/

Anf kung saan isusumite. Laboratory para sa mga diagnostic ng mga sakit na autoimmune

kasingkahulugan: ANA, antinuclear antibodies, antinuclear factor, ANF, antinuclear antibodies, antinuclear antibodies, ANAs, Fluorescent Antinuclear Antibody, Antinuclear factor, ANF

Scientific editor: M. Merkusheva, PSPbSMU na pinangalanan. acad. Pavlova, medikal na kasanayan.

Ang mga autoimmune na sakit, kapag inaatake ng immune system ang sariling mga tisyu ng katawan, ay itinuturing na isa sa mga pinaka-mapanganib. Karamihan sa mga autoimmune pathologies ay talamak at maaaring maging sanhi ng malubhang pagkagambala sa paggana ng mga panloob na organo at sistema.

Ang isa sa mga pinakakaraniwang pagsusuri na ginagamit sa pagsusuri ng mga kondisyon ng autoimmune ay ang antinuclear antibody (ANA) na pagsubok, na ginagawa sa tatlong paraan:

  • sa pamamagitan ng enzyme immunoassay ELISA (natukoy ang kabuuang antas ng ANA),
  • paraan ng indirect immunofluorescence reaction RNIF (hanggang sa 15 varieties ng ANA ang nakita)
  • paraan ng immunoblotting.

Pangkalahatang Impormasyon

Ang mga antinuclear (antinuclear) na antibodies ay isang grupo ng mga autoantibodies na, kapag tumutugon sa nuclei ng sariling mga selula ng katawan, sinisira ang mga ito. Samakatuwid, ang pagsusuri sa ANA ay itinuturing na medyo sensitibong marker sa pagsusuri ng mga autoimmune disorder, karamihan sa mga ito ay sinamahan ng pinsala sa connective tissue. Gayunpaman, ang ilang mga uri ng mga antinuclear antibodies ay matatagpuan din sa mga sakit ng non-immune etiology: nagpapasiklab, nakakahawa, malignant, atbp.

Ang mga antinuclear antibodies ay pinaka-espesipiko para sa mga sumusunod na sakit:

  • systemic lupus erythematosus (SLE) ay isang sakit ng balat at connective tissue;
  • dermatomyositis - pinsala sa balat, kalamnan, skeletal tissue, atbp.;
  • periarteritis nodosa - pamamaga ng arterial vascular wall;
  • scleroderma - pampalapot at hardening ng connective tissue;
  • rheumatoid arthritis - pinsala sa connective tissue ng mga joints;
  • Sjogren's disease - pinsala sa tissue na may glandular manifestations (nabawasan ang pagtatago ng lacrimal at salivary glands).

Ang mga antinuclear antibodies ay maaaring makita sa higit sa 1/3 ng mga pasyente na may talamak na paulit-ulit na hepatitis. Gayundin, maaaring tumaas ang antas ng ANA sa kaso ng:

  • nakakahawang mononucleosis (isang viral disease na sinamahan ng napakalaking pinsala sa mga panloob na organo);
  • leukemia (malignant blood disease) sa talamak at talamak na anyo;
  • hemolytic anemia (anemia bilang resulta ng pagkasira ng mga pulang selula ng dugo);
  • Waldenström's disease (pinsala sa utak ng buto);
  • liver cirrhosis (isang malalang sakit na nauugnay sa mga pagbabago sa istraktura ng tissue ng atay);
  • malaria;
  • ketong (impeksyon sa balat);
  • thrombocytopenia (nabawasan ang produksyon ng platelet);
  • lymphoproliferative pathologies (mga tumor ng lymphatic system);
  • myasthenia gravis (pathological na pagkapagod ng kalamnan);
  • thymoma (tumor ng thymus gland).

Kasabay ng pagpapasiya ng mga antinuclear antibodies sa proseso ng enzyme immunoassay, ang konsentrasyon ng mga immunoglobulin ay tinasa: IgA, IgM, IgG. Ang pagtuklas ng mga sangkap na ito sa dugo ay maaaring magpahiwatig ng mataas na posibilidad na magkaroon ng mga sakit na rayuma at collagenoses.

Sa kaso kung saan ang isang koneksyon sa pagitan ng konsentrasyon ng mga antibodies at mga sintomas sa isang pasyente ay hindi nakita, ang mismong presensya ng mga antinuclear antibodies sa dugo ay isang diagnostic criterion at maaaring makaapekto sa pagpili ng paggamot. Ang pagtitiyaga ng isang mataas na antas ng antinuclear antibodies sa panahon ng mahabang kurso ng therapy ay nagpapahiwatig ng isang hindi kanais-nais na pagbabala ng sakit. Ang pagbaba sa mga halaga ng ANA sa panahon ng paggamot ay maaaring magpahiwatig ng pagpapatawad (mas madalas) o nalalapit na kamatayan (mas madalas).

Gayundin, ang mga antinuclear antibodies ay maaaring makita sa mga malulusog na tao sa ilalim ng 65 taong gulang (3-5% ng mga kaso), pagkatapos ng 65 (hanggang 37%).

Mga indikasyon

Maipapayo na pag-aralan ang antinuclear factor sa mga sumusunod na kaso:

  • Diagnosis ng autoimmune at ilang iba pang mga sistematikong sakit na walang binibigkas na mga sintomas;
  • Comprehensive diagnosis ng systemic lupus erythematosus, anyo at yugto nito, pati na rin ang pagpili ng mga taktika sa paggamot at pagbabala;
  • Diagnosis ng drug-induced lupus;
  • Preventive na pagsusuri ng mga pasyente na nasuri na may lupus erythematosus;
  • Ang pagkakaroon ng mga tiyak na sintomas: matagal na lagnat na walang itinatag na dahilan, pananakit at pananakit sa mga kasukasuan, kalamnan, pantal sa balat, pagtaas ng pagkapagod, atbp.;
  • Ang pagkakaroon ng mga sintomas ng systemic na sakit: pinsala sa balat o mga panloob na organo (kidney, puso), arthritis, epileptic seizure at convulsions, lagnat, walang dahilan na pagtaas ng temperatura, atbp.;
  • Pagrereseta ng therapy sa gamot na may disopyramide, hydralazine, propafenone, procainamide, ACE inhibitors, beta blockers, propylthiouracil, chlorpromazine, lithium, carbamazepine, phenytoin, isoniazid, minocycline, hydrochlorothiazide, statins, dahil may panganib na magkaroon ng erythed lupus na dulot ng droga.

Sino ang nagbibigay ng direksyon

Bilang karagdagan sa pangkalahatang practitioner, ang mga makitid na espesyalista tulad ng

  • rheumatologist,
  • dermatovenerologist,
  • nephrologist,
  • pedyatrisyan.

Norm para sa ANA at mga salik na nakakaimpluwensya

Karaniwan, ang mga antinuclear antibodies sa plasma ay wala o nakita sa maliit na dami. Ang resulta ay depende sa kung paano isinasagawa ang pagsubok:

1. Ang pagsusulit ay ginawa gamit ang ELISA method

  • mas mababa sa 0.9 puntos – negatibo (normal);
  • mula 0.9 hanggang 1.1 puntos - nagdududa (inirerekumenda na ulitin ang pagsubok sa 7-14 na araw);
  • higit sa 1.1 puntos – positibo.

2. Para sa quantitative analysis ng RNIF, ang titer na mas mababa sa 1:160 ay itinuturing na pamantayan.
3. Immunoblotting – ang pamantayan ay “hindi natukoy” (pangkalahatang konklusyon / kabaligtaran sa bawat uri ng antibody).

Ano ang maaaring makaapekto sa resulta

  • paglabag sa mga tuntunin ng paghahanda ng pasyente o ng venipuncture algorithm ng health worker;
  • pag-inom ng mga gamot (carbamazepine, methyldopa, penicillamine, tocainide, nifediline, atbp.);
  • ang pagkakaroon ng uremia sa pasyente (pagkalason ng mga produktong metabolismo ng protina) ay maaaring magbigay ng maling negatibong resulta.

Mahalaga! Ang interpretasyon ng mga resulta ay palaging isinasagawa nang komprehensibo. Imposibleng gumawa ng tumpak na diagnosis batay sa isang pagsusuri lamang.

Antinuclear antibodies sa dugo (positibong resulta)

Ang pagtuklas ng mga antinuclear antibodies ay maaaring magpahiwatig ng mga sumusunod na sakit:

  • systemic lupus erythematosus;
  • pancreatitis (pamamaga ng pancreas) ng isang likas na autoimmune;
  • uri ng diabetes mellitus I;
  • autoimmune lesyon ng thyroid gland;
  • malignant na mga sugat ng mga panloob na organo;
  • autoimmune hepatitis;
  • mga sakit sa nag-uugnay na tissue;
  • myasthenia gravis;
  • nagkakalat ng interstitial fibrosis (pinsala sa tissue ng baga sa isang talamak na anyo);
  • Raynaud's syndrome (ischemia ng maliliit na dulong arterya), atbp.

Ang pagtaas ng ANA titer sa isang quantitative enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) ay nagpapahiwatig ng:

  • Systemic lupus erythematosus sa aktibong yugto - ang titer ay tumaas sa 98%;
  • Crohn's disease (granulomatous lesions ng digestive tract) - mga 15%;
  • ulcerative colitis (pamamaga ng colon mucosa) - mula 50 hanggang 80%;
  • scleroderma;
  • sakit ni Sjögren;
  • Raynaud's disease - hanggang sa 20%;
  • Sharp's syndrome (mixed connective tissue disease);
  • lupus na dulot ng droga.

Mahalaga! Kapag binibigyang kahulugan ang pagsusuri, mahalagang maunawaan na ang isang negatibong resulta ay hindi ibinubukod ang pagkakaroon ng mga autoimmune disorder sa mga pasyente na may mga sintomas na katangian. Ang isang positibong resulta na walang klinikal na larawan ng isang proseso ng autoimmune ay dapat bigyang-kahulugan na isinasaalang-alang ang data mula sa iba pang mga pagsubok sa laboratoryo.

Paghahanda

Biomaterial para sa pagsusuri sa ELISA para sa antinuclear factor - venous blood serum.

  • Ang venipuncture ay isinasagawa sa umaga at sa walang laman na tiyan (hindi bababa sa 8 oras ang lumipas mula noong huling pagkain). Maaari kang uminom ng dalisay na tubig;
  • Kaagad bago ang pag-sample ng dugo (2-3 oras), hindi inirerekomenda na manigarilyo o gumamit ng mga pamalit sa nikotina (patch, spray, chewing gum);
  • Ang araw bago at sa araw ng pamamaraan, hindi ka dapat uminom ng alak o enerhiya na inumin, mag-alala, o makisali sa mabibigat na pisikal na gawain;
  • 15 araw bago ang pagsusuri, sa pagsang-ayon sa dumadating na manggagamot, ang mga gamot (antibiotics, antivirals, hormones, atbp.) ay itinigil;
  • Upang makakuha ng isang maaasahang resulta, ipinapayong ulitin ang pagsusuri pagkatapos ng 2 linggo.

Maaaring asahan ang tugon ng ELISA sa loob ng 1 araw pagkatapos ng venipuncture, at sa mga emergency na sitwasyon, kapag ang pagsusuri ay isinasagawa ayon sa "cito" - mga 3 oras.

Mga Pinagmulan:

  • Impormasyon mula sa mga website ng Invitro at Helix laboratories;
  • Data mula sa US National Library of Medicine PubMed.

Iba pang mga pagsusuri sa rheumatology screening

Sa loob ng mahabang panahon gusto kong magsulat tungkol sa antinuklear na kadahilanan, ngunit palaging may pumipigil sa akin. Bakit? Buweno, dahil ang pagsusulat tungkol dito ay sinusubukang maunawaan ang kalawakan, at ang kaiklian ay malinaw na hindi kapatid ng aking talento)))

Ang pagpapasiya ng antinuclear factor (ANF) ay ang pangunahing paraan para sa pag-detect ng antinuclear antibodies, na nagpapahintulot sa pagtukoy ng karamihan sa mga uri ng antinuclear antibodies. Ang resulta ng pagtukoy sa ANF ay ang mismong katotohanan ng pagkakaroon ng mga autoantibodies, ang huling titer ng serum dilution at ang uri ng luminescence ng cell nucleus.

Ang ANF ay hindi lamang isang antibody!

Ang paraan para sa pag-detect ng ANF ay binuo ni Tan (1982), na gumamit ng human continuous epithelioid cell line HEp-2 (maaaring nakita mo ang pangalang ito sa form ng pagsusuri) bilang substrate. Ang cell line na ito ay nagmula sa isang human laryngeal tumor (adenocarcinoma). Ang comparative unpretentiousness ng linyang ito, malaking nuclei at ang pagkakaroon ng lahat ng antigens ng tao ay ginawa ang paraan ng indirect immunofluorescence (inDIF) gamit ang tuluy-tuloy na cell line HEp-2 ang pangunahing paraan para sa pag-detect ng ANF.

Ang iba pang mga linya ng cell ay maaari ding gamitin bilang mga substrate (tingnan ang carousel), gayunpaman, dahil sa kanilang magandang morpolohiya at kadalian ng paglilinang, ito ay ang linya ng Hep-2 na naging pangkalahatang tinatanggap na substrate para sa hindi direktang immunofluorescence. Sa panitikang Ingles, ang pamamaraang ito ay minsang tinutukoy bilang FANA (Fluorescent AntiNuclear Antibody detection).

Minsan ang terminong "antinuclear antibodies" ay ginagamit ng mga immunological laboratories upang sumangguni sa mga pagsusuri batay sa enzyme immunoassay at immunochemical assays, pati na rin ang immunofluorescence method.
Ang antinuclear factor (ANF) ay isang antibody na nakita ng immunofluorescence.
Kinakailangang kilalanin ang ANF ng klase ng IgG, dahil ang pagtuklas ng ANF na kinakatawan ng ibang mga klase ng immunoglobulins ay walang independiyenteng kahalagahan.

Ang titer ng ANF ay tinukoy bilang ang huling dilution ng serum ng pasyente, na may malinaw na fluorescence (glow) ng cell nuclei. Kapag gumagamit ng HEp-2 cell line, inirerekomendang gumamit ng paunang titer na 1:80 sa kasong ito, ang mga normal na titer ng ANF ay mas mababa sa 1:160; Upang matukoy ang panghuling titer, karaniwang ginagamit ang titration sa x2 na hakbang (1:160-1:320 - 1:640 - 1:1280 - 1:2560 - 1:5120, atbp.).

Sa panahon ng paglala ng sakit, ang mga titer ng ANF na higit sa 1:640 ay karaniwang sinusunod, at sa panahon ng pagpapatawad, ang mga titer ay maaaring bumaba sa 1:160-1:320.

Ang pagmamarka ng mga resulta ng pagtuklas ("sa mga krus" +++) ay nagbibigay-daan sa mga laboratoryo na makatipid ng mga reagents at mabawasan ang mga gastos sa paggawa para sa pagsasagawa ng pananaliksik. Sa kasong ito, hindi posible ang pagtukoy ng end titer❌

Maipapayo na matukoy ang panghuling titer sa lahat ng positibong pasyente, na ginagawang posible na linawin ang pagkakaroon ng mga autoantibodies sa suwero, na mas malapit na nauugnay sa aktibidad ng proseso.

MGA URI NG CORE GLOW

Ang uri ng nuclear glow ay isa sa mga pangunahing katangian sa pagtukoy ng ANF. Ang bawat uri ng antinuclear antibody (ANA) ay may mga tiyak na target sa cell at sumasalamin sa interaksyon ng serum ng pasyente sa mga istruktura sa loob ng cell. Ang uri ng glow ay nakasalalay sa pagkakaroon ng mga tiyak na autoantibodies sa dugo, kung saan ang isang paunang konklusyon ay maaaring gawin tungkol sa mga uri ng antibodies na naroroon sa isang serum. Ang uri ng luminescence ng cell nucleus ay makabuluhang pinapataas ang nilalaman ng impormasyon ng ANF detection.

Ang paggamit ng HEp-2 cells ay ginagawang posible na makilala ang higit sa 20 iba't ibang mga variant ng nuclear staining, ngunit para sa klinikal na kasanayan ito ay sapat na upang i-highlight ang mga pangunahing. Ang bawat uri ng glow ay may napaka-katangiang mga tampok na ginagawang posible na makilala ang isang opsyon mula sa isa pa.

Sa homogenous na uri ng glow Ang mga autoantibodies ay tumutugon sa mga antigen na iyon na ibinahagi nang magkakalat sa nucleus, i.e. ay bahagi ng chromatin.

Dahil sa ano? Antibodies laban sa mga nucleosome, DNA, histones.

Kailan? Sa mga pasyenteng may SLE at drug-induced lupus, gayundin sa mga pasyenteng may scleroderma.

Kadalasan, ang pagtuklas ng mataas na titer ng ANF na may homogenous na uri ng luminescence ay nagpapahiwatig ng diagnosis ng SLE.

Peripheral na uri ng glow maaaring ihiwalay nang hiwalay, bagama't ito ay isang uri ng homogenous. Ang peripheral na uri ng glow ay matatagpuan sa mga pasyenteng may antibodies sa double-stranded na DNA at natutukoy pangunahin sa SLE at mga sakit sa atay.

Uri ng butil (batik-batik, mata) ay ang pinakakaraniwan at, sa parehong oras, ang pinaka hindi tiyak.

Dahil sa ano? Sm, U1-RNP, SS-A, SS-B antigens at PCNA.

Kailan? SLE, Sjogren's disease/syndrome, scleroderma, dermatomyositis/polymyositis, RA at ilang iba pang sakit. Ang mababang titer (1:160-1:320) ng ANF na may butil-butil na uri ng luminescence ay maaaring naroroon sa serum ng dugo ng mga klinikal na malusog na indibidwal na WALANG mga palatandaan ng systemic na sakit.

Ang pagtuklas ng napakataas na titer ng ANP (1:2560-1:10000) na may isang coarse-granular na uri ng nuclear luminescence ay karaniwang nagpapahiwatig ng diagnosis at nangangailangan ng karagdagang pagsusuri upang matukoy ang RNP antigen.

Ang mga nucleolar antigens ay maaaring kumilos bilang mga target ng ANA, na humahantong sa pagtuklas nucleolar na uri ng fluorescence.

Dahil sa ano? RNA polymerase 1, NOR, U3RNP, PM/Scl.

Kailan? Scleroderma at mga uri nito.

Uri ng Centromeric nabanggit kapag lumilitaw ang mga antibodies sa mga sentromer ng mga kromosom, at matatagpuan lamang sa mga selulang naghahati. Ang presensya nito ay katangian ng CREST syndrome (isang variant ng scleroderma).

Cytoplasmic na uri ng luminescence.

Dahil sa ano? Antibodies sa tRNA synthetases, sa partikular na Jo-1, na sinusunod sa polymyositis. Bilang karagdagan, ito ay napansin sa mga pasyente na may ANA na nakadirekta laban sa iba pang mga bahagi ng cell cytoplasm: sa autoimmune hepatitis, sa pangunahing biliary cirrhosis.

Ang isang bilang ng iba pang mga uri ng glow ay maaaring mailalarawan. Ang mga antibodies sa Scl-70 ay nagbibigay pinong butil-butil paglamlam ng nucleus at nucleoli, anti-p80 - luminous spot sa nucleus na wala sa mitotic cells.

Ang kumbinasyon ng ilang uri ng luminescence ay kadalasang maaaring mangyari, halimbawa, fine-granular at nucleolar, na karaniwan para sa mga antibodies sa Scl-70.

Minsan sa mga mababang dilution ang isang uri ng fluorescence ay nangingibabaw, halimbawa butil-butil, at sa mga karagdagang dilution, ang homogenous o centromeric na mga uri ng fluorescence ay ipinahayag, na nagpapahiwatig ng pagkakaroon ng iba't ibang uri ng ANA sa serum ng pasyente.

Antinuclear factor sa HEp-2 cell line (ANF) ay isang pagsubok para sa pagtuklas ng mga antinuclear antibodies gamit ang hindi direktang immunofluorescence.

Sa systemic lupus erythematosus (SLE) at iba pang systemic rheumatic disease, ang immune response ay nakadirekta laban sa nucleoprotein antigens, i.e. complex ng mga nucleic acid at protina. Ang mga endogenous nucleoprotein complex na ito ay nabuo sa panahon ng proseso ng apoptosis ng mga epithelial cells at kahawig ng mga dayuhang viral particle. Ang pagpapabilis ng mga proseso ng apoptosis sa ilalim ng impluwensya ng ultraviolet irradiation, mga impeksyon sa viral at mga gamot ay nagti-trigger ng mga autoimmune na tugon sa SLE. Sa panahon ng apoptosis, ang mga pangunahing antigen ng antibody ay namumuo sa mga apoptotic na katawan, na nagiging mga target para sa mga autoantibodies. Sa kasalukuyan, mga 200 uri ng antibodies sa mga nucleoprotein at ribonucleic acid, na tinatawag na antinuclear antibodies, ang inilarawan. Sa mga sakit na autoimmune, ang mga autoantibodies sa mga nuclear antigen ay walang direktang cytotoxic effect sa mga selula ng tao, gayunpaman, ang mga immune complex ay may kakayahang mag-trigger ng immunological na pamamaga, lalo na sa mga lugar kung saan ang mga vessel ay lalo na manipis, kabilang ang mga bato, balat, central nervous system, synovium ng joints, at pleura.

Ang pagsusuri sa antinuclear factor (ANF) ay ang pangunahing paraan para sa pag-detect ng mga antinuclear antibodies, na nagpapahintulot sa pagtuklas ng mga autoantibodies sa mga nucleic acid (dsDNA, ssDNA, RNA), ribonucleoproteins, pati na rin ang karamihan sa mga conformational at hindi matutunaw na antigens.

Ang mga antinuklear na antibodies ay nakikita sa pamamagitan ng kanilang pagbubuklod sa mga intracellular antigens ng isang tuloy-tuloy na human epithelial cell line (HEp-2). Ang nucleus at cytoplasm ng HEp-2 cells ay naglalaman ng lahat ng antigens na katangian ng katawan ng tao, na ginagawang posible na makita ang lahat ng pangunahing antinuclear antibodies sa isang pagsubok. Ang paraan ng hindi direktang immunofluorescence sa HEp2 cell line ay inirerekomenda bilang gold standard para sa pag-detect ng antinuclear antibodies sa pamamagitan ng nangungunang European (EASIgroup2010) at American experts (ACRANATaskforce2008). Dahil sa pagkakaiba-iba ng antinuclear antibody antigens, hindi lahat ng mga ito ay maaaring purified o synthesize para magamit sa enzyme immunoassays para sa pagtuklas ng mga antinuclear antibodies.

Ang pagiging positibo para sa ANF sa HEp-2 cell line ay sinusunod sa systemic lupus erythematosus (SLE), systemic rheumatic disease at maraming mga autoimmune disease, na ginagawa itong isang unibersal na pagsubok sa pagsusuri ng mga pasyente na may autoimmune pathology. Ang isang positibong resulta ng ANF ay sinusunod sa higit sa 90% ng mga pasyente na may nagkakalat na mga sakit sa connective tissue, tulad ng systemic lupus erythematosus at mga cutaneous form ng sakit na ito, scleroderma at mga uri nito, mixed connective tissue disease, Sjogren's syndrome. Ang pagtuklas ng ANF ay napakahalaga sa pagsusuri ng juvenile rheumatoid arthritis at autoimmune liver disease. Ang mga kinatawan ng pamilyang ito ng mga autoantibodies ay matatagpuan sa maraming iba pang autoimmune (thyroiditis, diabetes), nakakahawa (viral hepatitis), nagpapasiklab at oncological na mga sakit. Ang saklaw ng ANF ay umabot sa 1–3% sa mga klinikal na malusog na tao at bahagyang tumataas sa mga taong higit sa 65 taong gulang. Ang mga indibidwal na may mataas na titer ng ANF ay nasa mas mataas na panganib na magkaroon ng mga sakit na autoimmune.

Mga indikasyon:

  • Systemic lupus erythematosus.
  • Subacute cutaneous lupus at iba pang uri ng cutaneous lupus.
  • Mixed connective tissue disease.
  • Sjögren's syndrome at mga kaugnay na sakit.
  • Nagkalat at naisalokal na scleroderma, CREST syndrome.
  • Mga nagpapasiklab na myopathies (polymyositis at dermatomyositis).
  • Juvenile talamak na arthritis.
  • Autoimmune hepatitis.
  • Pangunahing biliary cirrhosis at sclerosing cholangitis.
  • Polyneuropathy at myelitis.
Paghahanda


Inirerekomenda na mag-donate ng dugo sa umaga, sa pagitan ng 8 am at 12 pm. Ang dugo ay kinukuha nang walang laman ang tiyan o 4-6 na oras pagkatapos ng huling pagkain. Pinapayagan na uminom ng tubig na walang gas at asukal. Sa bisperas ng pagsusuri, dapat na iwasan ang labis na pagkain.

Interpretasyon ng mga resulta
Mga yunit ng pagsukat: titer.

Mga halaga ng sanggunian:<1:160 (отрицательно).

Ang resulta ng pagtukoy ng ANF ay ang titer, na siyang halaga ng panghuling pagbabanto ng suwero kung saan nananatili ang makabuluhang fluorescence ng nucleus. Kung mas mataas ang denominator ng fraction, mas malaki ang dilution ng serum, mas maraming antibodies sa serum ng pasyente. Ang mataas na serum dilution titers ay sumasalamin sa mataas na affinity at konsentrasyon ng mga autoantibodies.

Ang pagtuklas ng mataas na antas (1/640 at mas mataas) ay nagpapahiwatig ng mataas na posibilidad ng systemic rheumatic disease o autoimmune liver disease at nangangailangan ng maingat na klinikal, laboratoryo at instrumental na pagsusuri. Ang kawalan ng mataas na antinuclear factor titers ay makabuluhang binabawasan ang posibilidad ng systemic autoimmune disease.

Sa mababang titers (hanggang 1/160), ang antinuclear factor ay maaaring maobserbahan sa 1-2% ng mga malulusog na indibidwal at mga kamag-anak ng mga pasyente na may mga sistematikong sakit. Ang dalas ng mga positibong titer sa populasyon ay bahagyang tumataas sa edad. Ang mababang titer ng antinuclear antibodies ay maaaring mangyari sa maraming autoimmune, infectious at oncological na sakit. Ang kawalan ng mataas na titer ng antinuclear antibodies ay makabuluhang binabawasan ang posibilidad ng isang sistematikong proseso ng rheumatic at maaaring gamitin upang ibukod sa halip na kumpirmahin ang diagnosis.

Antinuclear factor

Antinuclear factor– pagsusuri sa laboratoryo na naglalayong tukuyin ang iba't ibang uri ng mga tiyak na immunoglobulin para sa mga istruktura ng cell nucleus. Ang antas ng ANF ay tumataas sa systemic connective tissue disease. Ang pagsusulit ay ginagawa para sa layunin ng pag-diagnose, pag-iiba, pagsubaybay sa paggamot, at pagtukoy ng mga exacerbations. Inireseta para sa mga klinikal at laboratoryo na palatandaan ng systemic lupus erythematosus, scleroderma, Sharp's syndrome, Sjogren's syndrome, rheumatoid arthritis, inflammatory myopathy. Ang venous blood serum ay sinusuri ng paraan ng RNIF. Ang normal na indicator ay isang titer na hindi mas mataas sa 1:160. Ang time frame para sa paghahanda ng data ng pagsubok ay 8 araw ng trabaho.

Ang mga sakit na rayuma ay batay sa isang autoimmune na reaksyon laban sa mga istruktura ng cell nucleus - mga complex ng mga protina at nucleic acid. Ang mga antigen ay nabuo sa panahon ng naka-program na pagkamatay ng mga epithelial cells at lymphocytes. Ang mga sinag ng ultraviolet, mga nakakahawang ahente, at mga gamot ay nagpapabilis sa pagkasira ng mga selula, nagpapabagal sa pag-alis ng mga apoptotic na katawan, at pumukaw sa pagbuo ng mga proseso ng autoimmune. Ang mga antibodies sa mga istrukturang nuklear ay kinakatawan ng maraming uri kapag pinag-aaralan ang antinuklear na kadahilanan, mga walo ang natukoy. Ang bentahe ng pagsubok ay ang mataas na pagtitiyak nito - nakakakita ito ng mga antibodies na hindi mapadalisay ng ELISA. Gayunpaman, ang ilan sa mga immune complex ay kinukuha sa plasma kapag nagsasagawa ng RNIF, kaya may posibilidad ng maling negatibong resulta.

Mga indikasyon

Ang pag-aaral ng antinuclear factor ay ipinahiwatig para sa systemic pathologies ng connective tissue. Ang batayan para sa pagrereseta ng pagsusulit ay:

  • Sintomas ng sakit na rayuma. Ang mga katangiang pagpapakita ay lagnat, pagkapagod, panghihina, pagbaba ng timbang, pananakit ng kalamnan at kasukasuan, at mga pantal sa balat. Ang pagsusulit ay ginagamit upang matukoy at matukoy ang pagkakaiba ng SLE, scleroderma, Sjögren's syndrome, Sharp's syndrome, rheumatoid arthritis, at inflammatory myopathies.
  • Mga resulta ng pagsubok sa laboratoryo. Ang hinala ng rheumatic pathology ay lumitaw kapag tumaas ang ESR, C-reactive protein at CEC. Ang isang pagsubok ay iniutos upang kumpirmahin ang diagnosis.
  • Diagnosis ng sakit na rayuma. Ang pagsusuri ay isinasagawa ng maraming beses sa isang taon (ang dalas ay tinutukoy nang paisa-isa) upang masubaybayan ang kurso ng patolohiya, pagkatapos ng kurso ng paggamit ng mga immunosuppressant - upang masuri ang pagiging epektibo ng therapy.

Paghahanda para sa pagsusuri

Biomaterial para sa pagtukoy ng antinuclear factor - venous blood. Ang pamamaraan ng koleksyon ay isinasagawa sa umaga. Ang mga patakaran sa paghahanda ay ang mga sumusunod:

  1. Ang huling pagkain ay dapat kunin nang hindi lalampas sa 4 na oras. Ang pag-inom ng tubig ay pinapayagan anumang oras.
  2. Ang alkohol, pisikal na aktibidad, at emosyonal na mga karanasan ay dapat na iwasan sa araw bago ang pamamaraan.
  3. Ang paggamit ng mga gamot ay dapat talakayin sa iyong doktor. Ang ilang mga gamot ay pumukaw sa paggawa ng mga antibodies, ang pagbuo ng lupus na dulot ng droga. Habang kumukuha ng glucocorticosteroids, posibleng makakuha ng maling negatibong data.
  4. Ang mga instrumental diagnostic procedure at physiotherapy session ay dapat isagawa pagkatapos mag-donate ng dugo.
  5. Ang paninigarilyo ay ipinagbabawal sa huling 30 minuto bago ang pamamaraan.

Sa laboratoryo, ang serum ay nakahiwalay sa dugo. Ang pagpapasiya ng mga antinuclear antibodies sa loob nito ay isinasagawa ng pamamaraang RNIF gamit ang HEp-2 cell culture. Ang titer ay tinasa ng pinakamataas na pagbabanto ng biomaterial, kung saan ang luminescence ng mga istrukturang nuklear ay nakita, ang uri ng mga immunoglobulin - sa pamamagitan ng likas na katangian ng fluorescence. Ang panahon ng pagsusuri ay 6-8 araw.

Mga normal na halaga

Karaniwan, negatibo ang resulta ng antinuclear factor test. Ang titer ay hindi mas mataas sa 1:160 para sa mga matatanda at bata. Kapag binibigyang-kahulugan ang panghuling halaga, ang mga sumusunod na tala ay isinasaalang-alang:

  • Ang mababang titer ng ANA ay binabawasan ang posibilidad ng autoimmune pathology, ngunit huwag itong ibukod. Sa SLE, sa 5% ng mga kaso ay negatibo ang resulta;
  • Ang pagkakaroon ng normal na resulta pagkatapos ng kurso ng immunosuppressive therapy ay nagpapatunay sa tagumpay nito.
  • Ang isang negatibong resulta laban sa background ng mga sintomas ng autoimmune pathology ay nangangailangan ng mga karagdagang pagsusuri (NCA, ANA ng ELISA).

Pagtaas ng indicator

Ang mga antinuclear antibodies ay walang mga cytotoxic na katangian, ngunit pagkatapos nilang magbigkis sa mga antigen, ang mga immune complex ay nabuo na nag-trigger ng pamamaga sa mga vascular wall. Ang mga ito ay ipinahayag sa pamamagitan ng mga sugat sa balat, glomeruli, magkasanib na lamad, at pleura. Ang mga sintomas na katangian ng systemic pathologies ay bubuo. Ang mga posibleng sakit ay tinutukoy ng uri ng glow na may kaunting serum dilution:

  • homogenous. Ang diffuse fluorescence ay nagpapahiwatig ng pagkakaroon ng mga antibodies sa ds DNA at mga histones. Natukoy sa SLE at lupus na dulot ng droga.
  • paligid. Ang uri ng luminescence ay tinutukoy ng lokasyon ng chromatin at natutukoy sa pagkakaroon ng Ig sa mga bahagi ng DNA na tiyak para sa SLE.
  • butil-butil. Ang mga antigen ay mga complex ng nucleoproteins. Ang glow ay hindi tiyak at matatagpuan sa maraming sakit sa rayuma. Ang mataas na titer at coarse-grained fluorescence ay pinaka katangian ng Sharpe's syndrome.
  • Nuclear. Sinasalamin ang pagkakaroon ng tiyak na Ig sa mga istruktura ng nucleolus. Nakikita ang scleroderma at Sjögren's syndrome. Bihirang maobserbahan sa endocrinopathies, skin pathologies, at organ transplants.
  • Centromeric. Ang mga antigen ay ang mga sentromer ng mga kromosom. Kinukumpirma ng glow ang limitadong scleroderma.
  • Cytoplasmic. Ito ay pinukaw ng pagkakaroon ng mga antibodies sa tRNA synthetase (Jo-1), ribosome, at organelles. Nagbibigay-daan sa iyo na matukoy ang mga nagpapaalab na myopathies at autoimmune na pinsala sa atay.
  • Mitochondrial. Ang mga antigen ay mga bahagi ng pyruvate decarboxylase complex. Ang glow ay katangian ng pangunahing biliary cirrhosis.
  • Spot. Nauugnay sa sirkulasyon ng mga antibodies sa mga nucleoprotein, na nauugnay sa pinsala sa atay ng autoimmune.

Pagbaba ng indicator

Ang pagbaba sa indicator ay may prognostic value kapag sinusubaybayan ang systemic connective tissue disease. Ang antas ng ANA ay nauugnay sa aktibidad ng mga proseso ng pathological, kaya ang pagbawas sa kanilang konsentrasyon ay isang tanda ng pagpapatawad at tagumpay ng therapy.

Antinuclear antibodies- ang pangkalahatang pangalan ng isang pangkat ng mga antibodies na nakadirekta laban sa iba't ibang bahagi ng cell, ang kanilang hitsura ay nauugnay sa mga sakit na autoimmune, pangunahin.

kasingkahulugan: antinuclear antibodies, antinuclear factor, antinuclear factor, antibodies sa mga na-extract na nuclear (nuclear) antigens, antinuclear antibodies, Hep-2 substrate, ANA-Hep2, fluorescent antinuclear antibody detection, ANA, FANA

Ang mga antinuclear antibodies ay

isang kumplikadong mga antibodies (higit sa 200), pangunahin ang mga immunoglobulin G (mas madalas na IgM at IgA), ay lumilitaw bilang isang resulta ng isang paglabag sa mekanismo ng autotolerance sa mga autoimmune at rheumatic na sakit.

Sa ilang mga kaso, ang immune response ay nakadirekta hindi laban sa mga estranghero, ngunit laban sa sariling mga tisyu. Sa kasong ito, pinag-uusapan nila sakit na autoimmune. At ang mga antibodies na ginawa sa sarili nilang mga selula o mga bahagi nito ay tinatawag autoimmune.

Karamihan sa mga tao ay may maliit (!) na dami ng mga autoantibodies sa kanilang dugo, na hindi isang pagpapakita ng sakit.

Sa kaganapan lamang ng isang malubhang pagkasira sa immune system, ang antas ng mga autoantibodies ay nagiging mataas at sapat upang makagawa ng diagnosis.

Maaaring maging positibo ang ANA bago pa man lumitaw ang mga unang sintomas ng sakit. Humigit-kumulang 95% ng mga pasyente na may systemic lupus erythematosus ay may mga antinuclear antibodies sa kanilang dugo. Ang pagkakaroon ng mga sintomas ng lupus ay nagpapatunay sa diagnosis.

Mekanismo ng edukasyon

  • Ang pagkakalantad sa mga sinag ng ultraviolet sa balat ay humahantong sa pag-activate ng programmed cell death (apoptosis), na isang normal na reaksyon ng katawan, ngunit sa kaso ng mga systemic na sakit ay sabay-sabay silang lumilipat nang marami.
  • Ang mga sangkap ng cell na dati ay hindi naa-access at hindi nakikita ng immune system, tulad ng nucleoli, histones, nuclear membrane, atbp., ay "hubad," at ang mga macrophage, sa halip na "i-disposing" lamang ang materyal na ito, ay nagpapadala ng isang senyas tungkol dito. ang kadena ng immune response
  • Ang mga B lymphocyte, bilang tugon sa isang senyas mula sa isang macrophage, ay nagsisimulang gumawa ng mga antinuclear antibodies, na nagbubuklod sa kaukulang antigen at bumubuo ng mga immune complex (nuclear antigen + antibody IgG, IgM, IgA)
  • Ang mga immune complex ay naninirahan sa basement membrane ng iba't ibang mga organo at tisyu, lalo na ang mga daluyan ng dugo, at i-activate ang complement system - isang lokal na nagpapasiklab na tugon
  • ang resulta ay pinsala at dysfunction ng organ

Ang mga antinuclear antibodies ay nakadirekta laban sa iba't ibang mga istruktura ng isang normal na cell.

Mga uri ng antinuclear antibodies:

  • anti-Ro (SS-A) - mga antibodies sa mga protina na nauugnay sa RNA Y1-Y5 sa spliceosomes
  • anti-Jo1 - mga antibodies sa cytoplasmic antigen Jo-1
  • anti-Sm
  • anti-La (SS-B) - mga antibodies sa protina na nauugnay sa RNA polymerase-3
  • anti-Sci 70 - mga antibodies sa nuclear topoisomerase
  • anti-U1 RNP - mga antibodies sa U1 ribonucleoprotein
  • anticentromere antibodies
  • antihistone antibodies


Mga indikasyon

  • diagnosis ng systemic lupus erythematosus, Schergen's syndrome

Systemic lupus erythematosus

Systemic lupus erythematosus- autoimmune disease ng connective tissue at mga daluyan ng dugo. Ito ang pinakamalalang sakit ng connective tissue, na nagdudulot ng matinding pananakit sa mga kasukasuan, pinsala sa balat ("butterfly"), serous membrane, puso, bato, nervous system, baga, at trophic disorder.

Mga sintomas

  • arthritis - pamamaga ng kasukasuan, na ipinakita sa pamamagitan ng sakit, pamamaga, kapansanan sa kadaliang kumilos, pamumula ng balat at pagtaas ng temperatura sa ibabaw nito
  • pamamaga ng panlabas na lining ng puso o pleura (o) ng hindi kilalang pinanggalingan
  • mga pagbabago sa mga resulta (, - protina o pulang selula ng dugo sa ihi)
  • - pagkasira habang tumataas ang antas
  • thrombocytopenia - nabawasan ang bilang sa
  • - nabawasan ang bilang sa
  • mga sintomas ng balat - pantal, pampalapot ng balat, lalo na pagkatapos aktibo
  • Raynaud's syndrome - panaka-nakang pagkawalan ng kulay ng mga daliri sa paa at kamay (asul at pamumula) na may kapansanan sa sensitivity at sakit
  • atypical neurological at psychiatric na sintomas
  • pagtaas ng temperatura ng katawan, pagkapagod, pagbaba ng timbang,

Paraan

Mayroong dalawang paraan para sa pagtukoy ng antinuclear antibodies sa dugo.

Hindi direktang immunofluorescence microscopy(FANA - fluorescent antinuclear antibody test) sa isang paghahanda ng Hep-2 cells (isang cell line na nakuha mula sa adenocarcinoma ng larynx) - antinuclear antibodies (kung mayroon) ay nagbubuklod sa mga antigen ng Hep-2 cells, magdagdag ng mga espesyal na makinang na label na nakakabit sa nabuong complex at sa ilalim Ang intensity at uri ng glow ay sinusuri gamit ang microscope. Ang pinakamahusay na paraan para sa pag-aaral ng antinuclear antibodies. Ibang pangalan - .

Ang resulta ng pag-aaral ay nakasulat sa anyo ng isang titer - ang pinakamataas na pagbabanto ng dugo kung saan ang glow ay makikita din ang uri ng fluorescence (sa kaso ng isang positibong resulta). Ang mas maraming antibodies, mas mataas ang titer. Ang mababang titer ay itinuturing na negatibo, habang ang mataas na titer ay nagpapahiwatig ng pagtaas ng konsentrasyon ng mga antinuclear antibodies.

Mga uri ng fluorescence sa pagtatasa ng ANA:

  • homogenous (diffuse, homogeneous) - para sa systemic lupus erythematosus, mixed connective tissue disease (MCTD)
  • butil-butil (granular) - para sa systemic lupus erythematosus, Sjögren's syndrome, scleroderma, rheumatoid arthritis at MCTD - ang pinaka hindi tiyak
  • nucleolar (nucleolar) - para sa scleroderma at polymyositis
  • centromeric - para sa scleroderma at CREST syndrome
  • cytoplasmic - dermatomyositis, polymyositis, autoimmune liver disease, pangunahing biliary cirrhosis

Halimbawa ng positibong resulta ng pagsusuri ng antinuclear antibody: “ Positibong dilution/titer 1:320, homogenous na larawan“.


Algorithm ng mga aksyon ng isang doktor pagkatapos masuri ang mga antinuclear antibodies gamit ang FANA method

  • negatibong resulta ng pagsusuri para sa antinuclear antibodies + mga sintomas - magsagawa ng mga pagsusuri: anti-Ro at anti-Jo1
  • positibong resulta ng pagsubok para sa antinuclear antibodies + presensya/kawalan ng mga sintomas - magsagawa ng mga pagsusuri para sa anti-DNA, anti-Sm, anti-Ro, anti-histone at anti-centromere antibodies, anti-Sci-70, anti-U1 RNP, anti- Jo1 - depende sa mga manifestations sakit

Enzyme immunoassay

Enzyme immunoassay (ELISA)) - ang mga antibodies na naroroon sa dugo ay nagbubuklod sa kaukulang antigen, na humahantong sa pagbabago sa kulay ng solusyon.

  • mas mababa sa 1.0 U - negatibong resulta (normal)
  • 1.1-2.9 U - mahinang positibo (nangangailangan ng pag-uulit)
  • 3.0-5.9 U - positibo
  • higit sa 6.0 - malinaw na positibo

Positibong antinuclear antibody test na resulta- hindi ito isang diagnosis, ngunit isang tandang padamdam tungkol sa pangangailangan para sa karagdagang pananaliksik. Nangangailangan ng pana-panahon, mas masusing pagsusuri upang matukoy ang isang posibleng sakit sa lalong madaling panahon.

Ang isang negatibong resulta ng pagsusuri para sa mga antinuclear antibodies ay nagpapahiwatig ng kanilang kawalan sa dugo, ngunit hindi ibinubukod ang diagnosis ng isang sakit na autoimmune.

Norm

Karaniwan, walang antinuclear antibodies sa dugo.

Karagdagang Pananaliksik

  • pangkalahatang pagsusuri ng ihi
  • rheumatic test - rate ng sedimentation ng erythrocyte (ESR),
  • nagpapalipat-lipat ng mga immune complex
  • Kumpletuhin ang bahagi C3
  • Kumpletuhin ang bahagi C4


Ano ang nakakaimpluwensya sa resulta?

  • mga gamot - procainamide, phenytoin, penicillin, hydralazine
  • Mga talamak na impeksyon sa paghinga at sipon, anumang talamak o talamak na nakakahawang sakit

Mga dahilan para sa ANA

1. Mga sakit sa systemic connective tissue

  • — 95-100%, ang pagtuklas ng mga antinuclear antibodies ay tumutukoy sa diagnosis
  • (5-25%)
  • (100%)
  • (30-50%)
  • juvenile rheumatoid arthritis (20-50%)
  • (40-70%)
  • (30-80%)
  • (Sharpe's syndrome) 100%
  • autoimmune hepatitis (
Ibahagi