paggamit ng mga ultrathin na seksyon, pag-aayos at paglamlam ay inilapat.

resulta. Ang mga istrukturang katangian ng HSC ng mga sample ng biopsy sa atay mula sa mga pasyente na may talamak na hepatitis C ay ipinakita sa mga larawang ilustrasyon ng light at electron microscopy. Ang mga HSC ay inilalarawan sa iba't ibang yugto (pahinga, pag-activate) at sa panahon ng proseso ng pagbabago sa myofibroblast.

Mga konklusyon. Ang paggamit ng mga orihinal na pamamaraan ng clinical at morphological identification at pagsusuri ng functional status ng HSC ay nagbibigay-daan upang mapabuti ang kalidad ng diagnosis at pagbabala ng fibrosis ng atay.

Genes at Cells: Volume V, No. 1, 2010, pahina: 33-40

Ang mga may-akda

Gumerova A.A., Kiyasov A.P.

Ang regenerative na gamot ay isa sa pinakamabilis na pag-unlad at promising na mga lugar ng medisina, na batay sa panimulang bagong diskarte sa pagpapanumbalik ng isang nasirang organ sa pamamagitan ng pagpapasigla at (o) paggamit ng mga stem (progenitor) cells upang mapabilis ang pagbabagong-buhay. Upang maisagawa ang pamamaraang ito, kailangang malaman kung ano ang mga stem cell, at sa partikular na mga regional stem cell, kung ano ang kanilang phenotype at potency. Para sa ilang mga tisyu at organo, tulad ng epidermis at skeletal muscle, natukoy na ang mga stem cell at inilarawan ang kanilang mga niches. Gayunpaman, ang atay, isang organ na ang mga kakayahan sa pagbabagong-buhay ay kilala mula noong sinaunang panahon, ay hindi pa nagsiwalat ng pangunahing lihim nito - ang sikreto ng stem cell. Sa pagsusuri na ito, batay sa aming sariling data at panitikan, tinatalakay namin ang hypothesis na iniharap na ang mga perisinusoidal stellate cells ay maaaring mag-claim ng papel ng isang liver stem cell.

Ang mga perisinusoidal liver cells (Ito cells, stellate cells, lipocytes, fat-storing cells, vitamin-A-storing cells) ay isa sa mga pinaka mahiwagang uri ng cell ng atay. Ang kasaysayan ng pag-aaral ng mga cell na ito ay nagsimula nang higit sa 130 taon, at marami pa ring mga katanungan tungkol sa kanilang phenotype at mga function kaysa sa mga sagot. Ang mga selula ay inilarawan noong 1876 ni Kupffer, pinangalanan niya ang mga stellate cell at itinalaga sa mga macrophage. Nang maglaon, ang totoong sedentary liver macrophage ay tumanggap ng pangalan ng Kupffer.

Karaniwang tinatanggap na ang mga cell ng Ito ay matatagpuan sa espasyo ng Disse sa direktang pakikipag-ugnay sa mga hepatocytes, nag-iipon ng bitamina A at may kakayahang gumawa ng mga macromolecule ng intercellular substance, at gayundin, sa pagkakaroon ng aktibidad ng contractile, kinokontrol ang daloy ng dugo sa sinusoidal capillaries tulad ng pericytes. Ang pamantayang ginto para sa pagkilala sa mga selula ng Ito sa mga hayop ay ang pagkakakilanlan ng cytoskeletal intermediate filament protein sa kanila, katangian ng tissue ng kalamnan - desmin. Ang iba pang medyo karaniwang mga marker ng mga cell na ito ay mga marker ng neuronal differentiation - acid glial fibrillary protein (Glial fibrillary acid protein, GFAP) at nestin.

Sa loob ng maraming taon, ang mga selulang Ito ay isinasaalang-alang lamang mula sa pananaw ng kanilang pakikilahok sa pagbuo ng fibrosis at cirrhosis ng atay. Ito ay dahil sa ang katunayan na kapag ang atay ay nasira, ang mga cell na ito ay palaging nagiging aktibo, na binubuo sa mas mataas na pagpapahayag ng desmin, paglaganap at transdifferentiation sa myofibroblasts-tulad ng pagbabagong-anyo ng cell na nagpapahayag --smooth muscle actin (--GMA) at synthesizing makabuluhang dami ng intercellular substance, sa partikular na type I collagen. Ito ay ang aktibidad ng naturang mga naka-activate na mga selulang Ito na, ayon sa maraming mga mananaliksik, ay humahantong sa pag-unlad ng fibrosis at cirrhosis ng atay.

Sa kabilang banda, ang mga katotohanan ay unti-unting naipon na nagpapahintulot sa isa na tingnan ang mga selulang Ito mula sa ganap na hindi inaasahang mga posisyon, ibig sabihin, bilang pinakamahalagang bahagi ng microenvironment para sa pagbuo ng mga hepatocytes, cholangiocytes at mga selula ng dugo sa panahon ng hepatic stage ng hematopoiesis, at , bukod dito, hangga't maaari stem ( progenitor) liver cells. Ang layunin ng pagsusuri na ito ay pag-aralan ang kasalukuyang data at mga pananaw sa kalikasan at functional na kahalagahan ng mga cell na ito na may pagtatasa ng posibleng pag-aari ng mga ito sa populasyon ng mga liver stem (progenitor) cells.

Ang mga cell na ito ay isang mahalagang kalahok sa pagbawi ng parenkayma sa panahon ng pagbabagong-buhay ng atay dahil sa mga macromolecule ng extracellular matrix na ginawa ng mga ito at ang remodeling nito, pati na rin ang produksyon ng mga kadahilanan ng paglago. Ang mga unang pagdududa tungkol sa bisa ng itinatag na teorya, na isinasaalang-alang ang mga selulang Ito na eksklusibo bilang pangunahing mga salarin ng fibrosis ng atay, ay lumitaw nang natagpuan na ang mga selulang ito ay gumagawa ng isang makabuluhang bilang ng mga morphogenic na cytokine. Kabilang sa mga ito, ang isang makabuluhang grupo ay binubuo ng mga cytokine, na mga potensyal na mitogens para sa mga hepatocytes.

Ang pinakamahalaga sa pangkat na ito ay hepatocyte growth factor - hepatocyte mitogen, kinakailangan para sa paglaganap ng cell, kaligtasan ng buhay at motility (kilala rin ito bilang scattering factor - scatter factor. Isang depekto sa growth factor na ito at (o) sa C-met receptor nito sa mga daga ay humahantong sa hypoplasia ng atay at pagkasira ng parenkayma nito bilang resulta ng pagsugpo sa paglaganap ng hepatoblast, pagtaas ng apoptosis at hindi sapat na pagdirikit ng cell.

Bilang karagdagan sa hepatocyte growth factor, ang mga Ito ay gumagawa ng stem cell factor. Ito ay ipinakita sa isang modelo ng pagbabagong-buhay ng atay pagkatapos ng bahagyang hepatectomy at pagkakalantad sa 2-acetoaminofluorene. Napag-alaman din na ang mga cell ng Ito ay nagtatago ng transforming growth factor-- at epidermal growth factor, na gumaganap ng isang mahalagang papel kapwa sa paglaganap ng mga hepatocytes sa panahon ng pagbabagong-buhay at pasiglahin ang mitosis ng mga selulang Ito mismo. Ang paglaganap ng mga hepatocytes ay na-trigger din ng mesenchymal morphogenic protein epimorphin na ipinahayag ng Ito cells, na lumilitaw sa kanila pagkatapos ng bahagyang hepatectomy, at pleiotrophin.

Bilang karagdagan sa mga mekanismo ng paracrine ng pakikipag-ugnayan sa pagitan ng mga hepatocytes at Ito na mga cell, ang direktang intercellular contact ng mga cell na ito na may mga hepatocytes ay gumaganap din ng isang tiyak na papel. Ang kahalagahan ng intercellular contact sa pagitan ng Ito cells at epithelial progenitor cells ay ipinakita sa vitro, kapag ang paglilinang sa halo-halong kultura ay mas epektibo para sa pagkita ng kaibahan ng huli sa albumin-producing hepatocytes kaysa sa paglilinang ng mga cell na pinaghihiwalay ng isang lamad, kapag maaari lamang silang makipagpalitan ng natutunaw. salik sa pamamagitan ng kultural na kapaligiran. Nakahiwalay sa fetal liver ng mouse sa loob ng 13.5 araw. mesenchymal cells na may phenotype Thy-1 +/C049!±/vimentin+/desmin+/ --GMA+ matapos ang pagtatatag ng mga direktang intercellular contact ay pinasigla ang pagkita ng kaibahan ng populasyon ng primitive hepatic endodermal cells - sa mga hepatocytes (naglalaman ng glycogen, na nagpapahayag ng mRNA ng tyrosine aminotransferase at tryptophanoxyge -pangalan). Ang populasyon ng Thy-1+/desmin+ mesenchymal cells ay hindi nagpahayag ng mga marker ng hepatocytes, endothelium, at Kupffer cells, at, malamang, ay kinakatawan ng Ito cells. Ang isang mataas na density ng mga desmin-positibong Ito na mga cell at ang kanilang lokasyon sa malapit na pakikipag-ugnay sa pagkakaiba-iba ng mga hepatocytes ay nabanggit sa vivo sa daga at mga atay ng prenatal ng tao. Kaya, ang lahat ng mga katotohanang ito ay nagpapahintulot sa amin na tapusin na ang uri ng cell na ito ay ang pinakamahalagang bahagi ng microenvironment, na kinakailangan para sa normal na pag-unlad ng mga hepatocytes sa ontogeny at ang kanilang pagbawi sa proseso ng reparative regeneration.

Sa mga nagdaang taon, ang data ay nakuha na nagpapahiwatig ng isang makabuluhang epekto ng Ito cells sa pagkita ng kaibhan ng hematopoietic stem cells. Kaya, ang mga cell ng Ito ay gumagawa ng erythropoietin at neurotrophin, na nakakaapekto sa pagkita ng kaibahan ng hindi lamang mga epithelial cell ng atay, kundi pati na rin ang mga hematopoietic stem cell. Ang pag-aaral ng fetal hematopoiesis sa mga daga at tao ay nagpakita na ang mga cell na ito ang bumubuo sa microenvironment ng hematopoietic islands sa atay. Ang mga cell na ito ay nagpapahayag ng vascular cell adhesion molecule-1 (VCAM-1), isang pangunahing molekula para sa pagpapanatili ng pagdirikit ng hematopoietic progenitors sa bone marrow stromal cells. Bilang karagdagan, nagpapahayag din sila ng stromal factor-1 - (Stromal derived factor-1 -, SDF-1 -) - isang potensyal na chemoattractant para sa hematopoietic stem cells, na nagpapasigla sa kanilang paglipat sa lugar ng hematopoiesis dahil sa pakikipag-ugnayan sa partikular na receptor na Cystein- X- Cystein receptor 4 (CXR4), pati na rin ang homeobox protein Hlx, sa kaso ng isang depekto kung saan parehong ang pag-unlad ng atay mismo at hepatic hematopoiesis ay nabalisa. Malamang, ito ay ang pagpapahayag ng VCAM-1 at SDF-1 a sa fetal Ito cells na nag-trigger ng recruitment ng hematopoietic progenitor cells sa fetal liver para sa karagdagang pagkita ng kaibahan. Ang mga retinoid na naipon ng mga selulang Ito ay isa ring mahalagang kadahilanan ng morphogenesis para sa mga selulang hematopoietic at epithelia. Imposibleng hindi banggitin ang epekto ng Ito cell sa mesenchymal stem cells. Ang mga cell na ito na nakahiwalay sa atay ng daga at ganap na na-activate ay nagmo-modulate sa pagkita ng kaibahan ng mesenchymal stem cells (multipotent mesenchymal stromal cells) sa bone marrow sa hepatocyte-like cells (nag-iipon ng glycogen at nagpapahayag ng tetase at phosphoenolpyruvate carboxykinase) pagkatapos ng 2 linggo. co-cultivation.

Kaya, ang mga naipon na siyentipikong katotohanan ay nagpapahintulot sa amin na tapusin na ang mga selulang Ito ay isa sa pinakamahalagang uri ng cell na kinakailangan para sa pag-unlad at pagbabagong-buhay ng atay. Ito ang mga cell na ito na lumikha ng microenvironment kapwa para sa fetal hepatic hematopoiesis at para sa pagkita ng kaibahan ng mga hepatocytes sa panahon ng pag-unlad ng prenatal, pati na rin para sa pagkita ng kaibahan ng epithelial at mesenchymal progenitor cells sa mga hepatocytes sa ilalim ng mga kondisyon ng vitro. Sa kasalukuyan, ang mga datos na ito ay walang pagdududa at kinikilala ng lahat ng mga mananaliksik ng atay. Ano, kung gayon, ang nagsilbing panimulang punto para sa paglitaw ng hypothesis na iniharap sa pamagat ng artikulo?

Una sa lahat, ang hitsura nito ay pinadali ng pagtuklas sa atay ng mga cell na nagpapahayag ng sabay-sabay na parehong mga epithelial marker ng hepatocytes at mesenchymal marker ng Ito cells. Ang mga unang gawa sa lugar na ito ay isinagawa sa pag-aaral ng prenatal histo- at organogenesis ng atay ng mga mammal. Ito ay ang proseso ng pag-unlad na ang pangunahing kaganapan, ang pag-aaral na ginagawang posible upang masubaybayan sa mga natural na kondisyon ang dinamika ng pangunahing pagbuo ng tiyak na phenotype ng iba't ibang uri ng cell ng isang organ gamit ang mga tiyak na marker. Sa kasalukuyan, ang saklaw ng naturang mga marker ay medyo malawak. Sa mga gawaing nakatuon sa pag-aaral ng isyung ito, ginamit ang iba't ibang mga marker ng mesenchymal at epithelial cells, indibidwal na populasyon ng cell ng atay, at stem (kabilang ang hematopoietic) na mga cell.

Sa isinagawang pag-aaral, napag-alaman na ang mga desmin-positive Ito na mga selula ng mga fetus ng daga ay lumilipas sa 14-15 araw. Ang mga pagbubuntis ay nagpapahayag ng mga epithelial marker na katangian ng mga hepatoblast tulad ng cytokeratins 8 at 18. Sa kabilang banda, ang mga hepatoblast sa parehong oras ng pag-unlad ay nagpapahayag ng cell marker na Ito desmin. Ito ay naging posible na gumawa ng isang palagay tungkol sa pagkakaroon sa atay sa panahon ng intrauterine development ng mga cell na may transitional phenotype na nagpapahayag ng parehong mesenchymal at epithelial marker, at, samakatuwid, upang isaalang-alang ang posibilidad ng pagbuo ng Ito cell at hepatocytes mula sa parehong pinagmulan at (o) isaalang-alang ang mga cell na ito bilang isa at parehong uri ng cell sa iba't ibang yugto ng pag-unlad. Ang mga karagdagang pag-aaral sa pag-aaral ng histogenesis, na isinagawa sa materyal ng embryonic na atay ng tao, ay nagpakita na para sa 4-8 na linggo. Sa pagbuo ng pangsanggol ng atay ng tao, ang mga selulang Ito ay nagpahayag ng mga cytokeratins 18 at 19, na nakumpirma ng dobleng immunohistochemical staining, at ang mahinang positibong paglamlam para sa desmin ay nabanggit sa mga hepatoblast.

Gayunpaman, sa isang gawaing inilathala noong 2000, nabigo ang mga may-akda na makita ang pagpapahayag ng desmin sa mga hepatoblast sa atay ng mga fetus ng mouse, at E-cadherin at cytokeratins sa mga selula ng Ito. Ang mga may-akda ay nakakuha ng positibong paglamlam para sa mga cytokeratin sa Ito na mga cell sa isang maliit na proporsyon lamang ng mga kaso, na iniugnay nila sa hindi tiyak na cross-reactivity ng mga pangunahing antibodies. Ang pagpili ng mga antibodies na ito ay nagdudulot ng ilang pagkalito - ang mga antibodies sa chicken desmin at bovine cytokeratins 8 at 18 ay ginamit sa trabaho.

Bilang karagdagan sa desmin at cytokeratins, isa pang mesenchymal marker, ang vascular cell adhesion molecule VCAM-1, ay isang pangkaraniwang marker para sa Ito cells at mouse at rat fetal hepatoblasts. Ang VCAM-1 ay isang natatanging pang-ibabaw na marker na nagpapakilala sa mga Ito cell mula sa myofibroblasts sa adult rat liver at naroroon din sa ilang iba pang mga liver cells ng mesenchymal na pinagmulan, gaya ng endotheliocytes o myogenic cells.

Ang isa pang katibayan na pabor sa hypothesis na isinasaalang-alang ay ang posibilidad ng mesenchymal-epithelial transdifferentiation (conversion) ng Ito cells na nakahiwalay sa atay ng mga adult na daga. Dapat pansinin na ang panitikan ay pangunahing tumatalakay sa epithelial-mesenchymal kaysa sa mesenchymal-epithelial transdifferentiation, bagama't ang parehong direksyon ay kinikilala hangga't maaari, at kadalasan ang terminong "epithelial-mesenchymal transdifferentiation" ay ginagamit upang tumukoy sa transdifferentiation sa alinman sa mga direksyon. Matapos pag-aralan ang expression ng profile ng mRNA at kaukulang mga protina sa Ito cell na nakahiwalay mula sa atay ng mga adult na daga pagkatapos ng pagkakalantad sa carbon tetrachloride (CTC), natagpuan ng mga may-akda ang parehong mesenchymal at epithelial marker sa kanila. Kabilang sa mga mesenchymal marker, nestin, --GMA, matrix metalloproteinase-2 (Matrix Metalloproteinase-2, MMP-2), at kabilang sa mga epithelial marker, muscle pyruvate kinase (Muscle pyruvate kinase, MRK), katangian ng mga oval na selula, cytokeratin 19 , a-FP, E-cadherin, pati na rin ang transcription factor na Hepatocyte nuclear factor 4- (HNF-4-), partikular para sa mga cell na nakatakdang maging hepatocytes. Napag-alaman din na sa pangunahing kultura ng mga selula ng epithelial hepatic progenitor ng tao, ang pagpapahayag ng mRNA ng mga marker ng cell ng Itonestin ay nangyayari, ang GFAP - ang mga epithelial progenitor ay co-express parehong epithelial at mesenchymal marker. Ang posibilidad ng mesenchymal-epithelial transdifferentiation ay nakumpirma ng paglitaw sa Ito cells ng Integrin-linked kinase (ILK), isang enzyme na kinakailangan para sa naturang transdifferentiation.

Ang mesenchymal-epithelial transdifferentiation ay ipinahayag din sa aming mga in vitro na eksperimento, kung saan ang isang orihinal na diskarte ay kinuha upang linangin ang isang purong populasyon ng mga cell ng Ito na nakahiwalay sa atay ng daga hanggang sa nabuo ang isang siksik na cell monolayer. Pagkatapos nito, ang mga cell ay tumigil sa pagpapahayag ng desmin at iba pang mga mesenchymal marker, nakuha ang morpolohiya ng mga epithelial cells, at nagsimulang magpahayag ng mga marker na katangian ng mga hepatocytes, sa partikular, cytokeratins 8 at 18 . Ang mga katulad na resulta ay nakuha din sa panahon ng organotypic cultivation ng fetal rat liver.

Noong nakaraang taon, dalawang papel ang nai-publish kung saan ang mga Ito cell ay itinuturing bilang isang subtype ng mga oval na cell, o bilang kanilang mga derivatives. Ang mga oval na cell ay maliliit na hugis-itlog na mga cell na may makitid na gilid ng cytoplasm na lumilitaw sa atay sa ilang mga modelo ng nakakalason na pinsala sa atay at kasalukuyang itinuturing na mga bipotent progenitor cells na may kakayahang mag-iba sa parehong mga hepatocytes at cholangiocytes. Batay sa katotohanan na ang mga gene na ipinahayag ng nakahiwalay na mga selulang Ito ay nag-tutugma sa mga gene na ipinahayag ng mga oval na selula, at sa ilalim ng ilang mga kundisyon ng paglilinang ng mga selulang Ito, lumilitaw ang mga hepatocytes at mga selula ng bile duct, sinubukan ng mga may-akda ang hypothesis na ang mga selulang Ito ay isang uri ng mga oval na selula na may kakayahang bumuo ng mga hepatocytes upang muling buuin ang isang nasirang atay. Ang mga transgenic na GFAP-Cre/GFP (Green fluorescent protein) na mga daga ay pinakain ng methionine-choline-deficient/ethionine-enriched diet upang maisaaktibo ang mga Ito na selula at mga oval na selula. Ang mga resting Ito na cell ay may GFAP+ phenotype. Matapos ma-activate ang mga cell ng Ito sa pamamagitan ng pinsala o kultura, bumaba ang kanilang expression ng GFAP at nagsimula silang magpahayag ng mga marker ng mga oval at mesenchymal na mga cell. Ang mga oval na selula ay nawala nang lumitaw ang GFP+ hepatocytes, na nagsisimulang magpahayag ng albumin at kalaunan ay pinapalitan ang malalaking lugar ng hepatic parenchyma. Batay sa kanilang mga natuklasan, ang mga may-akda ay nag-hypothesize na ang mga Ito ay isang subtype ng mga oval na selula na nag-iiba sa mga hepatocytes sa pamamagitan ng isang "mesenchymal" na yugto.

Sa mga eksperimento na isinagawa sa parehong modelo ng pag-activate ng mga oval na selula, nang ang huli ay nakahiwalay mula sa atay ng mga daga, natagpuan na sa vitro oval na mga cell ay nagpapahayag hindi lamang ng mga tradisyonal na marker 0V-6, BD-1/BD-2 at M2RK at mga marker na extracellular matrix, kabilang ang mga collagens, matrix metalloproteinases at tissue inhibitors ng metalloproteinases - mga tampok na marker ng Ito cells. Pagkatapos ng pagkakalantad sa mga cell ng TGF-pl, bilang karagdagan sa pagsugpo sa paglago at mga pagbabago sa morphological, nagkaroon ng pagtaas sa pagpapahayag ng mga gene na ito, pati na rin ang mga desmin at GFAP genes, ang hitsura ng pagpapahayag ng Snail transcription factor na responsable para sa epithelial. -mesenchymal transdifferentiation, at ang pagtigil ng E-cadherin expression, na nagpapahiwatig ng posibilidad ng "reverse" transdifferentiation ng oval cells sa Ito cells.

Dahil ang mga oval na cell ay tradisyonal na itinuturing bilang bipotent precursors ng parehong hepatocytes at cholangiocytes, ang mga pagtatangka ay ginawa upang maitaguyod ang posibilidad ng pagkakaroon ng mga transitional form sa pagitan ng mga epithelial cells ng intrahepatic bile ducts at Ito cells. Kaya, ipinakita na sa normal at nasira na atay, ang mga maliliit na istruktura ng uri ng ductal ay nabahiran ng positibo para sa Ito cell marker - GMA, gayunpaman, sa mga larawang ipinakita sa artikulo, na sumasalamin sa mga resulta ng immunofluorescent staining, posible na matukoy kung ano talaga ang mga ito - mga istruktura ng ductal ng GMA+ - mga duct ng bile o mga daluyan ng dugo - ay hindi posible. Gayunpaman, ang iba pang mga resulta ay nai-publish na nagpapahiwatig ng pagpapahayag ng Ito cell marker sa cholangiocytes. Sa nabanggit na gawain ng L. Yang, ang pagpapahayag ng Ito cell marker GFAP sa pamamagitan ng bile duct cells ay ipinakita. Ang protina ng intermediate filament ng cytoskeleton sinemine, na naroroon sa normal na atay sa Ito na mga cell at vascular cells, ay lumitaw sa ductal cells na kasangkot sa pagbuo ng ductular reaction; ito ay ipinahayag din sa cholangi carcinoma cells. Kaya, kung mayroong maraming katibayan tungkol sa posibilidad ng mutual transdifferentiation ng Ito cells at hepatocytes, kung gayon sa mga cholangiocytes, ang mga naturang obserbasyon ay nag-iisa pa rin at hindi palaging hindi malabo.

Summing up, maaari nating sabihin na ang mga pattern ng pagpapahayag ng mesenchymal at epithelial marker kapwa sa panahon ng histo- at organogenesis ng atay, at sa ilalim ng iba't ibang mga eksperimentong kondisyon kapwa sa vivo at in vitro ay nagpapahiwatig ng posibilidad ng parehong mesenchymal-epithelial at epithelial-mesenchial na maliit. mga transition sa pagitan ng Ito cells/oval cells/hepatocytes, at samakatuwid, ay nagpapahintulot sa amin na isaalang-alang ang Ito cell bilang isa sa mga pinagmumulan ng hepatocyte development. Ang mga katotohanang ito ay walang alinlangan na tumuturo sa hindi mapaghihiwalay na ugnayan sa pagitan ng mga uri ng cell na ito, at nagpapahiwatig din ng isang makabuluhang phenotypic na plasticity ng mga cell na Ito. Ang kahanga-hangang plasticity ng mga cell na ito ay napatunayan din sa pamamagitan ng kanilang pagpapahayag ng isang bilang ng mga neural na protina, tulad ng nabanggit na GFAP, nestin, neurotrophins at mga receptor para sa kanila, ang neuronal cell adhesion molecule (Neural cell adhesion molecule, N-CAM), synaptophysin, nerve growth factor (Neural growth factor, NGF), brain-derived neurotrophic factor (BDNF), sa batayan kung saan tinatalakay ng isang bilang ng mga may-akda ang posibilidad ng pagbuo ng mga Ito cell mula sa neural crest. Gayunpaman, sa nakalipas na dekada, ang mga mananaliksik ay nakakuha ng malaking pansin sa isa pang bersyon - ibig sabihin, ang posibilidad ng pagbuo ng mga hepatocytes at Ito na mga cell mula sa hematopoietic at mesenchymal stem cell.

Ang unang akda kung saan napatunayan ang posibilidad na ito ay inilathala ni V.E. Petersen et al., na nagpakita na ang mga hepatocytes ay maaaring bumuo mula sa isang hematopoietic stem cell. Kasunod nito, ang katotohanang ito ay paulit-ulit na nakumpirma sa mga gawa ng iba pang mga siyentipiko, at ilang sandali, ang posibilidad ng pagkita ng kaibhan sa mga hepatocytes ay ipinakita din para sa mga mesenchymal stem cell. Paano ito nangyayari - sa pamamagitan ng pagsasanib ng mga selula ng donor na may mga selula ng atay ng tatanggap, o sa pamamagitan ng kanilang transdifferentiation - ay hindi pa rin malinaw. Gayunpaman, nalaman din namin na ang dugo ng umbilical cord ng dugo hematopoietic stem cell na inilipat sa pali ng mga daga na sumailalim sa bahagyang hepatectomy ay nagko-kolonya sa atay at nakakapag-iba-iba sa mga hepatocytes at sinusoidal na mga selula ng atay, na pinatunayan ng pagkakaroon ng mga marker ng selula ng tao sa mga cell na ito. mga uri. Bilang karagdagan, ipinakita namin sa unang pagkakataon na ang paunang genetic modification ng umbilical cord blood cells ay hindi gaanong nakakaapekto sa kanilang pamamahagi at ang posibilidad ng pagkita ng kaibahan sa atay ng tatanggap pagkatapos ng paglipat. Tulad ng para sa posibilidad ng pagbuo ng mga hepatocytes mula sa hematopoietic stem cell sa panahon ng prenatal histogenesis, bagaman ang posibilidad na ito ay hindi maaaring ganap na ibukod, gayunpaman ay tila hindi malamang, dahil ang morpolohiya, lokalisasyon at phenotype ng mga cell na ito ay naiiba nang malaki mula sa mga para sa mga selula ng atay. Tila, kung umiiral ang gayong landas, hindi ito gumaganap ng isang makabuluhang papel sa pagbuo ng mga epithelial at sinusoidal na mga cell sa panahon ng ontogeny. Ang mga resulta ng mga kamakailang pag-aaral, kapwa sa vivo at in vitro, ay nagdududa sa mahusay na itinatag na teorya ng pag-unlad ng mga hepatocytes lamang mula sa endodermal epithelium ng foregut, at samakatuwid ay lumitaw ang pagpapalagay na ang rehiyonal na stem cell ng atay ay maaaring matatagpuan sa gitna ng mga mesenchymal cells nito. Maaari ba itong mga cell na ito?

Dahil sa mga natatanging katangian ng mga cell na ito, ang kanilang phenomenal plasticity, at ang pagkakaroon ng mga cell na may transitional phenotype mula sa Ito cells hanggang hepatocytes, ipinapalagay namin na ang mga cell na ito ang pangunahing contenders para sa papel na ito. Ang mga karagdagang argumento na pabor sa posibilidad na ito ay ang mga cell na ito, tulad ng mga hepatocytes, ay maaaring mabuo mula sa mga hematopoietic stem cell, at sila lamang ang sinusoidal liver cells na may kakayahang magpahayag ng mga marker ng stem (progenitor) cells.

Noong 2004, napag-alaman na ang mga Ito cell ay maaari ding bumuo mula sa isang hematopoietic stem cell. Pagkatapos ng paglipat ng mga bone marrow cells ng GFP mice, lumitaw ang GFP+ cells sa atay ng mga mice ng tatanggap na nagpapahayag ng Ito cell marker GFAP, at ang mga proseso ng mga cell na ito ay tumagos sa pagitan ng mga hepatocytes. Kung sakaling ang atay ng tatanggap ay nasira ng CTC, ang mga transplanted na cell ay nagpahayag din ng parang sabog na Ito na mga cell. Kapag ang bahagi ng mga non-parenchymal na selula ay nahiwalay sa atay ng mga mice ng tatanggap, ang mga GFP+ na selula na may mga patak ng lipid ay umabot sa 33.4+2.3% ng mga nakahiwalay na selula; nagpahayag sila ng desmin at GFAP, at pagkatapos ng 7 araw. paglilinang

Sa kabilang banda, ang paglipat ng mga selula ng utak ng buto ay humahantong sa pagbuo ng hindi lamang mga selulang Ito, ngunit ang uri ng collagen gene, batay sa kung saan napagpasyahan na ang naturang paglipat ay nag-aambag sa pagbuo ng fibrosis. Gayunpaman, mayroon ding mga gawa kung saan ang pagbaba sa fibrosis ng atay ay ipinakita dahil sa paglipat ng mga transplanted na selula sa fibrous septa at ang paggawa ng mga selulang ito ng matrix metalloproteinase-9 (Matrix Metalloproteinase-9, MMP-9), na isa sa ang pinakamahalagang katangian ng Ito cells. Ang aming paunang data ay nagpakita din ng pagbaba sa bilang ng mga myofibroblast at pagbaba sa antas ng fibrosis pagkatapos ng autotransplantation ng peripheral blood mononuclear fraction sa mga pasyente na may talamak na hepatitis na may malubhang fibrosis ng atay. Bilang karagdagan, bilang resulta ng hematopoietic stem cell transplantation, ang ibang mga uri ng cell na may kakayahang gumawa ng extracellular matrix ay maaaring lumitaw sa atay ng tatanggap. Kaya, sa kaso ng pinsala sa atay na sapilitan ng bile duct ligation, ang mga inilipat na mga cell ng differentiated fibrocytes na nagpapahayag ng collagen, at kapag nilinang lamang sa pagkakaroon ng TGF-pl, sila ay nag-iiba-myofibroblast, na posibleng mag-ambag sa fibrosis. Kaya, iniugnay ng mga may-akda ang panganib ng fibrosis ng atay pagkatapos ng paglipat ng selula ng utak ng buto hindi sa mga selulang Ito, ngunit sa isang "natatanging populasyon ng mga fibrocytes" . Dahil sa hindi pagkakapare-pareho ng data na nakuha, ang talakayan ay nagbukas ng isa pang tanong - kung ang mga Ito cell, na lumitaw bilang isang resulta ng pagkita ng kaibahan ng mga transplanted hematopoietic stem cell, ay mag-aambag sa pagbuo ng fibrosis, o magbibigay ba sila ng ganap na pagbabagong-buhay ng tissue ng atay at pagbabawas ng fibrosis. Sa mga nagdaang taon, naging halata (kabilang ang mula sa data sa itaas) na ang pinagmulan ng myofibroblast sa atay ay maaaring magkakaiba - mula sa mga selulang Ito, mula sa mga fibroblast ng portal tract, at maging mula sa mga hepatocytes. Naitatag din na ang mga myofibroblast ng iba't ibang pinagmulan ay naiiba sa isang bilang ng mga katangian. Kaya, ang mga na-activate na Ito na mga cell ay naiiba sa portal tract myofibroblast sa mga tuntunin ng nilalaman ng bitamina, aktibidad ng contractile, tugon sa mga cytokine, lalo na ang TGF-β, at kakayahang kusang apoptosis. Bilang karagdagan, ang mga populasyon ng cell na ito ay naiiba at, kung saan posible, ipahayag ang vascular cell adhesion molecule VCAM-1, na naroroon sa mga cell ng Ito at wala sa myofibroblasts. Imposibleng hindi sabihin na bilang karagdagan sa paggawa ng mga extracellular matrix protein, ang mga naka-activate na Ito na mga cell ay gumagawa din ng matrix metalloproteinases na sumisira sa matrix na ito. Kaya, ang papel na ginagampanan ng mga cell ng Ito, kabilang ang mga nabuo mula sa hematopoietic stem cells, sa pagbuo ng fibrosis ay malayo sa pagiging hindi malabo gaya ng naunang naisip. Tila, hindi sila masyadong nagsusulong ng fibrosis bilang remodel ang extracellular matrix sa proseso ng pag-aayos ng atay pagkatapos ng pinsala, kaya nagbibigay ng connective tissue scaffold para sa pagbabagong-buhay ng mga selula ng parenchymal ng atay.

normal at nasirang atay ng mga daga. Ang mga Rat Ito cells ay nagpapahayag din ng isa pang marker ng stem (progenitor) cells - CD133, at nagpapakita ng mga katangian ng progenitor cells na may kakayahang mag-iba sa iba't ibang uri depende sa mga kondisyon - 2) sa pagdaragdag ng mga cytokine na nagpapadali sa pagkita ng kaibahan sa endothelial cells, bumubuo ng branched tubular mga istraktura na may induction ng pagpapahayag ng mga marker endothelial cells - endothelial NO-synthase at vascular endothelial cadherin; 3) kapag gumagamit ng mga cytokine na nagtataguyod ng pagkakaiba-iba ng mga stem cell sa mga hepatocytes - sa mga bilugan na mga cell na nagpapahayag ng mga marker ng hepatocyte - FP at albumin. Gayundin, ang mga rat Ito cell ay nagpapahayag ng 0ct4, na katangian ng pluripotent stem cells. Kapansin-pansin, isang bahagi lamang ng populasyon ng cell ng Ito ang maaaring ihiwalay ng isang magnetic sorter gamit ang mga anti-CD133 antibodies; gayunpaman, pagkatapos ng standard (pronase/collagenase) na paghihiwalay, lahat ng plastic-attached na mga cell ay nagpahayag ng CD133 at 0kt4. Ang isa pang marker para sa mga progenitor cells, ang Bcl-2 ay ipinahayag ng mga desmin+ cells sa panahon ng prenatal development ng atay ng tao.

Kaya, ipinakita ng iba't ibang mga mananaliksik ang posibilidad ng pagpapahayag ng mga Ito cell ng ilang mga marker ng stem (progenitor) cells. Bukod dito, ang isang artikulo ay nai-publish kamakailan kung saan sa unang pagkakataon ay inilagay ang isang hypothesis na ang Disse space na nabuo ng basement membrane proteins, endothelial cells at hepatocytes, kung saan matatagpuan ang mga Ito cell, ay maaaring bumuo ng isang microenvironment para sa huli, na kumikilos bilang isang "niche" para sa mga stem cell. Ito ay pinatunayan ng ilang mga tampok na katangian ng angkop na lugar ng mga stem cell at kinilala sa mga bahagi ng microenvironment ng Ito cells. Kaya, ang mga cell na matatagpuan malapit sa stem ay dapat gumawa ng mga natutunaw na kadahilanan, gayundin ang magsagawa ng mga direktang pakikipag-ugnayan na nagpapanatili sa stem cell sa isang hindi nakikilalang estado at nagpapanatili nito sa isang angkop na lugar, na madalas na matatagpuan sa basement membrane. Sa katunayan, ang mga endothelial cells ng sinusoidal capillaries ng atay ay synthesize ang natutunaw na SDF-1, na partikular na nagbubuklod sa Ito cell receptor CXR4 at pinasisigla ang paglipat ng mga cell na ito sa vitro. Ang pakikipag-ugnayan na ito ay gumaganap ng isang mahalagang papel sa paglipat ng mga hematopoietic stem cell sa kanilang huling angkop na lugar sa utak ng buto sa panahon ng ontogenesis at permanenteng paninirahan dito, pati na rin sa kanilang pagpapakilos sa peripheral na dugo. Makatuwirang ipagpalagay na ang gayong pakikipag-ugnayan ay maaaring maglaro ng katulad na papel sa atay, na pinapanatili ang mga selulang Ito sa espasyo ng Disse. Sa mga unang yugto ng pagbabagong-buhay ng atay, ang pagtaas ng pagpapahayag ng SDF-1 ay maaari ring makatulong sa pag-recruit ng mga karagdagang kompartamento ng stem cell ng katawan. Ang innervation ng mga niche cell ay dapat na kasangkot ang nagkakasundo nervous system, na kung saan ay kasangkot sa regulasyon ng pangangalap ng hematopoietic stem cell. Ang mga noradrenergic signal ng sympathetic nervous system ay gumaganap ng isang kritikal na papel sa GCSF (Granulocyte colony-stimulating factorl-induced mobilization ng hematopoietic stem cells mula sa bone marrow. Ang lokasyon ng nerve endings sa agarang paligid ng Ito cells ay nakumpirma sa ilang mga gawa. Napag-alaman din na bilang tugon sa sympathetic stimulation Ang mga cell ng Ito ay nagtatago ng mga prostaglandin F2a at D, na nagpapagana ng glycogenolysis sa mga kalapit na parenchymal cells. Iminumungkahi ng mga katotohanang ito na ang sympathetic nervous system ay maaaring magkaroon ng epekto sa Ito cell niche. Isa pang function ng stem cell niche ay upang mapanatili ang isang "mabagal" na ikot ng cell at isang walang pagkakaiba-iba na estado ng mga stem cell. Ang pagpapanatili ng walang pagkakaiba-iba na estado ng mga selulang Ito sa ilalim ng mga kondisyon ng vitro ay pinadali ng mga selula ng parenchymal na atay - kapag ang dalawang populasyon ng mga selulang ito na pinaghihiwalay ng isang lamad ay nilinang, ang pagpapahayag ng mga stem cell marker na CD133 at 0kt4 ay napanatili sa mga selulang Ito, habang nasa ang kawalan ng mga hepatocytes, ang mga selulang Ito ay nakakakuha ng phenotype ng myofibroblast at nawawala ang mga marker ng stem cell. Kaya, ang pagpapahayag ng mga stem cell marker ay walang alinlangan na isang tanda ng resting Ito cells. Naitatag din na ang impluwensya ng mga selulang parenchymal sa mga selulang Ito ay maaaring batay sa pakikipag-ugnayan ng mga kadahilanang paracrine na Wnt at Jag1 na synthesize ng mga hepatocytes na may kaukulang mga receptor (Myc, Notchl) sa ibabaw ng mga selulang Ito. Sinusuportahan ng Wnt/b-catenin at Notch signaling pathway ang kakayahan ng mga stem cell na mag-renew ng sarili sa pamamagitan ng mabagal na simetriko na paghahati nang walang kasunod na pagkakaiba. Ang isa pang mahalagang bahagi ng niche ay ang basement membrane proteins, laminin at collagen IV, na nagpapanatili ng resting state ng Ito cells at pinipigilan ang kanilang pagkita ng kaibhan. Ang isang katulad na sitwasyon ay nangyayari sa mga fibers ng kalamnan at convoluted seminiferous tubules, kung saan ang mga satellite cell (stem cell ng muscle tissue) at undifferentiated spermatogonia ay malapit na nakikipag-ugnayan sa basement membrane, ayon sa pagkakabanggit, ng muscle fiber o "spermatogenic epithelium". Malinaw, ang pakikipag-ugnayan ng mga stem cell na may mga extracellular matrix na protina ay pumipigil sa pag-trigger ng kanilang panghuling pagkakaiba. Kaya, ang data na nakuha ay nagpapahintulot sa amin na isaalang-alang ang mga Ito cell bilang mga stem cell, isang angkop na lugar kung saan ang espasyo ng Disse ay maaaring magsilbi.

Ang aming data sa stem potency ng Ito cells at ang posibilidad ng hepatocyte formation mula sa mga cell na ito ay nakumpirma sa mga eksperimento sa pag-aaral ng liver regeneration sa vivo sa mga modelo ng partial hepatectomy at nakakalason na pinsala sa atay na may lead nitrate. Tradisyonal na pinaniniwalaan na sa mga modelong ito ng pagbabagong-buhay ng atay ay walang pag-activate ng stem compartment at ang mga oval na selula ay wala. Nagawa naming maitaguyod, gayunpaman, na sa parehong mga kaso posible na obserbahan hindi lamang ang pag-activate ng mga cell ng Ito, kundi pati na rin ang pagpapahayag sa kanila ng isa pang marker ng stem cell, ibig sabihin, ang receptor para sa C-kit stem cell factor. Dahil ang expression ng C-kit ay nabanggit din sa mga solong hepatocytes (kung saan ito ay hindi gaanong matindi), higit sa lahat ay matatagpuan sa pakikipag-ugnay sa mga C-kit-positibong Ito na mga cell, maaari itong ipagpalagay na ang mga hepatocytes na ito ay naiiba sa mga C-kit + Ito na mga cell. Malinaw na ang uri ng cell na ito ay hindi lamang lumilikha ng mga kondisyon para sa pagpapanumbalik ng populasyon ng hepatocyte, ngunit sumasakop din sa isang angkop na lugar ng mga stem regional liver cells.

Kaya, itinatag na ngayon na ang mga cell ng Ito ay nagpapahayag ng hindi bababa sa limang mga marker ng stem cell sa ilalim ng iba't ibang mga kondisyon ng pag-unlad, pagbabagong-buhay at paglilinang. Ang lahat ng data na naipon hanggang sa kasalukuyan ay nagmumungkahi na ang mga Ito ay maaaring gumanap ng papel ng rehiyonal na mga stem cell ng atay, bilang isa sa mga pinagmumulan para sa pagbuo ng mga hepatocytes (at posibleng mga cholangiocytes), at ito rin ang pinakamahalagang bahagi ng microenvironment para sa morphogenesis at liver. hematopoiesis. Gayunpaman, tila napaaga na gumawa ng hindi malabo na mga konklusyon tungkol sa pag-aari ng mga selulang ito sa populasyon ng mga stem (progenitor) na selula ng atay. Gayunpaman, mayroong isang malinaw na pangangailangan para sa bagong pananaliksik sa direksyon na ito, na, kung matagumpay, ay magbubukas ng mga prospect para sa pagbuo ng mga epektibong pamamaraan ng paggamot sa mga sakit sa atay batay sa stem cell transplantation.