PCR: isang paraan na napakahusay. PCR assay para sa mga impeksyon PCR assay para sa impeksyon na may quantification

Ang pagsusuri sa PCR ay isang high-precision diagnostic test na nagbibigay-daan sa iyong makita ang mga pathogen ng mga nakakahawang sakit sa pamamagitan ng kanilang genetic material (RNA, DNA) sa isang sample ng biological fluid na kinuha mula sa isang tao.

Ang polymerase chain reaction ay ginagawang posible upang masuri ang isang malawak na hanay ng mga sakit ng viral etiology, kabilang ang mga naroroon sa katawan ng tao sa loob ng mahabang panahon, na nangyayari nang tago. Kadalasan, ang pagsusuri ng PCR ay inireseta sa gynecological at urological practice.

Pangunahing indikasyon

Ang pagsusuri ng PCR ay inireseta para sa pinaghihinalaang mga sumusunod na pathologies:

  • viral hepatitis (A, B, C);
  • impeksyon sa cytomegalovirus;
  • mga impeksyon sa gastrointestinal (enteroviruses);
  • herpes zoster (lichen);
  • Filatov's disease (monocytic tonsilitis);
  • neurollosis (granulomatosis ng mga bagong silang).

Ang kakayahang gumamit ng hindi lamang venous blood bilang isang biomaterial ay makabuluhang nagpapalawak ng listahan ng mga pathologies na nasuri ng PCR. Kasama sa listahang ito ang:

  • bacterial vaginosis;
  • salmonellosis;
  • dipterya;
  • iba't ibang anyo ng tuberculosis;
  • human papilloma virus;
  • STD;
  • mycoplasma hominis;
  • ureaplasma urealiticum.

Paano maghanda para sa pag-aaral

Ang paghahanda para sa mga diagnostic ng PCR ay depende sa kung anong biological na materyal ang susuriin. Kapag nag-donate ng dugo 3 araw bago, ang paggamit ng alkohol, ang mga thinner ng dugo ay hindi kasama, inirerekomenda na sundin ang isang tiyak na diyeta. Kapag kumukuha ng smear mula sa urethra at puki sa loob ng 3-5 araw, hindi kasama ang intimacy, at hindi dapat gawin ang douching sa oras na ito. Ang mga pahid ay hindi ibinibigay sa panahon ng regla, bago ito at sa loob ng 5 araw pagkatapos nito.

Mga Tampok ng Pagsusuri

Ang biological na materyal para sa pananaliksik sa PCR ay maaaring dugo, laway, smears. Ang pagpili ay depende sa uri ng virus o nakakahawang patolohiya. Kung pinaghihinalaang may sakit na nakukuha sa pakikipagtalik, ibinibigay ang ihi sa umaga at pag-scrape mula sa mucous membrane ng vaginal wall. Sa herpes, hepatitis, HIV - venous blood, sa dami ng hindi bababa sa 5 ml. Sa kaso ng pinsala sa central nervous system, ang biomaterial ay ang cerebrospinal fluid.

Ginagamit ang PCR sa pagsusuri ng mga intrauterine pathologies ng fetus (ang materyal ay placental tissue), na may mga impeksyon ng pulmonary type (fluid mula sa pleural cavity o plema ay sinusuri).

Mayroong ilang mga pamamaraan para sa pagsasagawa ng pagsusuri sa PCR:

  • real-time na diagnostic;
  • pagpapasiya ng amino acid at nucleotide sequence ng DNA;
  • Paraan ng pagkakasunud-sunod ng DNA;
  • nanofluidics.

Kadalasan, ginagamit ang isang real-time na pag-aaral, ito ay isa sa mga pinaka-kaalaman na pamamaraan, nagbibigay ito ng pinakamababang porsyento ng mga maling positibong resulta. Ang pagsusuri ay isinasagawa sa araw.

Sa konklusyon, ang isa sa mga pagpipilian para sa resulta ng pag-aaral ay ipinahiwatig - positibo (kinukumpirma ang pagkakaroon ng isang proseso ng pathological) o negatibo (ipinapahiwatig ang kawalan nito).

Karamihan sa mga tao kahit isang beses sa kanilang buhay ay sinusuri para sa mga impeksyon ng PCR. Ngunit kakaunti ang nakakaalam kung ano ito at kung ano ang kakanyahan ng pag-aaral.

Ang diagnosis ng mga impeksyon sa pamamagitan ng PCR ay batay sa pagtuklas ng DNA o RNA ng isang pathogenic microorganism. Maaari itong makita sa anumang klinikal na materyal na nakuha sa pamamagitan ng isang invasive o non-invasive na paraan. Inihayag nito ang genetic na materyal ng pathogen, na paulit-ulit na kinopya. Ang isang tiyak na fragment ng genetic code na naaayon sa pamantayan ay tinutukoy.

Kung ito ay naroroon sa klinikal na materyal, ang resulta ay magiging positibo.

Mga kalamangan ng PCR diagnostics ng genital infections:

  • mataas na katumpakan at nilalaman ng impormasyon;
  • kaunting panganib ng isang maling positibo o maling negatibong resulta;
  • gamit ang PCR, ang diagnosis ng mga impeksyon ay maaaring isagawa sa anumang klinikal na materyal;
  • halos anumang pathogen ay maaaring makita;
  • ang pag-aaral ay isinasagawa nang mabilis - ang mga resulta ay maaaring makuha sa loob ng ilang oras pagkatapos ng pagsusuri.

Sa kasalukuyan, ang PCR diagnosis ng mga impeksyon ay isa sa mga pangunahing pamamaraan para sa pag-detect ng karamihan sa mga sakit na nakukuha sa pakikipagtalik.

Pagsusuri ng impeksyon sa PCR na may quantification

Kadalasan, ang mga doktor ay nagrereseta ng mga qualitative PCR test para sa mga impeksyon. Ibig sabihin, ang resulta ay maaaring maging positibo o negatibo. Ngunit sa ilang mga kaso, kinakailangan ang isang quantitative study.

Ito ay naiiba sa na, bilang karagdagan sa katotohanan ng pagkakaroon ng pathogen sa mga istruktura ng genitourinary system, ang konsentrasyon nito sa klinikal na materyal ay tinutukoy.

Ang quantitative PCR para sa mga impeksyon ay kinakailangan sa mga ganitong kaso:

  • kapag nag-diagnose ng mga impeksyon na itinuturing na oportunistiko (sa kasong ito, maaari silang maging sanhi ng mga nagpapaalab na proseso lamang sa isang labis na pagtaas sa populasyon ng bakterya);
  • upang masuri ang dinamika ng kurso ng proseso ng pathological at ang pagiging epektibo ng therapy;
  • upang masuri ang pagbabala ng sakit, matukoy ang panganib ng mga komplikasyon, pumili ng sapat na therapy.

Masakit bang kumuha ng smear test para sa PCR infection

Karamihan sa mga pagsusuri ay walang sakit o nagdudulot ng kaunting kakulangan sa ginhawa sa pasyente. Sa kanyang sarili, ang PCR ay hindi maaaring maging sanhi ng sakit sa anumang paraan, dahil ito ay isinasagawa sa isang laboratoryo, malayo sa pasyente.

Tanging ang pamamaraan para sa pagkuha ng klinikal na materyal ay maaaring hindi kasiya-siya. At maaaring iba ito. Malinaw, kung ang ihi o ejaculate ay kinuha para sa pagsusuri, kung gayon ang pagsusuri ay hindi magiging masakit. Kasabay nito, kung ang cerebrospinal fluid, pag-scrape mula sa urethra, ang lihim ng prostate gland ay napagmasdan, kung gayon ang sampling ng biomaterial ay magiging mas o hindi gaanong hindi kasiya-siya. Kadalasan, ang mga pag-scrape ng mga urethral cell ay kinukuha upang masuri ang mga impeksiyon na nakukuha sa pakikipagtalik. Ang pamamaraang ito ay kadalasang hindi kanais-nais, ngunit sa aming klinika ito ay walang sakit.

Ano ang pagkakaiba sa pagitan ng isang smear at isang pagsusuri sa dugo na impeksyon sa PCR

Tulad ng nabanggit na, ang iba't ibang klinikal na materyal ay maaaring gamitin para sa pagsusuri. Sa isang smear mula sa urethra, ang mga pathogen na naroroon sa mga istruktura ng urethra ay tinutukoy. Ngunit hindi sila palaging nandiyan. Samakatuwid, madalas na kinakailangan upang suriin ang isa pang biomaterial, halimbawa, dugo.

Narito ang ilang mga impeksiyon na maaaring maipasa sa isang pahid:

  • Pagsusuri ng PCR ng mga impeksyon sa bacterial - gonorrhea, chlamydia, ureaplasmosis, mycoplasmosis;
  • trichomoniasis;
  • mga virus - HPV, herpes;
  • fungi - candida.

Narito ang ilang impeksiyon na maaaring ibigay sa dugo:

  • Pagsusuri ng PCR ng mga impeksyon sa viral - HIV, viral hepatitis, herpes, cytomegalovirus;
  • bacterial pathologies - syphilis (bihirang);
  • anumang venereal pathologies sa kaso ng kanilang generalization (gonorrhea, candidiasis).

Sa pagsasagawa, kadalasan, ang PCR ng dugo ay ginagawa kapag pinaghihinalaan ang mga impeksyon sa viral, na maaaring hindi mailabas sa panlabas na kapaligiran sa pamamagitan ng urethra.

Sino ang kailangang mag-diagnose ng impeksyon sa pamamagitan ng PCR

Ang mga pangunahing indikasyon para sa pagsusuri ng PCR para sa mga impeksyon:

  • kontrol pagkatapos ng paggamot;
  • ang pagkakaroon ng mga sintomas ng isang sexually transmitted disease;
  • kasaysayan ng hindi protektadong pakikipagtalik sa isang bagong kapareha;
  • pagtuklas ng mga impeksiyon sa isang permanenteng kasosyo;
  • pagsusuri bago ang pagbubuntis, IVF, mga operasyon sa kirurhiko;
  • diagnosis ng kawalan ng katabaan upang matukoy ang mga sanhi nito.

Ang ilang mga tao ay sinusuri nang walang mga indikasyon, na may layuning pang-iwas.

Ito ay dahil ang karamihan sa mga STD ay maaaring mangyari nang walang mga sintomas. Gayunpaman, kumakalat pa rin sila sa populasyon, nagdudulot ng mga komplikasyon at nagdudulot ng panganib sa kalusugan ng reproduktibo. Samakatuwid, ang bawat tao na namumuno sa isang aktibong sekswal na buhay, nagbabago ng mga kasosyo sa pana-panahon, ay dapat na suriin para sa mga impeksyon sa mga regular na pagitan. Maipapayo na suriin minsan sa isang taon. Ang isang karaniwang pagsusuri ng PCR para sa 12 impeksyon ay tatagal ng maximum na kalahating oras ng iyong oras. Ngunit ito ay magpapahintulot sa napapanahong pagtuklas ng mga mapanganib na sakit.

Pagsusuri ng impeksyon sa PCR - kung paano maghanda para sa isang pahid at dugo

Bago kumuha ng smear, kailangan mong huwag makipagtalik sa loob ng 2 araw at huwag umihi ng 2 oras.

Hindi na kailangang maghanda para sa pagsusuri ng dugo. Anuman ang klinikal na materyal na iyong ido-donate, hindi ka dapat uminom ng antibiotic hanggang matapos ang diagnosis.

Paano suriin ang resulta ng PCR test para sa mga impeksyon

Kapag nagsasagawa ng mga diagnostic ng PCR ng mga impeksyon, ang interpretasyon ng mga resulta ay isinasagawa lamang ng isang doktor. Sa unang sulyap, hindi ito nagpapakita ng anumang mga paghihirap.

Sa katunayan, sa anyo ng pagsusuri, ang resulta ay kadalasang positibo o negatibo. Ngunit mahalagang isaalang-alang ang mga kumplikadong sintomas, data mula sa iba pang mga pagsubok, data ng kasaysayan. Minsan may mga maling positibong resulta ng pagsusuri ng PCR para sa mga impeksyon. Sa ibang mga kaso, ang mga resulta ng pagsusuri ng PCR para sa mga impeksyon ay false-negative.

Sa unang kaso, may nakitang impeksiyon na wala talaga. Sa pangalawang kaso, ang pathogen na naroroon sa katawan ay hindi nakita. Para maging maaasahan ang resulta, mahalagang maunawaan kung ang pagsusuri sa PCR ay positibo para sa impeksiyon pagkatapos ng impeksiyon. Maipapayo na magsagawa ng mga diagnostic nang hindi mas maaga kaysa sa 2 linggo pagkatapos ng hindi protektadong pakikipagtalik.

Pagsusuri ng PCR para sa mga impeksyon - na inireseta ng doktor

Ang diagnosis ng mga impeksyon sa pamamagitan ng PCR ay ginagamit sa maraming sangay ng gamot. Ang isa sa mga pangunahing lugar ng aplikasyon ay venereology. Ang ganitong mga pagsusuri ay inireseta ng isang venereologist, mas madalas ng isang gynecologist o urologist.

Kung naghahanap ka kung saan kukuha ng PCR test para sa mga impeksyon, pumunta sa aming klinika.

Ang aming mga pakinabang:

  • walang sakit na sampling ng klinikal na materyal;
  • mabilis na mga pagsusuri sa diagnostic;
  • walang pila
  • mataas na katumpakan ng diagnostic;
  • ang posibilidad na makakuha ng konsultasyon ng doktor at, kung kinakailangan, magreseta ng paggamot.

Ang oras ng pagsusuri ng impeksyon sa PCR ay karaniwang hindi lalampas sa 1 araw. Sa ilang mga kaso, maaaring makuha ang mga resulta sa loob ng ilang oras. Ngunit ang presyo ng mga kagyat na diagnostic ay mas mataas. Sa aming klinika, ang mga pag-aaral ay isinasagawa para sa mga indibidwal na sakit, pati na rin ang mga kumplikadong pagsusuri ng PCR para sa 12 mga impeksyon.

Ang gastos ng mga diagnostic na pamamaraan ay nakasalalay sa isang bilang ng mga kadahilanan:

  • pangangailangan ng madaliang pagsusuri;
  • ginamit na klinikal na materyal;
  • ang bilang ng mga pathogens.

Ang aming klinika ay gumagana sa ilang mga laboratoryo. Nagbibigay-daan ito sa amin na magbigay ng malawak na hanay ng mga serbisyong diagnostic at mababang presyo para sa pananaliksik.

Kung kailangan mong kumuha ng mga pagsusuri sa PCR para sa mga impeksyon, makipag-ugnayan sa mga karampatang venereologist.

Ang polymerase chain reaction (PCR, PCR), na natuklasan ng American Carrie Mullis noong 1983, at ang paraan ng pagtuklas ng DNA na binuo batay dito, ay nagdala sa siyentipiko ng 1993 Nobel Prize sa Chemistry. Ngayon ito ay isa sa mga pinaka-tumpak na pamamaraan sa pagsusuri ng laboratoryo ng mga nakakahawang sakit. Pinapayagan ka nitong matuklasan kung ano ang nanatiling nakatago bago ang pagdating ng PCR.

Bakit hindi pinalitan ng gayong kahanga-hangang paraan ang iba pang mga uri ng mga diagnostic sa laboratoryo, ngunit ginagamit ito sa isang par sa kanila, at sa ilang mga paraan ay natalo pa sa kanila?

Mayroong iba't ibang mga pamamaraan para sa pagtukoy ng mga impeksyon sa mga likido sa katawan ng mga pasyente.

  • mikroskopikong pamamaraan.

Gamit ang isang mikroskopyo, ang isang laboratory assistant ay naghahanap ng mga pathogenic microorganism sa isang espesyal na stained smear - isang sample ng discharge mula sa urethra o mula sa mucosal wall. Mura, simple, ngunit hindi nakakaalam. Kaya, posible na makilala ang Trichomonas, gonococci, chlamydia, ureaplasma at gardnerella. At ayun na nga.

  • Mga pamamaraang pangkultura (pananim).

Ang eksaktong parehong pahid ay inilapat sa isang nutrient medium sa isang Petri dish at tingnan kung ano ang lumalaki. Ang lahat ng mga mikroorganismo ay bumubuo ng iba't ibang mga kolonya - sa kulay, hugis, sukat at pagkakapare-pareho. Ito ay sa pamamagitan ng mga kolonya na ito ay tinutukoy: kung sino ang nasa smear. Gayundin, sa pangkalahatan, mura, ngunit mahaba, ang paglilinang ng mga microorganism ay maaaring tumagal mula 3 hanggang 8 na linggo - sa panahong ito ang kondisyon ng pasyente ay maaaring lumala nang malaki. At mayroong isa pang nuance: kung ano lamang ang nasa smear at sa isang tiyak na halaga ay lalago. Kung mayroong napakakaunting pathogenic bacteria, hindi posible na makilala ang mga ito.

  • Pagsusuri ng dugo.

Ang anumang mga pathogen ay umalis pagkatapos makipag-ugnay sa katawan ng tao ang kanilang mga bakas ng immune sa kanyang dugo: mga antigen o antibodies. Ang pamamaraan ay hindi ang pinakamurang, ngunit mabilis. Ngunit kahit dito ay dapat tandaan na hanggang sa isang tiyak na punto ang impeksiyon ay maaaring nasa katawan na, at ang mga antibodies at antigens ay hindi pa natukoy: masyadong kaunting oras ang lumipas o masyadong mababa ang konsentrasyon ng mga pathogenic microorganism. Bilang karagdagan, ang pamamaraang ito ay hindi nagpapahintulot sa amin na makilala sa pagitan ng mga uri ng mga indibidwal na microorganism, na hindi palaging mapanganib sa mga tao.

Kaya, ang lahat ng mga pamamaraan ay may kanilang mga kawalan. Kabilang sa mga pangunahing ay ang mga sumusunod:

  • Mababang sensitivity, ibig sabihin, isang tiyak na minimum na bilang ng mga microorganism ang kinakailangan sa sample upang matukoy.
  • Ang mababang pagtitiyak, iyon ay, kung ang dalawang magkakaibang uri ng bakterya (ang isa ay mapanganib, ang isa ay hindi) ay may parehong mga protina sa ibabaw ng cell, kung gayon hindi lahat ng pag-aaral ay nagpapahintulot sa iyo na malaman kung alin sa mga species na ito ang nasa katawan.

Ang parehong mga problemang ito ay maaaring malutas sa pamamagitan ng paraan ng PCR.

Ang pamamaraan ay batay sa katotohanan na ang bawat buhay na organismo (micro o macro) ay may natatanging DNA (o RNA - kung pinag-uusapan natin ang tungkol sa ilang mga virus). Ito ang pinakamahusay na marker ng pagkakaroon ng isang dayuhang mikroorganismo sa katawan ng tao na maiisip ng isa. Kahit na may mga bakas na dami ng DNA sa sample, nangangahulugan ito na ang organismo ay nakatagpo na ng impeksyong ito sa isang paraan o iba pa. At paano mo "makikita" ang mga bakas na ito? Kailangan nilang simulan ang "multiply".

Ang paraan ng PCR ay binubuo ng mga sumusunod na hakbang.

  • Stage 1. Paghahanda ng sample, ibig sabihin, pagkuha ng DNA.

Ipagpalagay na naghahanap kami ng isang tiyak na bacterium sa sample, halimbawa, chlamydia (Chlamydia trachomatis - ang causative agent ng chlamydia). Sa yugtong ito, hindi namin alam kung nasa sample ang kanyang DNA. Ang sample ay espesyal na pinoproseso upang ituon ang DNA, kung mayroon, sa pinakamababang dami ng PCR fluid.

  • Stage 2. Amplification (multiplication) ng DNA gamit ang PCR.

Una, ang double-stranded na DNA ay "untwisted" sa pamamagitan ng pagtaas ng temperatura at ang mga single-stranded strand ay nakuha. Pagkatapos nito, ang mga espesyal na maikling fragment ng nucleic acid - mga panimulang aklat - ay idinagdag sa solusyon. Sila ang magiging binhi para sa synthesis ng pangalawang strand ng DNA sa isang single-stranded na "base". Kaya, mayroong isang base, mayroong isang buto, nananatili itong idagdag ang mga nucleotide kung saan makukumpleto ang pangalawang kadena, at ang aparato na kasangkot sa konstruksiyon na ito. Ang enzyme DNA polymerase ay gumaganap bilang isang aparato, at ang proseso ng pagkumpleto ng pagbuo ng single-stranded DNA sa double-stranded ay ang polymerase chain reaction.

Sa simula ng cycle mayroon kaming dalawang single-stranded DNA, sa dulo magkakaroon kami ng dalawang double-stranded DNA. At ang cycle na ito ay paulit-ulit ng maraming beses hanggang ang dami ng DNA ay sapat para sa laboratory analysis. Upang i-multiply ang DNA, ginagamit ang mga espesyal na aparato - mga amplifier. Sa yugtong ito, hindi pa rin alam ng mga mananaliksik kung anong DNA ang kanilang pinalaki o kung mayroong chlamydia DNA sa sample.

Dapat ding idagdag na maraming uri ng paraan ng PCR, na ginagamit depende sa gawaing itinalaga sa mananaliksik.

  • Stage 3. Detection (pagtukoy) ng DNA.

Sa yugtong ito, tiyak kung ano ang nangyayari upang malaman kung mayroong DNA ng nais na bacterium sa sample. Noong nakaraan, ang paraan ng electrophoresis ay ginamit para dito, at kalaunan ay nagsimulang gumamit ang mga siyentipiko ng DNA probes - mga espesyal na may label na mga fragment ng DNA na nakikipag-ugnayan lamang sa isang partikular na seksyon ng nasuri na DNA at sa gayon ay pinapayagan ang mga tiyak na pagkakasunud-sunod ng nucleotide na matukoy. Sa wakas, ang mga fluorescent marker ay ginagamit na ngayon para sa mga express diagnostic, na nagbibigay-daan sa pagtukoy ng resulta ng PCR nang direkta sa reaction tube. Kung mayroong chlamydia DNA sa sample, malalaman ito ng katulong sa laboratoryo.

Ano ang maaaring PCR

Ang paraan ng PCR ay nagpapahintulot sa iyo na makilala ang mga pathogenic microorganism, pati na rin pag-aralan ang mga ito para sa kanilang paglaban (paglaban) sa mga gamot. Sa bagay na ito, kumpara sa kultura at iba pang mga pamamaraan, ang PCR ay mas mabilis at mas tumpak. Ang mga pamamaraan ng PCR ay lalong ginagamit sa medikal na kasanayan. Halimbawa, ngayon sa tulong nito sa ilang mga kaso posible upang matukoy ang presensya (o kawalan) ng mga genetic marker ng paglaban.

Mga Bentahe ng PCR:

  • Pagkamapagdamdam.

Kahit isang kopya ng DNA nito ay sapat na upang makita ang pagkakaroon ng isang pathogenic microorganism sa katawan ng isang pasyente. 1 microorganism bawat sample - ito ay sapat na para sa PCR, ang diskarte na ito ay hindi posible para sa iba pang mga diagnostic na pamamaraan.

  • Pagtitiyak.

Tulad ng nabanggit kanina, ang pagiging natatangi ng DNA ng bawat uri ng mga mikroorganismo ay ginagawang posible na makita ang mga ito kahit na sa pagkakaroon ng malalaking volume ng dayuhan, sobra, "ballast" na DNA na nakakasagabal sa pagsusuri.

  • Ang bilis ng analysis.

Ang buong proseso ng PCR diagnostics ay tumatagal ng hindi hihigit sa 1 araw ng trabaho.

  • Pagganap.

Ang PCR diagnostics, ngayon, ay isang ganap na automated na proseso.

Anong Hindi Kaya ng PCR

Ang paraan ng PCR ay tunay na isang napakatalino na imbensyon ng molecular biology noong ika-20 siglo. Ngunit kung minsan ito ay napakahusay na ito ay hindi angkop para sa pagsusuri.

Mga disadvantages ng PCR:

  • Pagtitiyak.

Siya ay stunningly matangkad, ngunit masyadong makitid. Kapag naghahasik sa isang Petri dish, lahat ng nasa sample ay lalago. At kapag nagsasagawa ng PCR, makikita mo lamang ang iyong hinahanap, kung ano ang ginamit na DNA probes. Imposibleng magsagawa ng pagsusuri sa PCR para sa chlamydia at hindi sinasadyang makita ang hepatitis.

  • Pagkamapagdamdam.

Maraming microorganism na tinutukoy ng mga doktor bilang mga oportunistikong pathogen. Ang mga ito ay bahagi ng normal na microflora ng tao, hangga't ang kanilang konsentrasyon ay hindi lalampas sa ilang mga limitasyon. Tiyak na ipapakita ng PCR ang kanilang presensya, ngunit hindi ito nangangahulugan na ang isang tao ay may sakit. Kabilang sa mga naturang microorganism ang mycoplasma, ureaplasma, gardnerella, atbp.

  • Problema sa kontaminasyon.

Ang kontaminasyon ay ang kontaminasyon ng isang sample na may mga sample ng DNA mula sa labas. Ang diagnosis ng PCR ay dapat isagawa sa mga espesyal na inihandang laboratoryo at sa ilalim ng mga sterile na kondisyon. Kahit na ang isang kopya ng "panlabas" na DNA mula sa isa pang sample, mula sa lab air, o mula sa mga guwantes ng lab technician ay maaaring humantong sa mga maling positibong resulta - kung ang mga tamang primer ay naroroon.

  • Impluwensiya sa PCR ng iba pang bahagi ng sample.

Ang sensitivity ng PCR ay maaaring makabuluhang bawasan sa pamamagitan ng pagkakalantad sa iba pang mga sangkap. Halimbawa, pinipigilan ng ilang gamot (anticoagulants) ang reaksyon ng amplification. Upang matukoy ang mga ganitong sitwasyon, may mga espesyal na paraan ng kontrol. Ngunit nananatili pa rin ang panganib na makakuha ng mga maling negatibong resulta.

  • Presyo.

Ito ay isang mamahaling pamamaraan. Ang mga kagamitan mismo at mga reagents para dito, pati na rin ang pagsasanay ng mga katulong sa laboratoryo na alam kung paano hawakan ang mga ito, ay napakamahal para sa mga klinika at laboratoryo. Sa Russia, ang naturang kagamitan ay hindi ginawa, at ang paggamit ng mga domestic reagents ay nagpapalala sa kalidad ng pagsusuri.

mga konklusyon

  • Ang PCR ay isang mahusay na moderno at mahal na pamamaraan para sa pag-diagnose ng mga pathogen ng iba't ibang mga nakakahawang sakit.
  • Ang paraan ng PCR ay hindi palaging kinakailangan para sa diagnosis. Kung hindi isinasaalang-alang ng doktor na kinakailangan na i-refer ka para sa pagsusuri, magtiwala sa kanyang opinyon. Sa pamamagitan ng self-medication at self-testing para sa PCR research sa isang network laboratory, may mataas na panganib na ikaw ay magamot para sa isang hindi umiiral na sakit sa loob ng maraming taon.
  • Kung ang laboratoryo ay nagbigay sa iyo ng isang resulta na iyong pinagdudahan, ulitin ang pagsusuri sa ibang laboratoryo. Ang mga panganib ng false-positive at false-negative na resulta ay hindi nakansela - sa kabila ng lahat ng modernity at manufacturability ng pamamaraan.
Serbisyo online
  • Pangkalahatang pagsusuri
  • Biochemistry ng dugo
  • Mga hormone

PCR(polymerase chain reaction) - isang paraan ng pagsusuri batay sa pagkuha ng isang maaasahang resulta mula sa isang minimum na bilang ng mga fragment ng DNA ng materyal na pinag-aaralan, na nagpapatunay na ang nucleic acid na ito ay kabilang sa isang tiyak na uri ng buhay na organismo (bakterya, virus, protozoan, fungus) .

Ang imbentor ng paraan ng PCR noong 1983 ay nakatanggap ng Nobel Prize para sa pinakatumpak at lubos na nagbibigay-kaalaman na paraan para sa pag-diagnose ng mga nakakahawang sakit, para sa 100% na pagiging maaasahan ng pamamaraan.

Ang batayan ng pamamaraan ng PCR

Sa kurso ng pag-aaral, ang isang fragment ng DNA ay nadoble sa isang artipisyal na nilikha na kapaligiran, sa labas ng katawan. Bilang resulta ng pagsusuri, sa ilalim ng impluwensya ng mga partikular na enzyme, ang mga molekula ng DNA ay tumataas sa halagang kinakailangan para sa pagkakakilanlan gamit ang mga mikroskopikong pagsusuri.

Ang programa ay kinokopya lamang ang mga molekulang DNA na naroroon sa pinag-aralan na materyal. Ang tampok na ito ng pamamaraan ay nagbibigay-daan hindi lamang upang matukoy ang mga uri ng impeksiyon, ginagamit din ito upang magtatag ng paternity, sa genetic engineering.

Ang paraan ng PCR ay nagpapahintulot sa iyo na makilala ang mga nakatagong impeksyon, at mga impeksiyon na ang mga pathogen ay may mahabang panahon ng paglago, na ginagawang hindi nakikita sa panahon ng bacteriological culture.

Paglalapat ng paraan ng PCR

Ang paraan ng PCR ay posible upang matukoy ang anumang uri ng nakakahawang ahente. Maraming microorganism ang nakakakuha ng L-shape sa oras ng pagkakalantad sa mga antibacterial na gamot at nananatiling nakatago mula sa mikroskopyo at immunological na mga pagsusuri.

Ang PCR ay lalong malawak na ginagamit para sa pagsusuri ng mga nakatago o tamad na nagpapaalab na sakit, kung hindi posible na ihiwalay ang impeksiyon sa ibang paraan. Una sa lahat, naaangkop ito sa mga sumusunod na impeksiyong sekswal:

  • hepatitis C at B
  • impeksyon sa papillomavirus,
  • gardnerellosis,
  • buni.

Sa mga aktibidad na panterapeutika, ginagamit ang mga pagsusuri sa PCR upang masuri ang:

  • pulmonya,
  • pleurisy, mahirap gamutin,
  • para sa paghihiwalay ng Helicobacter pylori sa talamak na gastritis na may posibilidad ng pagguho,
  • para sa pagtuklas ng predisposisyon sa mga sakit na oncological - pagtuklas ng mga oncovirus.

Ang materyal para sa pagsusuri ng PCR ay:

  • dugo,
  • , cervix, ari,
  • pagtatago ng mga glandula, laway, plema,
  • discharge mula sa erosions at ulcers, iba pa.

Kung saan magpasuri ng PCR

Ang paraan ng PCR ay isang kumplikadong sunud-sunod na kadena ng maraming yugto at mga cycle. Para sa pagsusuri, ginagamit ang mga tiyak na kemikal na compound para sa media at enzymes. Ang pagsusuri ay dapat gawin ng isang doktor sa laboratoryo na sumailalim sa espesyal na pagsasanay para sa pagsasaliksik sa laboratoryo sa mga kagamitang may mataas na katumpakan gamit ang teknolohiya ng computer.

Impormasyon "Ang Iyong Doktor" ay may impormasyon tungkol sa mga pribadong klinika na nasa kanilang arsenal na kagamitan sa laboratoryo at mga reagents na nakakatugon sa kinakailangan para sa pagsusuri ng materyal sa pamamagitan ng PCR. Ang lahat ng mga manipulasyon para sa pagkuha ng dugo o iba pang materyal ay isinasagawa sa mga institusyong ito gamit ang mga sterile na instrumento at materyales, alinsunod sa mga kinakailangan ng Ministry of Health ng Russian Federation upang labanan ang pagkalat ng mga nakakahawang sakit.

Sa maraming klinika ng Vash Doctor Help Center, ginagamit ang mga vacuum system para sa pagkuha ng dugo, na ganap na nag-aalis ng theoretically posibleng error bilang resulta ng pagsusuri, at makabuluhang pinatataas ang objectivity ng pagsusuri.

Petsa ng publikasyon: 2019-06-12


Ang artikulong ito ay nai-post para sa mga layuning pang-edukasyon lamang at hindi bumubuo ng siyentipikong materyal o propesyonal na payong medikal.

Ibahagi